【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及體外診斷領域，尤其涉及一種提高牛病毒性腹瀉病毒檢測靈敏度的緩沖液、體外診斷試劑及檢測試劑盒。
技術介紹
1、牛病毒性腹瀉-粘膜病(bovine?viral?diarrhea?mucosal?disease，簡稱bvd-md)又稱牛病毒性腹瀉病，是由牛病毒性腹瀉粘膜病病毒(bovine?viral?diarrhea?virus，簡稱bvdv)引起、發生在牛身上的一種病害。病牛主要特征為發熱、粘膜糜爛潰瘍、白細胞減少、腹瀉免疫耐受與持續感染免疫抑制、先天性缺陷、咳嗽、懷孕母牛流產、產死胎或畸形胎。
2、bvdv能通過胎膜屏障進入胎兒體內，產出的胎兒為pi(持續感染)牛，終身帶毒、排毒。持續感染會導致流產、胎兒死亡、卵泡功能不全等繁殖性疾病，并且會導致奶牛產量下降，免疫抑制進而導致疾病的協同并發。檢測和清除pi(持續感染)牛是防治本病的重點與難點。
3、pi牛具有極高水平的循環病毒，導致消化道、胰腺、乳腺、腎上腺、肝臟、肺、腎臟、生殖道、中樞神經系統和皮膚含大量病毒載量。目前常常選擇牛耳組織作為獸醫體外診斷檢測牛病毒性腹瀉病毒的樣本，然而，當檢測緩沖液裂解釋放牛耳組織樣本中bvdv的能力較弱時，容易造成假陰現象。
4、因此，亟需一種合適的緩沖液來解決上述問題。
技術實現思路
1、本專利技術的第一個目的在于針對現有技術的不足，提供一種可以有效提高牛病毒性腹瀉病毒耳組織檢測靈敏度的緩沖液。
2、一種提高牛病毒性腹瀉病毒檢測靈敏度的
3、所述組分1包括6-羥基己酸、磷酸二酯酶、萘乙酸、嗎啉乙磺酸、peg、酚紅、edta和角蛋白酶，溶劑為純化水；
4、所述組分2包括對羥基苯甲酸丙酯和5-乙酰氨基水楊酸，溶劑為naoh；
5、所述組分3包括硬脂酸，溶劑為三氯甲烷；
6、所述第二緩沖液包括：氯化鈉、磷酸氫二鈉、酪蛋白酸鈉、tetronic?1370、proclin300、硫酸卡那霉素。
7、作為優選，在本專利技術的一些實例中，以所述一種提高牛病毒性腹瀉病毒檢測靈敏度的緩沖液總體積l為基準，所述第一緩沖液中組分1含量如下：
8、6-羥基己酸：3-10g/l
9、磷酸二酯酶：3-10g/l
10、萘乙酸：2-10g/l
11、嗎啉乙磺酸：3-10g/l
12、peg：3-10g/l
13、酚紅：1/20-1/10
14、edta：2-10g/l
15、角蛋白酶：0.1-1g/l
16、所述第一緩沖液中組分2含量如下：
17、對羥基苯甲酸丙酯：1-10g/l
18、5-乙酰氨基水楊酸：3-10g/l
19、所述組分2的溶劑naoh的濃度為6-8mol/l，更優選為6mol/l。
20、所述第一緩沖液中組分3含量如下：
21、硬脂酸：0.5-5g/l
22、所述第二緩沖液含量如下：
23、氯化鈉：5-10g/l
24、磷酸氫二鈉：5-10g/l
25、酪蛋白酸鈉：1-10g/l
26、tetronic?1370：3-10g/l
27、proclin?300：0.1-5ml/l
28、硫酸卡那霉素：0.1-1g/l
29、作為優選，組分1、組分2、組分3的體積比為10:(1-5):(1-5)。
30、作為優選，第一緩沖液與第二緩沖液的體積比為1:(1-50)。
31、本專利技術的第二個目的是提供一種體外診斷試劑，所述體外診斷試劑包括如上所述的一種提高牛病毒性腹瀉病毒檢測靈敏度的緩沖液。
32、本專利技術的第三個目的是提供一種檢測試劑盒，所述檢測試劑盒包括如上所述的體外診斷試劑。
