【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】
本專利技術涉及人源化抗c5a抗體及其用途。
技術介紹
1、補體系統是先天免疫的一部分，在宿主防御中發揮關鍵作用。然而，激活的補體也有可能導致顯著的組織損傷和破壞，并且已發現補體活性失調與許多罕見疾病和常見疾病，諸如陣發性夜間血紅蛋白尿(pnh)、非典型溶血性尿毒癥綜合征、類風濕性關節炎、年齡相關性黃斑變性等有關。因此，抗補體療法是治療這些人類病癥的有前景的方法。
2、補體c5是補體激活的末端通路中的關鍵蛋白，并且是用于產生強效促炎介質c5a以及細胞溶解膜攻擊復合物(mac)c5b-9的前體蛋白。
3、在一些補體介導的疾病中，c5a和mac介導的過程兩者都可能促成發病機制，而在其它疾病中，可能僅涉及c5a介導的炎癥或mac介導的細胞損傷。由于補體介質(包括c5a和mac)在宿主防御病原體感染中也發揮著重要作用，因此在治療性藥物開發中期望的是，我們開發出選擇性的抗補體藥物，即僅會阻斷補體在組織損傷中的有害作用同時保持其正常宿主防御功能完好無損的藥物。
4、溶血病pnh是由mac引起的。存在其它用于治療pnh的抗c5mab。然而，這些抗體不必要地阻斷c5a的產生，使得與僅阻斷mac的治療藥物相比，患者面臨更大的感染風險。同樣，存在可能主要由c5a依賴性炎癥(例如敗血癥)介導的補體介導的疾病，并且對于此類病況，抗c5?mab藥物雖然預期是有效的，但會不必要地阻斷mac(作為副作用)。
5、因此，本領域需要能夠抑制c5a介導的活性但不阻斷mac活性的抗人c5a?mab。本專利技術解決并滿足了
6、本文引用的所有參考文獻，包括專利申請、專利出版物和genbank登錄號均通過引用并入本文，如同每個單獨的參考文獻被具體地且單獨地指示通過引用以其整體并入一樣。
技術實現思路
1、本申請提供了人源化抗c5a抗體，包括對c5a和c5(c5a的前體，抗體也與其結合但不會將其功能性阻斷)具有ph依賴性結合的人源化抗c5a抗體。
2、在一些實施方式中，提供了一種特異性結合人c5a和c5的分離的人源化抗體，其中所述抗體包含重鏈可變結構域(vh)和輕鏈可變結構域(vl)，其中所述vh包含i48m、d54e和n56w突變，其中所述vl包含d28e和d30f突變，其中所述vh突變是在kabat編號系統下對于seq?id?no:1的突變，并且其中所述vl突變是在kabat編號系統下對于seq?id?no:2的突變。在一些實施方式中，所述抗體包含：i)重鏈cdr1(“h-cdr1”)，所述重鏈cdr1(“h-cdr1”)包含seq?id?no:3的氨基酸序列或其包含一個、兩個或三個氨基酸替換的變體；ii)重鏈cdr2(“h-cdr2”)，所述重鏈cdr2(“h-cdr2”)包含seq?id?no:4的氨基酸序列或其包含一個、兩個或三個氨基酸替換的變體；iii)重鏈cdr3(“h-cdr3”)，所述重鏈cdr3(“h-cdr3”)包含seqid?no:5的氨基酸序列或其包含一個、兩個或三個氨基酸替換的變體；iv)輕鏈cdr1(“l-cdr1”)，所述輕鏈cdr1(“l-cdr1”)包含seq?id?no:6的氨基酸序列或其包含一個、兩個或三個氨基酸替換的變體；v)輕鏈cdr2(“l-cdr2”)，所述輕鏈cdr2(“l-cdr2”)包含seq?id?no:7的氨基酸序列或其包含一個、兩個或三個氨基酸替換的變體；和vi)輕鏈cdr3(“l-cdr3”)，所述輕鏈cdr3(“l-cdr3”)包含seq?id?no:8的氨基酸序列或其包含一個、兩個或三個氨基酸替換的變體。
3、在一些實施方式中，所述抗體還包含在vh中的f29h突變和在vl中的y96h突變，其中所述vh突變是在kabat編號系統下對于seq?id?no:1的突變，并且其中所述vl突變是在kabat編號系統下對于seq?id?no:2的突變。
4、在一些實施方式中，所述抗體還包含在所述vh或vl中的替換。在一些實施方式中，所述突變選自由以下組成的組：vh的e54h、vh的n97h和vl的n92h，其中所述vh突變是在kabat編號系統下對于seq?id?no:1的突變，并且其中所述vl突變是在kabat編號系統下對于seq?id?no:2的突變。
5、在一些實施方式中，所述抗體包含：i)vh，所述vh包含seq?id?no:9的氨基酸序列或與seq?id?no:9具有至少約85％，諸如至少約90％、95％、96％、97％、98％或99％同一性中的任一個的其變體；和ii)vl，所述vl包含seq?id?no:10的氨基酸序列或與seq?id?no:10具有至少約85％，諸如至少約90％、95％、96％、97％、98％或99％同一性中的任一個的其變體。
