【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于食品添加劑，具體涉及一種天然復配防腐劑及其應用。
技術介紹
1、在醬油生產加工過程中，常用的幾類食品添加劑有：著色劑、防腐劑和抗氧化劑。其中防腐劑是比較關鍵的一類，天然曬制發酵醬油原油中有細菌、霉菌、酵母菌等微生物，在室溫下放置幾天就會出現脹氣、冒泡、變酸等現象，一些耐鹽、耐高溫細菌在后期加工中也不能被除去。長時間的貯存，且每天開封使用的情況下，需要對產品進行防腐技術處理，添加防腐劑是最有效保持調味品品質的手段。為了延長其保藏期限，目前普遍使用的是化學合成防腐劑，市面上絕大多數醬油常采用添加山梨酸鉀或苯甲酸鈉作為防腐劑來保證產品質量，一般醬油的保質期在一年左右。
2、目前我國市面上的零添加調味品是醬油和食醋，主要是用天然防腐劑代替了山梨酸鉀，且不添加色素及其他化學添加劑。其中天然產物替代食品中化學防腐劑已成為研究熱點，抗菌肽是一類天然來源的具有抗菌活性的多肽類物質，熱穩定性強、水溶性好、無免疫原性，且可以被人體內的酶系統降解；但抗菌肽存在以下缺點：1)成本比較高，2)單獨使用對醬油中的腐敗菌枯草芽孢桿菌的抑菌效果較差。
3、目前人們對食品添加劑的使用要求越來越苛刻，食品行業也正處在向健康、綠色方向發展，因此現在需要一種天然高效防腐劑，同時具有抗菌性強、安全性高、作用范圍廣等特點，將其應用于零化學添加劑醬油的生產，豐富醬油產品類型，贏得消費者的青睞。
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于提供一種天然復配防腐劑，該防腐劑將復合保鮮劑與抗菌肽搭配使
2、本專利技術的目的還在于提供上述天然復配防腐劑在調味品抑菌防腐中的應用。
3、本專利技術的上述第一個目的可以通過以下技術實施例來實現：一種天然復配防腐劑，所述天然復配防腐劑包括抗菌肽和復合保鮮劑，所述抗菌肽和復合保鮮劑的質量份配比為9～5：1～5，所述復合保鮮劑包括層出鐮刀菌發酵粉末、葡萄糖氧化酶、β-淀粉酶、乳酸鏈球菌素和糊精。
4、更佳地，所述抗菌肽和復合保鮮劑的質量份配比為5：5。
5、可選地，所述抗菌肽是由市售開菲爾粒混合菌株通過常規豆粕發酵而來的抗菌肽，其分子量大小為2113.428da，含有18個氨基酸，其氨基酸序列如seq?id?no：1所示。
6、具體地，所述抗菌肽的氨基酸序列如下：
7、thr-dap-asn-thr-pea-his-pro-asn-thr-his-leu-ile-pea-cysh-val-asn-pea-tau。
8、本專利技術中采用的抗菌肽可通過破壞細菌表面結構，影響相關酶指標，破壞細胞膜完整性，導致細菌內容物流失，引起細胞膜功能紊亂，從而影響細菌的正常生理活動，達到抑制細菌生長的效果。
9、可選地，所述復合保鮮劑通過以下方法制備獲得：
10、(1)將層出鐮刀菌的懸液加入至pda培養基中，28±1℃、140～160rpm/min條件下進行培養，培養55～65h；
11、(2)將菌株活化培養后，將活化后菌株在pdb培養液中進行種子液培養，于28±1℃、140～160rpm/min條件下培養一周；
12、(3)將步驟(2)發酵培養液低溫離心處理，收集上清液，將上清液在40～45℃下進行真空濃縮，得到發酵濃縮液；
13、(4)將步驟(3)所得發酵濃縮液上固相柱，用去離子水淋洗，再用乙醇淋洗，收集洗脫液，將洗脫液在40～45℃下進行真空濃縮干燥，得到層出鐮刀菌發酵粉末；
14、(5)將葡萄糖氧化酶、β-淀粉酶、乳酸鏈球菌素和糊精混合，再加入步驟(4)所得層出鐮刀菌發酵粉末混合均勻，得到復合保鮮劑。
15、在上述復合保鮮劑的制備方法中：
16、可選地，步驟(1)中所述的層出鐮刀菌來源于西北農林科技大學動物醫學院，保藏號為bio-62449。
17、可選地，步驟(2)中種子液的接種量為占pdb培養液總體積的1.0～2.0％。
18、可選地，步驟(3)中低溫離心處理時，在4℃、9000rpm/min條件下離心14～16min。
19、可選地，步驟(4)中所述固相柱為c18固相萃取柱，所述固相柱在使用前需進行平衡處理，平衡處理包括采用體積百分含量為35～45％的乙醇水溶液進行平衡處理。
20、可選地，步驟(5)中所述復合保鮮劑中各成分的質量份配比為：層出鐮刀菌發酵粉末18～22、葡萄糖氧化酶18～22、β-淀粉酶22～26、乳酸鏈球菌素4～6、糊精28～32。
21、更佳地，步驟(5)中所述復合保鮮劑中各成分的質量份配比為：層出鐮刀菌發酵粉末20、葡萄糖氧化酶20、β-淀粉酶25、乳酸鏈球菌素5、糊精30。
22、按照質量份配比，將葡萄糖氧化酶、β-淀粉酶、乳酸鏈球菌素和糊精混合，再加入層出鐮刀菌發酵液粉末混合均勻，即得復合保鮮劑。
23、在本專利技術復合保鮮劑的各原料中：
24、采用本專利技術方法制備的層出鐮刀菌發酵粉末對常見病原菌具有顯著抑制活性作用。