33、本專利技術還提供制備所述的一種可以有效提高牛病毒性腹瀉病毒耳組織檢測靈敏度的緩沖液的方法，包括如下步驟：
34、步驟1：將第一緩沖液中組分1、組分2、組分3按照體積比例10:(1-5):(1-5)溶解混勻，得到初始緩沖體系；
35、步驟2：將上述初始緩沖體系與第二緩沖液按照體積比例1:(1-50)充分混勻后得到所述緩沖液。
36、本專利技術達到的技術效果為：
37、本專利技術提供的可以有效提高牛病毒性腹瀉病毒檢測靈敏度的緩沖液，含有兩種具有高度催化效率的水解酶，將兩種水解酶搭配使用，可以提升緩沖液裂解釋放病毒的能力，優于單一種類水解酶釋放病毒的效果；第一、第二緩沖液混合配制，可以穩定緩沖液體系的ph值，避免影響緩沖體系的抗干擾能力；第一緩沖液各組分的混合配制，可以有效提高組分中各物質的溶解率，還有能穩定各組分蛋白的作用。本專利技術可以應用在檢測牛病毒性腹瀉病毒診斷試劑中，提高產品檢測的準確度。
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1.一種提高牛病毒性腹瀉病毒檢測靈敏度的緩沖液，包括第一緩沖液及第二緩沖液；其特征在于，所述第一緩沖液包括組分1、組分2和組分3；
2.根據權利要求1所述的一種提高牛病毒性腹瀉病毒檢測靈敏度的緩沖液，其特征在于，所述第一緩沖液中組分1各成分濃度如下：
3.根據權利要求1所述的一種提高牛病毒性腹瀉病毒檢測靈敏度的緩沖液，其特征在于，所述第一緩沖液中組分2各成分濃度如下：
4.根據權利要求1所述的一種提高牛病毒性腹瀉病毒檢測靈敏度的緩沖液，其特征在于，所述組分2的溶劑NaOH的濃度為6-8mol/L。
5.根據權利要求1所述的一種提高牛病毒性腹瀉病毒檢測靈敏度的緩沖液，其特征在于，所述第一緩沖液中組分3各成分濃度如下：
6.根據權利要求1所述的一種提高牛病毒性腹瀉病毒檢測靈敏度的緩沖液，其特征在于，所述第二緩沖液各成分濃度如下：
7.根據權利要求1所述的一種提高牛病毒性腹瀉病毒檢測靈敏度的緩沖液，其特征在于，組分1、組分2、組分3的體積比為10:(1-5):(1-5)。
8.根據權利要求1所述的一種提
9.一種體外診斷試劑，其特征在于，所述體外診斷試劑包括如權利要求1-8任一項所述的一種提高牛病毒性腹瀉病毒檢測靈敏度的緩沖液。
10.一種檢測試劑盒，所述檢測試劑盒包括如權利要求9所述的體外診斷試劑。
...【技術特征摘要】
1.一種提高牛病毒性腹瀉病毒檢測靈敏度的緩沖液，包括第一緩沖液及第二緩沖液；其特征在于，所述第一緩沖液包括組分1、組分2和組分3；
2.根據權利要求1所述的一種提高牛病毒性腹瀉病毒檢測靈敏度的緩沖液，其特征在于，所述第一緩沖液中組分1各成分濃度如下：
3.根據權利要求1所述的一種提高牛病毒性腹瀉病毒檢測靈敏度的緩沖液，其特征在于，所述第一緩沖液中組分2各成分濃度如下：
4.根據權利要求1所述的一種提高牛病毒性腹瀉病毒檢測靈敏度的緩沖液，其特征在于，所述組分2的溶劑naoh的濃度為6-8mol/l。
5.根據權利要求1所述的一種提高牛病毒性腹瀉病毒檢測靈敏度的緩沖液，其特征在于，所述第一緩沖液中組分3各成分...
【專利技術屬性】
技術研發人員：馬珊，孫曉笛，張秋雪，陳璐，陳金樹，陸維克，
申請(專利權)人：杭州奧泰生物技術股份有限公司，
類型：發明
國別省市：
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