【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及具有黃原膠降解活性，特別是黃原膠裂解酶活性的多肽并且涉及對用黃原膠裂解酶預處理的黃原膠具有活性的gh9內切葡聚糖酶，催化結構域，以及編碼這些多肽和催化結構域的多核苷酸。本專利技術還涉及包括這些多核苷酸的核酸構建體、載體以及宿主細胞連同生產和使用這些多肽和催化結構域的方法。本專利技術進一步涉及包括用于在洗滌劑以及用于在鉆探和石油工業中使用的gh9內切葡聚糖酶和/或黃原膠裂解酶的組合物。
技術介紹
1、黃原膠是一種來源于野油菜黃單胞菌的細菌包被的多糖。黃原膠通過由野油菜黃單胞菌細菌發酵葡萄糖、蔗糖或乳糖而產生。在一個發酵周期后，用異丙醇將該多糖從生長培養基中沉淀，干燥，并磨成細粉。稍后，將其添加至液體介質中，以形成膠質。
2、黃原膠是一種由不同糖組成的天然多糖，這些不同糖通過若干不同鍵連接，例如β-d-甘露糖基-β-d-1,4-葡萄糖醛酸基鍵和β-d-葡糖基-β-d-1,4-葡糖基鍵。黃原膠在水中至少部分地可溶并且形成高粘稠溶液或凝膠。
3、黃原膠的完全酶降解需要若干酶活性，包括黃原膠裂解酶活性和內切-β-1,4-葡聚糖酶活性。黃原膠裂解酶是切割黃原膠的β-d-甘露糖基-β-d-1,4-葡萄糖醛酸基鍵的酶并且已經被描述于文獻中。黃原膠降解酶在本領域中是已知的，例如具有兩種分離自溶藻弧菌類芽孢桿菌xl-1的黃原膠裂解酶(例如，ruijssenaars(魯基森納斯)等人.(1999)‘apyruvated?mannose-specific?xanthan?lyase?involved?in?xant
4、糖苷水解酶是催化糖基鍵水解以釋放更小的糖的酶。存在超過100種已經被分類的糖苷水解酶，參見henrissat(漢麗塞塔)等人(1991)‘aclassification?of?glycosylhydrolases?based?on?amino-acid?sequence?similarities(基于氨基酸序列相似性的糖基水解酶分類)’，j.biochem.(生物化學雜志)280:309-316和uniprot網站，www.cazy.org。糖苷水解酶家族9(gh9)由超過70種不同的酶組成，這些酶大部分是內切-葡聚糖酶(ec3.2.1.4)、纖維二糖水解酶(ec?3.2.1.91)、β-葡糖苷酶(ec?3.2.1.21)和外切-β-葡糖胺酶(ec?3.2.1.165)。已經由t.morohoshi(莫拉浩施)等人，(2011)j.bacteriol.(細菌學雜志)193(8),2072-2073公開了一種來自磚紅色微桿菌(microbacterium?testaceum)stlb037的gh9，該gh9與seq?id?no:12具有84.5％序列一致性、與seq?id?no:10具有79.1％序列一致性并且與seq?id?no:14具有74.0％序列一致性。
5、近年來，黃原膠已經被用作許多消費品中的成分，包括食品(例如在沙拉醬(salatdressing)和乳制品中作為增稠劑)和化妝品(例如在牙膏和化妝品中作為穩定劑和增稠劑，以阻止成分分離)和化妝品(例如防曬霜)。另外，已經發現了黃原膠在石油工業中的用途，連同作為添加劑以調節鉆井液的粘度的用途等。黃原膠的廣泛使用已經使得希望降解黃原膠的溶液或凝膠從而允許更簡單地去除副產品。已經提議向洗滌劑組合物中添加黃原膠裂解酶以便除去包含黃原膠的污物，例如在ep?0896998a中，但是這一公開物不包含展示其任何效果的任何實驗數據。
6、本專利技術提供了用于降解黃原膠的新的且改進的酶以及此類酶用于清潔目的(例如除去黃原膠污物)以及在鉆探和石油工業中的用途。
技術實現思路
1、在一個方面中，本專利技術涉及一種對用黃原膠裂解酶預處理的黃原膠具有活性的分離的gh9內切葡聚糖酶，該分離的gh9內切葡聚糖酶選自下組，該組由以下各項組成：
2、(a)一種多肽，該多肽與seq?id?no:2的成熟多肽具有至少80％，例如至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％序列一致性；
