【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及生物材料，尤其涉及一種魚源膠原蛋白肽的制備方法。
技術介紹
1、膠原蛋白是動物結締組織中的主要成分，是一種纖維狀結構的蛋白質，廣泛存在于動物的皮膚、軟骨、跟腱等組織中。膠原蛋白是由三條α肽鏈構成的三股螺旋結構，分子量約300kda。膠原蛋白中含有大量的氨基酸，其中羥脯氨酸是其特征性氨基酸。膠原蛋白種類較多，常見類型為ⅰ型、ⅱ型、ⅲ型、ⅴ型和?型。ⅰ型膠原蛋白是動物中最豐富和最重要的一類膠原蛋白。魚皮、魚鱗、魚骨等魚體組織也同樣含有豐富的ⅰ型膠原蛋白，從魚類下腳料中提取膠原蛋白實現了廢棄物再利用，可以減少環境污染。魚源膠原蛋白與哺乳動物提取的膠原蛋白相比，減少了人畜共患病的風險，且更易吸收，有更好的生物相容性、可降解性以及生物活性。
2、膠原蛋白在化妝品行業、醫藥行業及食品行業都有一定的應用。膠原蛋白刺激真皮成纖維細胞生成新的膠原和組織，具有修復和再生的作用，可以作為原料添加到化妝品中，也可以制備成敷料促進修復皮膚創傷。膠原蛋白在引導骨組織再生過程中也發揮著積極作用，可在骨缺損部位形成生物屏障膜，為再生組織細胞的增殖創造良好條件。此外，膠原蛋白還可以作為功能物質和營養成分添加到食品中，增強和維持肌膚良好的彈性。
3、為保證膠原蛋白在化妝品中良好的功效，必須使其在皮膚的真皮層起到作用。影響膠原蛋白功效表達的因素主要為分子量大小，大分子的膠原不易被皮膚吸收。降低膠原蛋白分子量的方法主要有水解法、酸降解、堿降解和酶降解。公開號為cn104278069a的專利公開了一種在37℃下酶解獲得蛋白的方法，該
技術實現思路
1、本專利技術提供一種魚源膠原蛋白肽的制備方法，本專利技術的制備方法所使用的低溫酸醇提取法避免了水解法、酶法、堿法改變膠原蛋白結構從而導致生物活性降低的問題，并有效保證了蛋白的提取率，降低了產品的微生物含量。
2、根據本專利技術的第一方面，本專利技術提供一種魚源膠原蛋白肽的制備方法，包括如下步驟：
3、步驟(1)：將魚體組織加入至第一復合溶液中，于2～15℃下進行膠原蛋白提取，過濾得到膠原蛋白粗提取液；其中，所述第一復合溶液包含第一酸類化合物、第一醇類化合物和胃蛋白酶；
4、步驟(2)：將步驟(1)得到的膠原蛋白粗提取液進一步純化，得到精制膠原；
5、步驟(3)：將得到的所述精制膠原加入到第二復合溶液中在2～15℃下進行反應，反應過程中進行高壓均質；其中，所述第二復合溶液包括第二酸類化合物和第二醇類化合物。
6、上述方案中，本專利技術一種魚源膠原蛋白肽的制備方法先采用包含第一酸類化合物、第一醇類化合物和胃蛋白酶的第一復合溶液對魚體組織進行膠原蛋白酶解和初步提取，第一酸類化合物有助于膠原蛋白從魚體組織中溶出，胃蛋白酶能去掉膠原蛋白的末端肽，提高膠原蛋白溶出率，第一醇類化合物的加入能夠保證膠原蛋白的生物活性，并能有效降低微生物含量。本專利技術的制備方法在膠原蛋白提取后對膠原蛋白粗提取液進一步純化，能提高膠原蛋白的純度，得到純度高的精制膠原。本專利技術的制備方法在純化后將得到的精制膠原加入到包括第二酸類化合物和第二醇類化合物的第二復合溶液中在2～15℃下進行反應，進一步地對精制膠原中的膠原蛋白肽進行有效提取，提高提取效率，同時精制膠原反應過程中進行高壓均質，以得到分子量分布范圍穩定且分子量集中的魚源膠原蛋白肽。本專利技術的制備方法簡單，成本低，適用于廣泛生產和應用，采用本專利技術的制備方法能得到高生物活性、分子量分布范圍穩定、高收率和低成本的魚源膠原蛋白肽。
7、為了達到更高的提取效率，進一步地，步驟(1)中，所述第一酸類化合物包括檸檬酸、醋酸、鹽酸、碳酸、磷酸和氯酸中的一種或幾種；和/或，所述第一醇類化合物包括戊二醇、丁二醇、丙三醇和乙二醇中的一種或幾種；
8、優選地，所述第一復合溶液中，所述第一酸類化合物的濃度為0.1～1.0mol/l；和/或，所述第一復合溶液中，所述第一醇類化合物的質量百分數為1％～5％；和/或，所述第一復合溶液中，所述胃蛋白酶的質量百分數為0.01％～0.1％。通過將第一酸類化合物的濃度、第一醇類化合物的質量百分數和胃蛋白酶的質量百分數限定在合理的范圍值內，使得第一復合溶液中酸、醇和蛋白酶達到更好的協同增效作用，更好地提高提取效率。
9、為了達到更高的提取效率，進一步地，步驟(1)中，進行膠原蛋白提取的時間為12～48h。
10、為了達到更高的提取效率，進一步地，步驟(3)中，所述第二酸類化合物包括檸檬酸、醋酸、鹽酸、碳酸、磷酸和氯酸中的一種或幾種；優選地，所述第二復合溶液中，所述第二酸類化合物的濃度為0.001～0.01mol/l；
11、和/或，所述第二醇類化合物包括戊二醇、丁二醇、丙三醇和乙二醇中的一種或幾種；優選地，所述第二復合溶液中，所述第二醇類化合物的質量百分數為1％～5％。
12、進一步地，步驟(3)中，所述精制膠原與所述第二復合溶液的質量體積比為1:100～1:500。
13、上述方案中，通過將精制膠原與第二復合溶液的質量體積比限定在合理的范圍值內，能夠進一步提高膠原蛋白的提取效率。
14、進一步地，所述反應的時間為24～96h。
