【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及生物檢測(cè)，具體而言，涉及一種sflt-1檢測(cè)試劑盒。
技術(shù)介紹
1、可溶性?fms?樣酪氨酸激酶?1(sflt-1)?是一種對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子有高度親和力的蛋白受體，它在心血管疾病和腫瘤等疾病中發(fā)揮著重要的作用。sflt-1?與其配體血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子?(vegf)?結(jié)合后，可以抑制?vegf?與?flt-1?的結(jié)合，從而抑制?vegf的信號(hào)通路。此外，sflt-1?還可以抑制其他信號(hào)通路，如細(xì)胞周期素?d1?的表達(dá)，從而發(fā)揮其生物學(xué)作用。目前已有研究表明孕中期孕婦血清中sflt-1水平的檢測(cè)對(duì)先兆子癇的發(fā)生有良好的預(yù)測(cè)價(jià)值，且有研究說(shuō)明子癇前期胎盤(pán)形成不良、胎盤(pán)低灌注及胎盤(pán)缺氧在子癇前期發(fā)病中有重要作用，因此sflt-1的檢測(cè)在輔助診斷先兆性子癇方面有重要的意義。
2、存在的問(wèn)題是：目前常規(guī)的sflt-1檢測(cè)試劑盒檢測(cè)容易受到干擾，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本專利技術(shù)解決了現(xiàn)有sflt-1檢測(cè)試劑盒檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確的技術(shù)問(wèn)題，實(shí)現(xiàn)了提高檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性，且操作簡(jiǎn)便、反應(yīng)時(shí)間短、檢測(cè)靈敏度高的技術(shù)效果。
2、為解決上述問(wèn)題，本專利技術(shù)提供一種sflt-1檢測(cè)試劑盒，包括：磁微粒懸浮液，磁微粒懸浮液包含包被有sflt-1抗體的磁微粒、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5%-5%乙二胺四乙酸二鈉；sflt-1抗體檢測(cè)試劑，sflt-1抗體檢測(cè)試劑包含吖啶酯標(biāo)記的sflt-1抗體。
3、與現(xiàn)有技術(shù)相比，采用該技術(shù)方案所達(dá)到的技術(shù)效果：本專利技術(shù)利用磁
4、在本專利技術(shù)的一個(gè)實(shí)例中，磁微粒為氨基磁珠、羧基磁珠、鏈霉親和素磁珠中的任一種。
5、與現(xiàn)有技術(shù)相比，采用該技術(shù)方案所達(dá)到的技術(shù)效果：磁微粒是由高分子單體聚合而成的微球或顆粒，直徑多為微米級(jí)或毫米級(jí)。氨基磁珠上所帶有的功能團(tuán)氨基，或羧基磁珠上所帶有的功能團(tuán)羧基，或鏈霉親和素磁珠上所帶有的鏈霉親和素，均能夠與sflt-1抗體偶聯(lián)，且偶聯(lián)穩(wěn)定，偶聯(lián)效率高，結(jié)合力強(qiáng)。
6、在本專利技術(shù)的一個(gè)實(shí)例中，包被有sflt-1抗體的磁微粒中磁微粒與sflt-1抗體的摩爾比為1：（5-20）。
7、與現(xiàn)有技術(shù)相比，采用該技術(shù)方案所達(dá)到的技術(shù)效果：磁微粒與sflt-1抗體在該摩爾比下，偶聯(lián)的效率高，穩(wěn)定性佳。
8、在本專利技術(shù)的一個(gè)實(shí)例中，吖啶酯標(biāo)記的sflt-1抗體中吖啶酯與sflt-1抗體的摩爾比為1：（5-20）。
9、與現(xiàn)有技術(shù)相比，采用該技術(shù)方案所達(dá)到的技術(shù)效果：吖啶酯與抗體不適當(dāng)?shù)呐浔葧?huì)出現(xiàn)發(fā)光信號(hào)弱或非特異性結(jié)合等情況，導(dǎo)致檢測(cè)靈敏度低或結(jié)果不準(zhǔn)確，因此限定了吖啶酯與sflt-1抗體的摩爾比，在該摩爾比下，發(fā)光信號(hào)強(qiáng)，檢測(cè)結(jié)果的靈敏度和準(zhǔn)確性佳。
10、在本專利技術(shù)的一個(gè)實(shí)例中，磁微粒懸浮液包含：第一緩沖液、防腐劑、蛋白類穩(wěn)定劑、第一表面活性劑、鹽類物質(zhì)、糖類物質(zhì)。
11、與現(xiàn)有技術(shù)相比，采用該技術(shù)方案所達(dá)到的技術(shù)效果：磁微粒懸浮液中的第一緩沖液能夠維持試劑的ph值相對(duì)穩(wěn)定；防腐劑能夠防止試劑受到微生物的污染，避免變質(zhì)；蛋白類穩(wěn)定劑能夠保持抗體分子結(jié)構(gòu)和活性的穩(wěn)定；第一表面活性劑能夠提高待檢測(cè)物中抗原與抗體的反應(yīng)速率，進(jìn)而提高檢測(cè)速度；鹽類物質(zhì)能夠提供離子環(huán)境，中和抗原抗體電荷，促進(jìn)結(jié)合；糖類物質(zhì)能夠和蛋白質(zhì)分子間形成氫鍵，有利于蛋白質(zhì)構(gòu)象穩(wěn)定性。
12、在本專利技術(shù)的一個(gè)實(shí)例中，sflt-1抗體檢測(cè)試劑包含：第二緩沖液、防腐劑、蛋白類穩(wěn)定劑、第二表面活性劑、鹽類物質(zhì)、糖類物質(zhì)。
13、與現(xiàn)有技術(shù)相比，采用該技術(shù)方案所達(dá)到的技術(shù)效果：sflt-1抗體檢測(cè)試劑中的第二緩沖液能夠維持試劑的ph值相對(duì)穩(wěn)定，保證吖啶酯的發(fā)光信號(hào)強(qiáng)度；防腐劑能夠防止試劑受到微生物的污染，避免變質(zhì)；蛋白類穩(wěn)定劑能夠保持抗體分子結(jié)構(gòu)和活性的穩(wěn)定；第二表面活性劑能夠提高待檢測(cè)物中抗原與抗體的反應(yīng)速率，進(jìn)而提高檢測(cè)速度；鹽類物質(zhì)能夠提供離子環(huán)境，中和抗原抗體電荷，促進(jìn)結(jié)合；糖類物質(zhì)能夠和蛋白質(zhì)分子間形成氫鍵，有利于蛋白質(zhì)構(gòu)象穩(wěn)定性。
