【技術實現步驟摘要】
本公開涉及微生物和基因工程，具體地，涉及一種甲基轉移酶在增強固氮微生物的固氮能力方面的用途和方法。
技術介紹
1、dna甲基化是指dna序列上特定的堿基在dna甲基轉移酶的催化作用下，以s-腺苷甲硫氨酸（s-adenosyl?methionine，sam）作為甲基供體，通過共價鍵結合的方式獲得一個甲基基團的化學修飾過程。植物等真核生物在面臨氧氣、干旱、高溫等非生物脅迫時，通過dna甲基化等表觀遺傳修飾方式激活自身防御反應，而微生物為了適應復雜多變的外界環境，主要通過dna甲基化的方式進行基因表達的調控。
2、固氮菌中的生物固氮是一個復雜調控系統，在固氮過程中對氧敏感且十分依賴能量。因此，通過合成生物學的手段，從表觀遺傳修飾的角度改造固氮調控元件與功能模塊，構建作物根際人工高效固氮體系。目前研究中，沒有將dna甲基轉移酶編碼基因應用在固氮菌中進而調控固氮酶活性方面的應用。
技術實現思路
1、本公開的目的是提供一種甲基轉移酶在增強固氮微生物的固氮能力方面的用途和方法，編碼甲基轉移酶的基因能夠提高固氮微生物固氮基因的表達量，提高固氮微生物中固氮酶的活性，進而提高了固氮微生物固氮的能力。
2、為了實現上述目的，本公開提供第一方面提供甲基轉移酶在增強固氮微生物的固氮能力方面的用途，所述甲基轉移酶的氨基酸序列如seq?id?no.1所示。
3、可選地，編碼所述甲基轉移酶的基因的核苷酸序列如seq?id?no.2所示。
4、可選地，所述固氮微生物為
5、可選地，增強固氮微生物的固氮能力包括提高固氮微生物中固氮酶活性和固氮基因的表達量。
6、可選地，所述固氮基因為 nifh、 nifd和 nifk。
7、本公開第二方面提供一種增強固氮微生物的固氮能力的方法，該方法包括以下步驟：將編碼甲基轉移酶的基因導入固氮微生物中并使其過表達；所述甲基轉移酶的氨基酸序列如seq?id?no.1所示；編碼所述甲基轉移酶的基因的核苷酸序列如seq?id?no.2所示。
8、可選地，所述重組表達載體含有組成型啟動子；所述組成型啟動子的核苷酸序列如seq?id?no.3中的第1位-第176位所示。
9、可選地，所述固氮微生物為施氏假單胞菌。
10、可選地，增強固氮微生物菌的固氮能力包括提高固氮微生物中固氮酶活性和固氮基因的表達量。
11、可選地，所述固氮基因為 nifh、 nifd和 nifk。
12、通過上述技術方案，本公開提供了一種甲基轉移酶在增強固氮微生物的固氮能力方面的用途和方法。本公開將編碼甲基轉移酶的基因導入固氮微生物中并使其過表達，能夠提高固氮微生物中固氮基因的表達，提高固氮微生物中固氮酶的活性，進而提高了固氮微生物固氮的能力，尤其是增強施氏假單胞菌的固氮能力。
13、本公開的其他特征和優點將在隨后的具體實施方式部分予以詳細說明。
本文檔來自技高網...【技術保護點】
1.甲基轉移酶在增強固氮微生物的固氮能力方面的用途，其特征在于，所述甲基轉移酶的氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。
2.根據權利要求1所述的用途，其中，編碼所述甲基轉移酶的基因的核苷酸序列如SEQID?NO.2所示。
3.根據權利要求1所述用途，其中，所述固氮微生物為施氏假單胞菌。
4.根據權利要求1-3中任意一項所述的用途，其中，增強固氮微生物的固氮能力包括提高固氮微生物中固氮酶活性和固氮基因的表達量。
5.根據權利要求4所述的用途，其中，所述固氮基因為nifH、nifD和nifK。
6.一種增強固氮微生物的固氮能力的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：將編碼甲基轉移酶的基因導入固氮微生物中并使其過表達；
7.根據權利要求6所述的方法，其中，編碼所述甲基轉移酶的基因通過重組表達載體導入固氮微生物中；
8.根據權利要求7所述的方法，其中，所述固氮微生物為施氏假單胞菌。
9.根據權利要求6-8中任意一項所述的方法，其中，增強固氮微生物菌的固氮能力包括提高固氮微生物中固氮酶活性和固
10.根據權利要求9所述的方法，其中，所述固氮基因為nifH、nifD和nifK。
...【技術特征摘要】
1.甲基轉移酶在增強固氮微生物的固氮能力方面的用途，其特征在于，所述甲基轉移酶的氨基酸序列如seq?id?no.1所示。
2.根據權利要求1所述的用途，其中，編碼所述甲基轉移酶的基因的核苷酸序列如seqid?no.2所示。
3.根據權利要求1所述用途，其中，所述固氮微生物為施氏假單胞菌。
4.根據權利要求1-3中任意一項所述的用途，其中，增強固氮微生物的固氮能力包括提高固氮微生物中固氮酶活性和固氮基因的表達量。
5.根據權利要求4所述的用途，其中，所述固氮基因為nifh、nifd和nifk。
<...【專利技術屬性】
技術研發人員：燕永亮，馬藝源，林敏，戰崳華，
申請(專利權)人：中國農業科學院生物技術研究所，
類型：發明
國別省市：
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