【技術實現步驟摘要】
本公開涉及編碼重組補體因子h多肽的核酸分子及其用途，具體地，所述重組補體因子h多肽具有補體調節活性尤其是補體旁路途徑調節活性。本公開還涉及編碼重組補體因子h多肽的核酸分子、載體、重組腺相關病毒載體、重組腺相關病毒顆粒、宿主細胞、包含核酸分子、載體、重組腺相關病毒載體或重組腺相關病毒顆粒的藥物組合物，以及醫藥用途、治療方法，重組腺相關病毒顆粒的制備方法。
技術介紹
1、補體是一種存在于人和脊椎動物血清及組織液中，可介導免疫應答和炎癥反應的一種血清蛋白質。補體系統是由一系列約40種蛋白質分子組成，有著精密調控機制的蛋白質反應系統。補體系統的主要作用是參與外源病原體的定靶和清除，誘導與病原體相關的和調節的酶級聯反應，一旦觸發，就會以裂解結束并保護宿主參與免疫復合物和細胞碎片的排除以及增強細胞免疫，在多種自身免疫、炎癥等疾病的病理學過程中扮演著十分重要的角色。
2、補體因子h(complement?factor?h，cfh)是一種含唾液酸的糖蛋白，在血漿中濃度很高(500μg/ml),在旁路途徑中起著非常重要的作用。成熟的cfh有1213個氨基酸組成，約155kda，參與了微生物防御、免疫復合物處理和細胞程序性死亡。cfh參與c3轉移酶、c3b的裂解或取代b因子結合c3b，使c3b受到抑制，從而阻斷替代途徑，同時還作為ⅰ因子的輔助因子促進ⅰ因子降解c3b。cfh是一個由20個短同源重復序列(short?consensus?repeats，scr)構成的類似串珠狀的結構,這些scr按從n端到c端的順序分別命名為scr1至scr
3、許多疾病的發生與補體功能異常，特別是補體的過度激活有關。其中，年齡相關性黃斑變性(age-related?macular?degeneration，amd)又稱為老年性黃斑變性。amd是視網膜最重要的中心區域黃斑區發生緊張性病變，導致中心視力的下降甚至喪失。amd臨床表現分為干性(非滲出性或萎縮性)和濕性(新生血管性或滲出性):干性amd以脈絡膜下玻璃膜疣沉積和地圖狀萎縮形成為主要特點，而濕性amd則以脈絡膜新生血管為突出特征。所有的amd都是從干性開始的。有些人(約10％)繼續發展為濕性amd，大約85％的amd患者只有干性amd。更多的研究表明，cfh基因的突變與干性amd密切相關，例如發生在第402號氨基酸上，即y402h，這個突變不僅與amd相關，也與早期黃斑病變有關。研究表明與濕性amd相比，cfhy402h多態性與干性amd有更強的相關性。cfh蛋白上402位酪氨酸變為組氨酸(y402h)會導致帶正電荷組氨酸取代疏水酪氨酸，從而影響cfh與肝素、c-反應蛋白(c-reactiveprotein,crp)結合，降低cfh對c3b的親和力，對補體系統激活的抑制減弱，導致補體成分c3b和c5b-9(膜攻擊復合體)產生增多，c5b-9沉積于視網膜色素上皮細胞基底層，可導致黃斑區萎縮及血管內皮損傷，進而血管阻塞，進一步發展新生血管形成，amd發生。(toomeyc.,rickman?c.etc.complement?factor?h?in?amd:bridging?genetic?associations?andpathobiology.progress?in?retinal?and?eye?research)
4、綜上所述，由于cfh與補體相關的疾病的發生、發展密切相關，開發活性更強的cfh藥物，從而針對性的治療與補體相關的疾病，是目前亟需解決的重要問題。
技術實現思路
1、本公開提供了編碼重組補體因子h多肽的核酸分子、載體、重組腺相關病毒載體、重組腺相關病毒(raav)顆粒、宿主細胞、藥物組合物，及醫藥用途、治療方法和制備方法。
2、重組補體因子h(cfh)多肽
3、在一方面，本公開提供了重組補體因子h多肽。在一些實施方案中，重組補體因子h多肽從n末端向c末端依次包括：第二結構域和第三結構域，所述第二結構域與所述第三結構域可操作地連接。
4、在一些實施方案中，本公開提供了一種重組補體因子h多肽，其從n末端向c末端依次包括第一結構域，與所述第一結構域可操作地連接的第二結構域，以及與所述第二結構域可操作地連接的第三結構域。
5、構成補體因子h(complement?factor?h，cfh)的短同源重復序列從n末端向c末端的順序，依次被命名為scr1～scr20(scr1、scr2、scr3、scr4、scr5、scr6、scr7、scr8、scr9、scr10、scr11、scr12、scr13、scr14、scr15、scr16、scr17、scr18、scr19、scr20，如圖1所示)，本公開中的第一結構域、第二結構域、第三結構域分別包括來自于scr1～scr20中的任意一個或多個scr結構域。
6、在一些實施方案中，所述第一結構域包含來自補體因子h的短同源重復序列scr1、scr?2、scr?3、scr?4中的一個或任意2個、3個、4個scr。一些具體實施方案中，所述第一結構域包含一個或多個(例如，2、3、4個)scr1、和/或一個或多個(例如，2、3、4個)scr2、和/或一個或多個(例如，2、3、4個)scr3、和/或一個或多個(例如，2、3、4個)scr4。
7、在一些具體實施方案中，所述第一結構域包括：
8、scr1、scr2、scr3和scr4中的任意1個；
9、scr1和scr2；
10、scr1和scr3；
11、scr1和scr4；