15、上述方案中，通過將反應的時間限定在合理的范圍值內，使得精制膠原與第二復合溶液充分反應，能夠進一步保證膠原蛋白肽的活性。
16、進一步地，所述高壓均質的壓力為5000～15000psi。
17、上述方案中，通過將高壓均質的壓力限定在合理的范圍值內，更有利于得到分子量分布范圍穩定且分子量集中的魚源膠原蛋白肽。
18、進一步地，步驟(2)中，所述純化方法包括鹽析復溶、離子層析交換、超濾、過濾或干燥中的一種或多種。
19、上述方案中，通過選定合適的純化方法，能夠提高魚源膠原蛋白肽的純度。
20、進一步地，步驟(3)還包括：反應完成后調節溶液ph值至5.5～8.5。
21、上述方案中，反應完成后調節溶液ph值至合理的范圍值有利于后續魚源膠原蛋白肽的處理和應用。
22、進一步地，所述步驟(1)在將魚體組織加入至第一復合溶液中之前，還包括對魚體組織進行前處理：先清理魚體組織表面多余魚肉、魚脂肪及肉眼可見的雜質，再將魚體組織投入到清洗溶液中進行清洗除雜，除掉水分。
23、上述方案中，在將魚體組織加入至第一復合溶液中之前，實施對魚體組織進行前處理步驟，有利于去除掉魚體組織中的雜質，有利于提高魚源膠原蛋白肽的質量。
24、優選地，清洗的時間為24～96h；和/或，所述魚體組織與所述清洗溶液的重量比為1:30～1:本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種魚源膠原蛋白肽的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，所述第一酸類化合物包括檸檬酸、醋酸、鹽酸、碳酸、磷酸和氯酸中的一種或幾種；和/或，所述第一醇類化合物包括戊二醇、丁二醇、丙三醇和乙二醇中的一種或幾種；
3.根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，進行膠原蛋白提取的時間為12～48h。
4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，所述第二酸類化合物包括檸檬酸、醋酸、鹽酸、碳酸、磷酸和氯酸中的一種或幾種；優選地，所述第二復合溶液中，所述第二酸類化合物的濃度為0.001～0.01mol/L；
5.根據權利要求1或4所述的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，所述精制膠原與所述第二復合溶液的質量體積比為1:100～1:500；
6.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，所述純化方法包括鹽析復溶、離子層析交換、超濾、過濾或干燥中的一種或多種；優選地，所述純化方法包括鹽析復溶和干燥。
7.根據權利要
8.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟(1)在將魚體組織加入至第一復合溶液中之前，還包括對魚體組織進行前處理：先清理魚體組織表面多余魚肉、魚脂肪及肉眼可見的雜質，再將魚體組織投入到清洗溶液中進行清洗除雜，除掉水分；
9.根據權利要求8所述的制備方法，其特征在于，所述清洗溶液包括鹽水溶液、堿水溶液或者單一純化水的一種或幾種；
10.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，所述魚體組織包括魚皮、魚鱗或魚骨；所述魚體組織中的魚為海水魚和淡水魚的一種；優選地，所述魚體組織中的魚選自鱈魚、鯧魚、鱸魚、羅非魚、三文魚、金線魚、鯽魚、草魚、鯰魚、鰱魚、鳙魚或帶魚中的一種或多種。
...【技術特征摘要】
1.一種魚源膠原蛋白肽的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，所述第一酸類化合物包括檸檬酸、醋酸、鹽酸、碳酸、磷酸和氯酸中的一種或幾種；和/或，所述第一醇類化合物包括戊二醇、丁二醇、丙三醇和乙二醇中的一種或幾種；
3.根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，進行膠原蛋白提取的時間為12～48h。
4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，所述第二酸類化合物包括檸檬酸、醋酸、鹽酸、碳酸、磷酸和氯酸中的一種或幾種；優選地，所述第二復合溶液中，所述第二酸類化合物的濃度為0.001～0.01mol/l；
5.根據權利要求1或4所述的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，所述精制膠原與所述第二復合溶液的質量體積比為1:100～1:500；
6.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，所述純化方...
【專利技術屬性】
技術研發人員：白露，黃兆輝，傅維擎，趙霄雨，侯哲，郭立英，
申請(專利權)人：煙臺德勝海洋生物科技有限公司，
類型：發明
國別省市：
還沒有人留言評論。發表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。