6、在一些實施方式中，所述抗體包含：i)h-cdr1，所述h-cdr1包含seq?id?no:11的氨基酸序列；ii)h-cdr2，所述h-cdr2包含seq?id?no:12的氨基酸序列；iii)h-cdr3，所述h-cdr3包含seq?id?no:13的氨基酸序列；iv)l-cdr1，所述l-cdr1包含seq?id?no:14的氨基酸序列；v)l-cdr2，所述l-cdr2包含seq?id?no:15的氨基酸序列；和vi)l-cdr3，所述l-cdr3包含seq?id?no:16的氨基酸序列。
7、在一些實施方式中，所述抗體包含：i)vh，所述vh包含seq?id?no:17的氨基酸序列；和ii)vl，所述vl包含seq?id?no:18的氨基酸序列。
8、在一些實施方式中，所述抗體包含：i)h-cdr1，所述h-cdr1包含seq?id?no:19的氨基酸序列；ii)h-cdr2，所述h-cdr2包含seq?id?no:20的氨基酸序列；iii)h-cdr3，所述h-cdr3包含seq?id?no:21的氨基酸序列；iv)l-cdr1，所述l-cdr1包含seq?id?no:22的氨基酸序列；v)l-cdr2，所述l-cdr2包含seq?id?no:23的氨基酸序列；和vi)l-cdr3，所述l-cdr3包含seq?id?no:24的氨基酸序列。
9、在一些實施方式中，所述抗體包含：i)vh，所述vh包含seq?id?no:25的氨基酸序列；和ii)vl，所述vl包含seq?id?no:26的氨基酸序列。
10、在一些實施方式中，所述抗體包含：i)h-cdr1，所述h-cdr1包含seq?id?no:27的氨基酸序列；ii)h-cdr2，所述h-cdr2包含seq?id?no:28的氨基酸序列；iii)h-cdr3，所述h-cdr3包含seq?id?no:29的氨基酸序列；iv)l-cdr1，所述l-cdr1包含seq?id?no:30的氨基酸序列；v)l-cdr2，所述l-cdr2包含seq?id?no:31的氨基酸序列；和vi)l-cdr3，所述l-cdr3包含s本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種特異性結合人C5a和C5的分離的人源化抗體，其中所述抗體包含重鏈可變結構域(VH)和輕鏈可變結構域(VL)，其中VH包含I48M、D54E和N56W突變，其中VL包含D28E和D30F突變，其中VH突變是在Kabat編號系統下對于SEQ?ID?NO:1的突變，并且其中VL突變是在Kabat編號系統下對于SEQ?ID?NO:2的突變，并且其中所述抗體包含：
2.根據權利要求1所述的抗體，其中所述抗體還包含VH中的F29H突變和VL中的Y96H突變，其中VH突變是在Kabat編號系統下對于SEQ?ID?NO:1的突變，并且其中VL突變是在Kabat編號系統下對于SEQ?ID?NO:2的突變。
3.根據權利要求2所述的抗體，其中所述抗體還包含在所述VH或所述VL中的替換。
4.根據權利要求3所述的抗體，其中所述突變選自由以下組成的組：VH的E54H、VH的N97H和VL的N92H，其中VH突變是在Kabat編號系統下對于SEQ?ID?NO:1的突變，并且其中VL突變是在Kabat編號系統下對于SEQ?ID?NO:2的突變。
5.根
6.根據權利要求1-4中任一項所述的抗體，其中所述抗體包含：
7.根據權利要求6所述的抗體，包含：
8.根據權利要求1-4中任一項所述的抗體，其中所述抗體包含：
9.根據權利要求8所述的抗體，包含：
10.根據權利要求1-4中任一項所述的抗體，其中所述抗體包含：
11.根據權利要求10所述的抗體，包含：
12.根據權利要求1-11中任一項所述的抗體，其中所述抗體選自由以下組成的組：全長抗體、Fab、Fab’、F(ab)2、F(ab’)2和scFv。
13.根據權利要求1-12中任一項所述的抗體，其中所述抗體還包含Fc區。
14.根據權利要求13所述的抗體，其中所述Fc區包含IgG4序列。
15.根據權利要求14所述的抗體，其中所述Fc區包含SEQ?ID?NO:43的氨基酸序列或其變體。
16.根據權利要求15所述的抗體，其中所述Fc區包含選自由S228P、M428L和N434A組成的組中的一種或多種突變，其中所述突變是在EU編號系統下相對于SEQ?ID?NO:43的突變。