3、(b)一種多肽，該多肽與seq?id?no:10的成熟多肽具有至少80％，例如至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％序列一致性；
4、(c)一種多肽，該多肽與seq?id?no:12的成熟多肽具有至少80％，例如至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％序列一致性；
5、(d)一種多肽，該多肽與seq?id?no:14的成熟多肽具有至少80％，例如至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％序列一致性；
6、(e)一種多肽，該多肽與seq?id?no:48的成熟多肽具有至少80％，例如至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％、或100％序列一致性；
7、(f)一種多肽，該多肽與seq?id?no:52的成熟多肽具有至少80％，例如至少81％、至少82％、至少83％、至少84％、至少85％、至少86％、至少87％、至少88％、至少89％、至少90％、至少91％、至少92％、至少9本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種組合物，該組合物包括一種對用黃原膠裂解酶預處理的黃原膠具有活性的分離的GH9內切葡聚糖酶，該分離的GH9內切葡聚糖酶選自下組，該組由以下各項組成：
2.如權利要求1所述的組合物，該組合物進一步包括一種具有黃原膠裂解酶的分離的多肽。
3.如權利要求2所述的組合物，其中具有黃原膠裂解酶活性的該多肽選自下組，該組由以下各項組成：
4.根據權利要求1-3中任一項的組合物，其還包含一種或多種選自下組的另外的酶：蛋白酶、脂肪酶、角質酶、淀粉酶、碳水化合物酶、纖維素酶、果膠酶、甘露聚糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、木聚糖酶、氧化酶、漆酶、和/或過氧化物酶。
5.根據權利要求1-4中任一項所述的組合物用于降解黃原膠的用途。
6.一種用于降解黃原膠的方法，該方法包括向黃原膠應用根據權利要求1-4中任一項的組合物。
7.一種對用黃原膠裂解酶預處理的黃原膠具有活性的分離的GH9內切葡聚糖酶，該分離的GH9內切葡聚糖酶選自下組，該組由以下各項組成：
8.一種具有黃原膠裂解酶活性的分離的多肽，該多肽選自下組，該組由以
9.一種分離的多核苷酸，該多核苷酸編碼權利要求7-8中任一項所述的多肽。
10.一種核酸構建體或表達載體，包括可操作地連接至一個或多個控制序列的權利要求9所述的多核苷酸，該一個或多個控制序列指導該多肽在一個表達宿主中的產生。
11.一種重組宿主細胞，該重組宿主細胞包括權利要求10所述的多核苷酸，該多核苷酸可操作地連接至指導該多肽的產生的一個或多個控制序列。
...【技術特征摘要】
1.一種組合物，該組合物包括一種對用黃原膠裂解酶預處理的黃原膠具有活性的分離的gh9內切葡聚糖酶，該分離的gh9內切葡聚糖酶選自下組，該組由以下各項組成：
2.如權利要求1所述的組合物，該組合物進一步包括一種具有黃原膠裂解酶的分離的多肽。
3.如權利要求2所述的組合物，其中具有黃原膠裂解酶活性的該多肽選自下組，該組由以下各項組成：
4.根據權利要求1-3中任一項的組合物，其還包含一種或多種選自下組的另外的酶：蛋白酶、脂肪酶、角質酶、淀粉酶、碳水化合物酶、纖維素酶、果膠酶、甘露聚糖酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、木聚糖酶、氧化酶、漆酶、和/或過氧化物酶。
5.根據權利要求1-4中任一項所述的組合物用于降解黃原膠的用途。
6.一種用于降解黃原...
【專利技術屬性】
技術研發人員：D·R·塞居拉，P·F·哈林，A·維克索尼爾森，L·安德森，M·S·博徹特，L·墨菲，A·博伊森，L·G·帕爾曼，K·詹森，C·斯喬霍爾姆，T·霍夫，C·布盧姆，
申請(專利權)人：諾維信公司，
類型：發明
國別省市：
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