25、葡萄糖氧化酶在分子氧存在下能氧化葡萄糖生成d-葡萄糖酸內酯，同時消耗氧生成過氧化氫，催化反應生成的過氧化氫，直接殺滅并抑制大腸桿菌、沙門氏菌、葡萄球菌的增殖速度。
26、β-淀粉酶可以作用于淀粉，能有效延緩淀粉的老化從而提升食品口感。
27、乳酸鏈球菌素可以改變細胞膜通透性，引起膜電位下降，主要作用于細菌細胞膜，抑制細菌生長。且在ph＝7.3條件下易水解成氨基酸，無殘留，不產生抗藥性，安全性高。
28、因此，本專利技術中的復合保鮮劑是一種由層出鐮刀菌發酵粉末與葡萄糖氧化酶、β-淀粉酶、乳酸鏈球菌素、糊精等組成的天然安全的抑菌物質，在食品保鮮防腐領域具有廣闊的前景；同時，將其與抑菌譜互補的天然產物抗菌肽進行復配，以達到更好抑菌效果也是實現醬油零添加化的新趨勢。
29、本專利技術的上述第二個目的可以通過以下技術實施例來實現：上述的天然復配防腐劑在調味品抑菌防腐中的應用。
30、可選地，所述調味品為醬油。
31、可選地，所述天然復配防腐劑的添加量為占醬油總質量的0.06～0.08％。
32、更佳地，所述天然復配防腐劑的添加量為占醬油總質量的0.07％。
33、可選地，所述抑菌包括抑制大腸桿菌、枯草芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌。
34、可選地，所述枯草芽孢桿菌是從腐敗原油中經常規方法分離純化鑒定得到，其余大腸桿菌和金黃色葡萄球菌來源于暨南大學理工學院食品科學與工程系微生物重點實驗室。
35、本專利技術通過對上述天然復配防腐劑進行復配比例探究和抑菌活性評價，結果表明：復合保鮮劑和抗菌肽對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌均有抑制作用，其中復合保鮮劑對枯草芽孢桿菌的最小抑菌濃度僅為625μg/ml。將二者進行復配，探究出抗菌肽、復合保鮮劑質量份配比為5本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種天然復配防腐劑，其特征在于：所述天然復配防腐劑包括抗菌肽和復合保鮮劑，所述抗菌肽和復合保鮮劑的質量份配比為9～5：1～5，所述復合保鮮劑包括層出鐮刀菌發酵粉末、葡萄糖氧化酶、β-淀粉酶、乳酸鏈球菌素和糊精。
2.根據權利要求1所述的天然復配防腐劑，其特征在于：所述抗菌肽和復合保鮮劑的質量份配比為5：5。
3.根據權利要求1所述的天然復配防腐劑，其特征在于：所述抗菌肽是由市售開菲爾粒混合菌株通過常規豆粕發酵而來的抗菌肽，其分子量大小為2113.428Da，含有18個氨基酸，其氨基酸序列如SEQ?ID?NO：1所示。
4.根據權利要求1所述的天然復配防腐劑，其特征在于所述復合保鮮劑通過以下方法制備獲得：
5.根據權利要求4所述的用于醬油的天然復配防腐劑，其特征在于：步驟(1)中所述的層出鐮刀菌來源于西北農林科技大學動物醫學院，保藏號為Bio-62449。
6.根據權利要求4所述的天然復配防腐劑，其特征在于：步驟(2)中種子液的接種量為占PDB培養液總體積的1.0～2.0％。
7.根據權利要求4所述的天然復
8.根據權利要求4所述的天然復配防腐劑，其特征在于：步驟(5)中所述復合保鮮劑中各成分的質量份配比為：層出鐮刀菌發酵粉末18～22、葡萄糖氧化酶18～22、β-淀粉酶22～26、乳酸鏈球菌素4～6、糊精28～32。
9.權利要求1-8任一項所述的天然復配防腐劑在調味品抑菌防腐中的應用。
10.根據權利要求9所述的應用，其特征在于：所述的調味品為醬油，所述天然復配防腐劑的添加量為占醬油總質量的0.06～0.08％。
...【技術特征摘要】
1.一種天然復配防腐劑，其特征在于：所述天然復配防腐劑包括抗菌肽和復合保鮮劑，所述抗菌肽和復合保鮮劑的質量份配比為9～5：1～5，所述復合保鮮劑包括層出鐮刀菌發酵粉末、葡萄糖氧化酶、β-淀粉酶、乳酸鏈球菌素和糊精。
2.根據權利要求1所述的天然復配防腐劑，其特征在于：所述抗菌肽和復合保鮮劑的質量份配比為5：5。
3.根據權利要求1所述的天然復配防腐劑，其特征在于：所述抗菌肽是由市售開菲爾粒混合菌株通過常規豆粕發酵而來的抗菌肽，其分子量大小為2113.428da，含有18個氨基酸，其氨基酸序列如seq?id?no：1所示。
4.根據權利要求1所述的天然復配防腐劑，其特征在于所述復合保鮮劑通過以下方法制備獲得：
5.根據權利要求4所述的用于醬油的天然復配防腐劑，其特征在于：步驟(1)中所述的層出鐮刀菌來源于西北農林科技大學動物醫學院，保藏號為bio-62449。
6.根據權利要求4所...
【專利技術屬性】
技術研發人員：張靈芬，朱苓，扈圓舒，胡鋒，周萌萌，徐婷，林虹，符姜燕，晏日安，陳永生，胡徽祥，游星，
申請(專利權)人：廣東廚邦食品有限公司，
類型：發明
國別省市：
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