14、在本專利技術(shù)的一個(gè)實(shí)例中，防腐劑為proclin300、nan3、慶大霉素、mit、ipbc中的至少一種；蛋白類穩(wěn)定劑為bsa、酪蛋白、魚(yú)皮明膠、豬皮明膠中的至少一種；鹽類物質(zhì)為nacl、kcl、mgcl2中的至少一種；糖類物質(zhì)為海藻糖、蔗糖、葡萄糖中的至少一種。
15、與現(xiàn)有技術(shù)相比，采用該技術(shù)方案所達(dá)到的技術(shù)效果：選用以上至少一種防腐劑能夠防止試劑受到微生物的污染，避免變質(zhì)，選用以上至少一種蛋白類穩(wěn)定劑能夠保持抗體分子結(jié)構(gòu)和活性的穩(wěn)定，選用以上至少一種鹽類物質(zhì)能夠提供離子環(huán)境，中和抗原抗體電荷，促進(jìn)結(jié)合，選用以上至少一種糖類物質(zhì)能夠和蛋白質(zhì)分子間形成氫鍵，有利于蛋白質(zhì)構(gòu)象穩(wěn)定性。
16、在本專利技術(shù)的一個(gè)實(shí)例中，第一緩沖液為100mm，ph6.0~8.0的pb緩沖液；第一表面活性劑為tween20、tween40、trotionx-100、brig35中的至少一種。
17、與現(xiàn)有技術(shù)相比，采用該技術(shù)方案所達(dá)到的技術(shù)效果：100mm，ph6.0~8.0的pb緩沖液，能夠讓試劑的ph?值相對(duì)穩(wěn)定，提高蛋白質(zhì)在液體中的穩(wěn)定性。選用以上至少一種表面活性劑能夠提高分散性能，減少蛋白之間相互干擾，提高蛋白穩(wěn)定性，提高待檢測(cè)物中抗原與抗體的反應(yīng)速率，進(jìn)而提高檢測(cè)速度。
18、在本專利技術(shù)的一個(gè)實(shí)例中，第二緩沖液為100mm，ph6.5~8.0的tris緩沖液；第二表面活性劑為peg2000、peg4000、peg6000中的至少一種。
19、與現(xiàn)有技術(shù)相比，采用該技術(shù)方案所達(dá)到的技術(shù)效果：不同的緩沖液體系及其濃度和ph對(duì)吖啶酯的發(fā)光強(qiáng)度有不同程度的影響，選用100mm，ph6.5~8.0的tris緩沖液，吖啶酯的發(fā)光信號(hào)強(qiáng)，進(jìn)而提高檢測(cè)靈敏性和準(zhǔn)確性。選用以上至少一種第二表面活性劑能夠提高待檢測(cè)物中抗原與抗體的反應(yīng)速率，進(jìn)而提高檢測(cè)速度。
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1.一種sFlt-1檢測(cè)試劑盒，其特征在于，包括：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的sFlt-1檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述磁微粒為氨基磁珠、羧基磁珠、鏈霉親和素磁珠中的任一種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的sFlt-1檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述包被有sFlt-1抗體的磁微粒中所述磁微粒與所述sFlt-1抗體的摩爾比為1：（5-20）。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的sFlt-1檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述吖啶酯標(biāo)記的sFlt-1抗體中所述吖啶酯與所述sFlt-1抗體的摩爾比為1：（5-20）。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的sFlt-1檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述磁微粒懸浮液包含：第一緩沖液、防腐劑、蛋白類穩(wěn)定劑、第一表面活性劑、鹽類物質(zhì)、糖類物質(zhì)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的sFlt-1檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述sFlt-1抗體檢測(cè)試劑包含：第二緩沖液、防腐劑、蛋白類穩(wěn)定劑、第二表面活性劑、鹽類物質(zhì)、糖類物質(zhì)。
7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的sFlt-1檢測(cè)試劑盒，其特征在于，
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的sFlt-1檢
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的sFlt-1檢測(cè)試劑盒，其特征在于，
...【技術(shù)特征摘要】
1.一種sflt-1檢測(cè)試劑盒，其特征在于，包括：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的sflt-1檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述磁微粒為氨基磁珠、羧基磁珠、鏈霉親和素磁珠中的任一種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的sflt-1檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述包被有sflt-1抗體的磁微粒中所述磁微粒與所述sflt-1抗體的摩爾比為1：（5-20）。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的sflt-1檢測(cè)試劑盒，其特征在于，所述吖啶酯標(biāo)記的sflt-1抗體中所述吖啶酯與所述sflt-1抗體的摩爾比為1：（5-20）。
5.根據(jù)權(quán)利...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：鄒繼華，李笑笑，賈江花，張華杰，王芬，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：寧波美康盛德生物科技有限公司，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：
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