【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及疫苗免疫增強劑，尤其涉及牛用疫苗重組免疫增強劑及其制備方法和應用，屬于疫苗免疫增強劑及其應用領域。
技術介紹
1、隨著人們對牛肉的需求不斷增加，肉牛養殖逐漸成為養殖戶青睞的項目。
2、牛巴氏桿菌病(pasteurella?infection?in?cattle)又稱牛出血性敗血癥，是由巴氏桿菌(pasteurella?multocida)引起、發生在牛身上的一種常見病害。病牛體溫會明顯上升，甚至會超過40℃，食欲不振、反芻能力也有所下降，并伴有呼吸困難、伸頸張嘴呼吸的情況，精神萎靡不振；為避免未發病牛受到牛巴氏桿菌病感染，養殖者應對牛群進行緊急免疫接種牛多殺性巴氏桿菌滅活疫苗。
3、目前預防牛多殺性巴氏桿菌病主要采用滅活苗制備工藝。滅活苗以安全作為最大的優點，但是同時也存在諸如滅活苗刺激機體細胞免疫能力較差、刺激機體產生抗體慢、抗體滴度維持時間短、注射增加動物應激風險等風險。
4、因此，肉牛養殖過程中采用疫苗免疫會帶來應激反應和疫苗免疫后的不良反應等問題，有待改進，
技術實現思路
1、本專利技術的目的之一是提供密碼子優化的牛源干擾素1基因；
2、本專利技術的目的之二是將密碼子優化后的表達的牛源干擾素1基因重組牛源干擾素作為免疫增強劑加入滅活疫苗中以降低疫苗免疫后的不良反應并提高牛的生產性能。
3、本專利技術的上述目的是通過以下技術方案來實現的：
4、本專利技術的一方面是提供了密碼子優化的牛源干擾素
5、本專利技術的另一方面是提供了含有seq?id?no.2-seq?id?no.5中所示的任何一種核苷酸序列或含有該核苷酸序列的嵌合基因或表達盒的重組表達載體。
6、本專利技術的一種優選的具體實施方案，所述的重組表達載體可以是重組原核表達載體或重組真核表達載體，優選為重組原核表達載體。
7、本專利技術的另一方面是提供了含有所述重組表達載體的重組宿主細胞；所述的重組宿主細胞可以重組原核細胞或重組真核細胞；作為本專利技術的一種優選的具體實施方案，所述的重組宿主細胞是重組大腸桿菌細胞。
8、本專利技術的另一方面是將所述的密碼子優化的牛源干擾素1基因所表達的重組ifn-γ應用于疫苗免疫增強劑；本專利技術將密碼子優化后的表達的牛源干擾素1基因重組牛源干擾素作為免疫增強劑加入牛多殺性巴氏桿菌病滅活疫苗中取得了提高牛群機體免疫調節，降低疫苗免疫后的不良反應并提高牛的生產性能等效果。
9、本專利技術的一種優選的具體實施方案，所述的疫苗優選為牛多殺性巴氏桿菌病滅活疫苗。
10、本專利技術的一種具體實施方案，本專利技術提供了一種疫苗組合物，包括：滅活疫苗和免疫增強劑，其中，所述的免疫增強劑是將所述的密碼子優化的牛源干擾素1基因所表達的重組ifn-γ。
11、本專利技術利用大腸桿菌密碼子偏嗜性對ifn-γ的原始序列進行5種密碼子優化方案，將不同密碼子優化后的重組牛源干擾素作為免疫增強劑加入牛多殺性巴氏桿菌病滅活疫苗中，經過免疫效力試驗、安全性試驗以及抗體檢測試驗等發現，將ifn-γ的原始序列進行密碼子優化后得到的各種優化序列作為疫苗的免疫增強劑均具有良好的安全性；將ifn-γ的原始序列進行密碼子優化后得到的優化序列2(seq?id?no.3所示)的免疫保護效力明顯優于原始序列以及其它三種密碼子優化后序列的免疫保護效力；相比ifn-γ的原始序列，將ifn-γ的原始序列進行密碼子優化后得到的各種優化序列作為疫苗的免疫增強劑均能在一定程度上提升疫苗的抗體效價，其中，將ifn-γ的原始序列進行密碼子優化后得到的優化序列2(seq?id?no.3所示)作為疫苗的免疫增強劑的抗體效價明顯優于原始序列以及其它三種密碼子優化后序列的抗體效價。
12、本專利技術利用大腸桿菌密碼子偏嗜性對ifn-γ進行5種密碼子優化方案，將不同密碼子優化后的重組牛源干擾素作為免疫增強劑加入牛多殺性巴氏桿菌病滅活疫苗中，可以顯著提高牛細胞免疫應答，提高牛群機體免疫調節，從而降低疫苗免疫后的不良反應并提高牛的生產性能。
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1.密碼子優化的牛源干擾素1基因，其特征在于，其核苷酸序列選自SEQ?ID?No.2-SEQID?No.5中所示的任何一種。
2.根據權利要求1所述的密碼子優化的牛源干擾素1基因，其特征在于，其核苷酸序列為SEQ?ID?No.3所示。
3.含有權利要求1所述的密碼子優化的牛源干擾素1基因的嵌合基因。
4.含有權利要求1所述的密碼子優化的牛源干擾素1基因的表達盒。
5.含有權利要求1所述的密碼子優化的牛源干擾素1基因的重組表達載體。
6.含有權利要求3所述的嵌合基因或權利要求4所述表達盒的重組表達載體。
7.根據權利要求5或6所述的重組表達載體，其特征在于，所述重組表達載體是重組原核表達載體或重組真核表達載體，優選為重組原核表達載體。
8.含有權利要求5或6所述的重組表達載體的重組宿主細胞；優選的，所述的重組宿主細胞是重組原核細胞或重組真核細胞；更優選為重組大腸桿菌細胞。
9.由權利要求1所述的密碼子優化的牛源干擾素1基因表達的重組IFN-γ應作為疫苗免疫增強劑中的應用；優選的，所述的疫
10.一種疫苗組合物，包括：滅活疫苗和免疫增強劑；其特征在于，所述的免疫增強劑是將權利要求1所述的密碼子優化的牛源干擾素1基因表達得到的重組IFN-γ。
...【技術特征摘要】
1.密碼子優化的牛源干擾素1基因，其特征在于，其核苷酸序列選自seq?id?no.2-seqid?no.5中所示的任何一種。
2.根據權利要求1所述的密碼子優化的牛源干擾素1基因，其特征在于，其核苷酸序列為seq?id?no.3所示。
3.含有權利要求1所述的密碼子優化的牛源干擾素1基因的嵌合基因。
4.含有權利要求1所述的密碼子優化的牛源干擾素1基因的表達盒。
5.含有權利要求1所述的密碼子優化的牛源干擾素1基因的重組表達載體。
6.含有權利要求3所述的嵌合基因或權利要求4所述表達盒的重組表達載體。
7.根據權利要求5...
【專利技術屬性】
技術研發人員：武嘯，梁宛楠，李倩，魏藍，張悅，徐剛，李贄，李一凡，柴華，翁艷軍，
申請(專利權)人：哈藥集團生物疫苗有限公司，
類型：發明
國別省市：
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