【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)屬于藥物分析，尤其涉及一種葉綠醌(維生素k1)滴劑有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)方法。
技術(shù)介紹
1、葉綠醌(phylloquinone，2-甲基-3-葉綠基-1,4-萘醌，又稱為維生素k1)為2-甲基-3-(3，7，11，15-四甲基-2-十六碳烯基)-1，4-萘二酮的反式和順式異構(gòu)體的混合物。屬維生素類藥物，是肝臟合成因子ⅱ、ⅶ、ⅸ、ⅹ所必需的物質(zhì)。
2、中國藥典(chp2020)、日本藥典(jp18)和美國藥典(usp43)中均未收載本品有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)方法，只在歐洲藥典(ep10.6)中有收載維生素k1原料的有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)方法。歐洲藥典方法采用辛醇-二異丙基醚-庚烷(1:3.3:1000v/v/v)作為流動(dòng)相，色譜柱填料采用硅膠，其方法已經(jīng)不能滿足葉綠醌(維生素k1)滴劑的質(zhì)量要求，其中雜質(zhì)a、雜質(zhì)b和雜質(zhì)c間的分離度低于1.5，按照上述方法不能達(dá)到有效分離(分離度需≥1.5才能有效分離)，且流動(dòng)相體系采用的是純有機(jī)相體系，對(duì)環(huán)境和實(shí)驗(yàn)人員的危害較大。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、有鑒于此，本專利技術(shù)旨在開發(fā)一種葉綠醌(維生素k1)葉綠醌(維生素k1)滴劑有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)方法，能夠準(zhǔn)確有效地定性和定量測(cè)定葉綠醌(維生素k1)滴劑中雜質(zhì)a、雜質(zhì)b和雜質(zhì)c。
2、為達(dá)到以上技術(shù)目的，本專利技術(shù)采用的技術(shù)方案如下：
3、本專利技術(shù)提供一種葉綠醌(維生素k1)滴劑有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)方法，采用高效液相色譜法檢測(cè)，所述高效液相色譜法的檢測(cè)條件包括：以體積百分比濃度為60～70
4、優(yōu)選地，所述高效液相色譜法的檢測(cè)條件中，以體積百分比濃度為60～65％的乙腈水溶液為流動(dòng)相a，體積比計(jì)：乙腈：四氫呋喃＝9～10:1為流動(dòng)相b，進(jìn)行梯度洗脫。
5、進(jìn)一步優(yōu)選地，所述高效液相色譜法的檢測(cè)條件中，以體積百分比濃度為65％的乙腈水溶液為流動(dòng)相a，體積比計(jì)：乙腈：四氫呋喃＝9:1為流動(dòng)相b，進(jìn)行梯度洗脫。
6、優(yōu)選地，所述檢測(cè)方法按照如下的順序進(jìn)行梯度洗脫：0～8分鐘：100％流動(dòng)相a；8～13分鐘：流動(dòng)相a從100％減少到5％，流動(dòng)相b從0增加到95％；13～45分鐘：流動(dòng)相a為5％，流動(dòng)相b為95％；45～50分鐘：流動(dòng)相a從5％增加到100％，流動(dòng)相b從95％減少到0；50～60分鐘：流動(dòng)相a為100％，流動(dòng)相b為0％；26～34分鐘：97％流動(dòng)相a：3％流動(dòng)相b；其中，上述梯度洗脫的每段時(shí)間的范圍可以均增加1-2分鐘或者可以從3～10分鐘起的梯度洗脫時(shí)間范圍可以均減少1-2分鐘。
7、優(yōu)選地，所述高效液相色譜法的檢測(cè)條件還包括：采用以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，采用紫外檢測(cè)器，優(yōu)選地，檢測(cè)波長(zhǎng)為252nm～256nm；和/或，流速為0.9～1.1ml/min；和/或，柱溫為38～40℃。
8、進(jìn)一步優(yōu)選地，所述高效液相色譜法的檢測(cè)條件中，檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm；和/或，流速為1.0ml/min；和/或，柱溫為40℃。
9、優(yōu)選地，所述高效液相色譜法的檢測(cè)條件還包括：溶液的配制，所述溶液包括供試品溶液、對(duì)照品溶液，其中，供試品溶液的制備包括：
10、取葉綠醌(維生素k1)滴劑20粒，將其內(nèi)容物轉(zhuǎn)移至適宜容器中，混合均勻。取混合后的內(nèi)容物適量，精密稱定，加乙腈超聲使溶解并定量稀釋制成每1ml中約含維生素k10.5mg的溶液；
11、所述對(duì)照品溶液的制備包括：
12、精密量取供試品溶液適量，用乙腈稀釋制成每1ml中約含維生素k1?1μg的溶液。
13、優(yōu)選地，所述溶液還包括雜質(zhì)對(duì)照品溶液，所述雜質(zhì)對(duì)照品包括雜質(zhì)a對(duì)照品、雜質(zhì)b對(duì)照品、雜質(zhì)c對(duì)照品中的至少一種；進(jìn)一步優(yōu)選地，所述雜質(zhì)對(duì)照品溶液的制備包括：取雜質(zhì)a對(duì)照品、雜質(zhì)b對(duì)照品、雜質(zhì)c對(duì)照品中的至少一種適量，精密稱定，加無水乙醇超聲使溶解并定量稀釋制成每1ml中含單一雜50μg的溶液。
14、優(yōu)選地，所述雜質(zhì)對(duì)照品的溶液中含有雜質(zhì)a、雜質(zhì)b、雜質(zhì)c。
15、和現(xiàn)有技術(shù)相比，本專利技術(shù)具有以下技術(shù)效果：
16、本專利技術(shù)重新設(shè)計(jì)合理的流動(dòng)相a和流動(dòng)相b組合，并結(jié)合相應(yīng)的洗脫條件進(jìn)行梯度洗脫，即便在雜質(zhì)a、雜質(zhì)b、雜質(zhì)c同時(shí)存在的條件下，雜質(zhì)a、雜質(zhì)b、雜質(zhì)c與維生素k1之間的最小分離度大于2.0，使各組分達(dá)到有效分離，并且能有效檢測(cè)出其它未知雜質(zhì)，為葉綠醌(維生素k1)滴劑的質(zhì)量可靠性、穩(wěn)定性和安全性提供了保障與技術(shù)支持。且本專利技術(shù)的檢測(cè)方法流動(dòng)相體系減少了有機(jī)溶劑的使用，進(jìn)而減輕了對(duì)實(shí)驗(yàn)員和環(huán)境的危害。
