【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及生物與醫藥，具體涉及一種截肢后繼發性疼痛模型的構建方法。
技術介紹
1、截肢是指肢體的遠端切除，臨床上，截肢手術通常是指將壞死的、毀損的、患有嚴重病變、疼痛并有害于生命的肢體，或完全廢用而有礙功能的肢體截除的治療措施。截肢者常伴有顯著的疼痛，臨床研究表明，除了殘肢痛和幻肢痛之外，半數以上的上肢或者下肢截肢患者也伴有顯著的腰背痛和非截肢肢體的疼痛等繼發性疼痛。因此，研究截肢后繼發性疼痛的神經機制對于緩解截肢患者的痛苦具有重要意義。
2、目前通常采用殘端神經瘤動物模型模擬截肢，可以進行殘肢痛和幻肢痛的檢測。例如采用坐骨神經橫斷小鼠模型，術后動物會在術后1-3周出現咬掉患肢指甲、足趾甚至腳掌行為，以自噬評分量化動物攻擊去神經支配肢體的程度，在一定程度上模擬了截肢患者神經完全橫斷后中的幻肢痛癥狀；而脛神經瘤移置模型可以用于模擬截肢動物殘肢痛和幻肢痛的檢測。但是，這些常見的殘端神經瘤模型在動物如小鼠中的建立能否誘導穩定且易評估截肢后繼發性疼痛的產生還不清楚，目前如何模擬截肢患者腰背痛和非截肢肢體疼痛等非損傷部位的繼發性疼痛是基礎研究的難點。
技術實現思路
1、為了解決上述殘端神經瘤模型誘導動物產生截肢后繼發性疼痛的不確定性，本專利技術的目的在于提供一種能夠誘導穩定且易測量的截肢后繼發性疼痛的小鼠模型，便于對截肢后繼發性疼痛的機制研究。
2、為了達到上述專利技術目的，本專利技術采用的技術方案為：
3、提供一種截肢后繼發性疼痛模型的構建方法，其包
4、將小鼠麻醉，利用剪刀在小鼠前肢的腕骨-橈骨交界處進行肢體離斷，將小鼠截肢肢體殘端縫合，通過von?frey纖維絲檢測小鼠殘肢同側后肢和對側前肢的疼痛閾值，構建截肢后繼發性疼痛模型。
5、進一步地，具體包括以下子步驟：
6、(1)將小鼠頭部放入氣麻機的吸入式面罩，打開氣麻機旋鈕，使得小鼠持續吸入異氟烷，術中處于全程麻醉狀態；
7、(2)向小鼠左前肢或右前肢注射0.5％利多卡因，用于肢體截斷處的局部鎮痛；
8、(3)利用剪刀在小鼠前肢的腕骨-橈骨交界處進行肢體離斷；
9、(4)采用可吸收的帶線縫合針將小鼠截肢肢體殘端縫合；
10、(5)向小鼠殘肢處涂抹紅霉素眼膏用于抑菌，將其頭部從氣麻機面罩中取出，放置于加熱墊上維持其體溫，待小鼠蘇醒后，放回原飼養環境；
11、(6)術后48小時內注射卡洛芬和恩諾沙星緩解小鼠的痛苦，并每天觀察小鼠的狀態；
12、(7)術后通過von?frey纖維絲檢測小鼠殘肢同側后肢和對側前肢的疼痛閾值，構建截肢后繼發性疼痛模型。
13、本專利技術的有益效果為：
14、(1)該方法可以較好的模擬臨床中上肢截肢的情況。
15、(2)通過該方法，模型小鼠能夠產生穩定且顯著的同側后肢和對側前肢等非損傷部位的繼發性疼痛。
16、(3)構建方法全過程時間短，術后小鼠蘇醒快，術后幾天內即可誘導小鼠出現繼發性疼痛，成功率高。
17、(4)構建方法操作簡單，安全性高，可重復性強。
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1.一種截肢后繼發性疼痛模型的構建方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的截肢后繼發性疼痛模型的構建方法，其特征在于，具體包括以下子步驟：
【技術特征摘要】
1.一種截肢后繼發性疼痛模型的構建方法，其特征在于，包括以下步驟：
2....
【專利技術屬性】
技術研發人員：張智，衛鴻芮，陶文娟，晉艷，唐蘭，李樂嫻，吳潤杰，
申請(專利權)人：中國科學技術大學，
類型：發明
國別省市：
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