12、scr2和scr3；
13、scr2和scr4；
14、scr3和scr4；
15、scr1、scr2和scr3(即，scr(1-3))；
16、scr1、scr2和scr4；
17、scr1、scr3和scr4；
18、scr2、scr3和scr4；或
19、scr1、scr2、scr3和scr4(即，scr(1-4))。
20、在一些實施方案中，所述第二結構域包含來自補體因子h的短同源重復序列scr17、scr?18、scr?19、scr?20中的一個或任意2個、3個、4個scr。一些具體實施方案中，所述第一結構域包含一個或多個(例如，2、3、4個)scr17、和/或一個或多個(例如，2、3、4個)scr18、和/或一個或多個(例如，2、3、4個)scr19、和/或一個或多個(例如，2、3、4個)scr20。
21、在一些具體實施方案中，所述第二結構域包括：
22、scr17、scr18、scr19和scr20中的任意1個；
23、scr17和scr18；
24、scr17和scr1本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種核酸分子，其包含編碼重組補體因子H(CFH)多肽的轉基因，其中，所述重組補體因子H多肽從N末端向C末端依次包括第一結構域，與所述第一結構域可操作地連接的第二結構域，以及與所述第二結構域可操作地連接的第三結構域；
2.根據權利要求1所述的核酸分子，其中，所述重組補體因子H多肽是糖基化的、去除糖基化的或降低糖基化的；
3.根據權利要求1或2所述的核酸分子，其中，所述第一結構域通過第一連接子與所述第二結構域可操作地連接，和/或，所述第二結構域通過第二連接子與所述第三結構域可操作地連接，所述第一連接子與所述第二連接子相同或不同；
4.根據權利要求1-3任一項所述的核酸分子，所述重組補體因子H多肽從N末端向C末端具有如下式(I)所示的結構：
5.根據權利要求1-9任一項所述的核酸分子，其中，所述重組補體因子H多肽具有補體因子H活性，和/或補體調節活性；
6.一種核酸分子，其包含編碼重組補體因子H多肽的轉基因，其中，所述轉基因包含如SEQ?ID?NO:41-55任一項所示的核苷酸序列，或與SEQ?ID?NO:41-55任一項
7.根據權利要求1-6任一項所述的核酸分子，其進一步包含與所述轉基因可操作地連接的一種或多種的調控元件；
8.根據權利要求1-7任一項所述的核酸分子，其為DNA或RNA，優選為cDNA或mRNA。
9.一種載體，所述載體包含權利要求1-8中任一項所述的核酸分子；
10.一種重組腺相關病毒載體，其包含(i)所示的轉基因，以及與(i)所示的轉基因可操作地連接的(ii)、(iii)或其組合：
11.重組腺相關病毒(rAAV)顆粒，其包含權利要求1-8中任一項所述的核酸分子或如權利要求10所述的重組腺相關病毒載體，和衣殼蛋白；
12.一種重組腺相關病毒顆粒的制備方法，其包括使用如權利要求1-8任一項所述的核酸分子或如權利要求10所述的重組腺相關病毒載體制備重組腺相關病毒顆粒的步驟；
13.一種宿主細胞，其中，所述宿主細胞表達如權利要求1-8任一項所述的核酸分子，如權利要求9所述的載體，或如權利要求10所述的重組腺相關病毒載體。
14.一種藥物組合物，其中，所述藥物組合物包括如下至少一種：如權利要求1-8任一項所述的核酸分子，如權利要求9所述的載體，如權利要求10所述的重組腺相關病毒載體，或如權利要求11所述的重組腺相關病毒顆粒；
15.如權利要求1-8任一項所述的核酸分子，如權利要求9所述的載體，如權利要求10所述的重組腺相關病毒載體，或如權利要求11所述的重組腺相關病毒顆粒在如下(i)-(iii)至少一項中的用途：
...【技術特征摘要】
1.一種核酸分子，其包含編碼重組補體因子h(cfh)多肽的轉基因，其中，所述重組補體因子h多肽從n末端向c末端依次包括第一結構域，與所述第一結構域可操作地連接的第二結構域，以及與所述第二結構域可操作地連接的第三結構域；
2.根據權利要求1所述的核酸分子，其中，所述重組補體因子h多肽是糖基化的、去除糖基化的或降低糖基化的；
3.根據權利要求1或2所述的核酸分子，其中，所述第一結構域通過第一連接子與所述第二結構域可操作地連接，和/或，所述第二結構域通過第二連接子與所述第三結構域可操作地連接，所述第一連接子與所述第二連接子相同或不同；
4.根據權利要求1-3任一項所述的核酸分子，所述重組補體因子h多肽從n末端向c末端具有如下式(i)所示的結構：
5.根據權利要求1-9任一項所述的核酸分子，其中，所述重組補體因子h多肽具有補體因子h活性，和/或補體調節活性；
6.一種核酸分子，其包含編碼重組補體因子h多肽的轉基因，其中，所述轉基因包含如seq?id?no:41-55任一項所示的核苷酸序列，或與seq?id?no:41-55任一項所示的核苷酸序列相比具有至少50％序列同一性的核苷酸序列；
7.根據權利要求1-6任一項所述的核酸分子，其進一步包含與所述轉基因可操作地連接的一種或多種的調控元件；
8.根據權利...
【專利技術屬性】
技術研發人員：寧威，曹其來，姜軍，耿鵬，理查德·伍茲，梁帥怡，廖成，
申請(專利權)人：上海瑞宏迪醫藥有限公司，
類型：發明
國別省市：
還沒有人留言評論。發表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。