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1.一種葉綠醌滴劑有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)方法，其特征在于，采用高效液相色譜法檢測(cè)，所述高效液相色譜法的檢測(cè)條件包括：以體積百分比濃度為60～70％的乙腈水溶液為流動(dòng)相A，體積比計(jì)：乙腈：四氫呋喃＝8～10:1的混合溶液為流動(dòng)相B，進(jìn)行梯度洗脫。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述高效液相色譜法的檢測(cè)條件中，以體積百分比濃度為60～65％的乙腈水溶液為流動(dòng)相A，體積比計(jì)：乙腈：四氫呋喃＝9～10:1為流動(dòng)相B，進(jìn)行梯度洗脫。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述高效液相色譜法的檢測(cè)條件中，以體積百分比濃度為65％的乙腈水溶液為流動(dòng)相A，體積比計(jì)：乙腈：四氫呋喃＝9:1為流動(dòng)相B，進(jìn)行梯度洗脫。
4.根據(jù)權(quán)利要求1～3任一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述檢測(cè)方法按照如下的順序進(jìn)行梯度洗脫：0～8分鐘：100％流動(dòng)相A；8～13分鐘：流動(dòng)相A從100％減少到5％，流動(dòng)相B從0增加到95％；13～45分鐘：流動(dòng)相A為5％，流動(dòng)相B為95％；45～50分鐘：流動(dòng)相A從5％增加到100％，流動(dòng)相B從95％減少到0；50～60分鐘：流
5.根據(jù)權(quán)利要求1～4任一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述高效液相色譜法的檢測(cè)條件還包括：采用以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，采用紫外檢測(cè)器，優(yōu)選地，檢測(cè)波長(zhǎng)為252nm～256nm；和/或，流速為0.9～1.1mL/min；和/或，柱溫為38～40℃。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述高效液相色譜法的檢測(cè)條件中，檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm；和/或，流速為1.0mL/min；和/或，柱溫為40℃。
7.根據(jù)權(quán)利要求1～6任一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述高效液相色譜法的檢測(cè)條件還包括：溶液的配制，所述溶液包括供試品溶液、對(duì)照品溶液，其中，供試品溶液的制備包括：
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述溶液還包括雜質(zhì)對(duì)照品溶液，所述雜質(zhì)對(duì)照品包括雜質(zhì)A對(duì)照品、雜質(zhì)B對(duì)照品、雜質(zhì)C對(duì)照品中的至少一種；優(yōu)選地，所述雜質(zhì)對(duì)照品溶液的制備包括：取雜質(zhì)A對(duì)照品、雜質(zhì)B對(duì)照品、雜質(zhì)C對(duì)照品中的至少一種適量，精密稱定，加無水乙醇超聲使溶解并定量稀釋制成每1ml中含單一雜50μg的溶液。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述雜質(zhì)對(duì)照品的溶液中含有雜質(zhì)A、雜質(zhì)B、雜質(zhì)C。
...【技術(shù)特征摘要】
1.一種葉綠醌滴劑有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)方法，其特征在于，采用高效液相色譜法檢測(cè)，所述高效液相色譜法的檢測(cè)條件包括：以體積百分比濃度為60～70％的乙腈水溶液為流動(dòng)相a，體積比計(jì)：乙腈：四氫呋喃＝8～10:1的混合溶液為流動(dòng)相b，進(jìn)行梯度洗脫。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述高效液相色譜法的檢測(cè)條件中，以體積百分比濃度為60～65％的乙腈水溶液為流動(dòng)相a，體積比計(jì)：乙腈：四氫呋喃＝9～10:1為流動(dòng)相b，進(jìn)行梯度洗脫。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述高效液相色譜法的檢測(cè)條件中，以體積百分比濃度為65％的乙腈水溶液為流動(dòng)相a，體積比計(jì)：乙腈：四氫呋喃＝9:1為流動(dòng)相b，進(jìn)行梯度洗脫。
4.根據(jù)權(quán)利要求1～3任一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法，其特征在于，所述檢測(cè)方法按照如下的順序進(jìn)行梯度洗脫：0～8分鐘：100％流動(dòng)相a；8～13分鐘：流動(dòng)相a從100％減少到5％，流動(dòng)相b從0增加到95％；13～45分鐘：流動(dòng)相a為5％，流動(dòng)相b為95％；45～50分鐘：流動(dòng)相a從5％增加到100％，流動(dòng)相b從95％減少到0；50～60分鐘：流動(dòng)相a為100％，流動(dòng)相b為0％；26～34分鐘：97％流動(dòng)相a：3％流動(dòng)相b；其中，上述梯度洗脫的每段時(shí)間的范圍可以均增加1-2分鐘或者可以...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：張銳，申天天，張銳敏，黃玉香，趙小君，陳可達(dá)，諶宗永，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：北京陽光諾和藥物研究股份有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：
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