17.根據權利要求16所述的抗體，其中所述Fc區包含突變S228P、M428L和N434A。
18.根據權利要求17所述的抗體，其中所述Fc區包含SEQ?ID?NO:44的氨基酸序列。
19.根據權利要求1-18中任一項所述的抗體，其中所述抗體從C5解離的低pH解離因數為約40％至約70％。
20.根據權利要求1-19中任一項所述的抗體，其中所述抗體從C5解離的中性pH解離因數為約0％至約10％。
21.根據權利要求1-20中任一項所述的抗體，其中低pH解離與中性pH解離的比率為6或更高。
22.根據權利要求1-21中任一項所述的抗體，其中所述抗體抑制人C5a與C5aR之間的結合。
23.根據權利要求1-22中任一項所述的抗體，其中所述抗體在人中具有至少約25天的血清半衰期。
24.根據權利要求1-23中任一項所述的抗體，其中所述抗體在CHO細胞中制造。
25.一種編碼權利要求1-24中任一項所述的抗體的核酸，包含SEQ?IDNo:46-53中任一個的序列。
26.一種載體，包含權利要求25所述的核酸。
27.一種宿主細胞，包含權利要求26所述的載體。
28.一種用于在足以允許細胞表達抗體的條件下產生權利要求1-27中任一項所述的抗體的方法。
29.一種藥物組合物，包含權利要求1-24中任一項所述的抗體和藥學上可接受的載體。
30.一種用于治療患有補體相關疾病或病況的個體的方法，包括向所述個體施用有效量的權利要求29所述的藥物組合物。
31.根據權利要求30的方法，其中所述疾病或病癥至少選自由以下組成的組：黃斑變性(MD)、年齡相關性黃斑變性(AMD)、缺血再灌注損傷、關節炎、類風濕性關節炎、狼瘡、潰瘍性結腸炎、中風、術后全身炎癥綜合征、哮喘、過敏性哮喘、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、陣發性夜間血紅蛋白尿(PNH)綜合征、自身免疫性溶血性貧血(AIHA)、戈謝病、重癥肌無力、視神經脊髓炎(NMO)、多發性硬化癥、移植物功能延遲恢復、抗體介導的排斥反應、非典型溶血性尿毒癥綜合征(aHUS)、視網膜中央靜脈阻塞(CRVO)、視網膜中央動脈阻塞(...
【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】
1.一種特異性結合人c5a和c5的分離的人源化抗體，其中所述抗體包含重鏈可變結構域(vh)和輕鏈可變結構域(vl)，其中vh包含i48m、d54e和n56w突變，其中vl包含d28e和d30f突變，其中vh突變是在kabat編號系統下對于seq?id?no:1的突變，并且其中vl突變是在kabat編號系統下對于seq?id?no:2的突變，并且其中所述抗體包含：
2.根據權利要求1所述的抗體，其中所述抗體還包含vh中的f29h突變和vl中的y96h突變，其中vh突變是在kabat編號系統下對于seq?id?no:1的突變，并且其中vl突變是在kabat編號系統下對于seq?id?no:2的突變。
3.根據權利要求2所述的抗體，其中所述抗體還包含在所述vh或所述vl中的替換。
4.根據權利要求3所述的抗體，其中所述突變選自由以下組成的組：vh的e54h、vh的n97h和vl的n92h，其中vh突變是在kabat編號系統下對于seq?id?no:1的突變，并且其中vl突變是在kabat編號系統下對于seq?id?no:2的突變。
5.根據權利要求1所述的抗體，包含：
6.根據權利要求1-4中任一項所述的抗體，其中所述抗體包含：
7.根據權利要求6所述的抗體，包含：
8.根據權利要求1-4中任一項所述的抗體，其中所述抗體包含：
9.根據權利要求8所述的抗體，包含：
10.根據權利要求1-4中任一項所述的抗體，其中所述抗體包含：
11.根據權利要求10所述的抗體，包含：
12.根據權利要求1-11中任一項所述的抗體，其中所述抗體選自由以下組成的組：全長抗體、fab、fab’、f(ab)2、f(ab’)2和scfv。
13.根據權利要求1-12中任一項所述的抗體，其中所述抗體還包含fc區。
14.根據權利要求13所述的抗體，其中所述fc區包含igg4序列。
15.根據權利要求14所述的抗體，其中所述fc區包含seq?id?no:43的氨基酸序列或其變體。
16.根據權利要求15所述的抗體，其中所述fc區包含選自由s228p、m428l和n434a組成的組中的一種或多種突變，其中所述突變是在eu編號系統下相對于seq?id?no:43的突變。
17.根據權利要求16所述的抗體，其中所述fc區包含突變s228p、m428l和n434a。
18.根據權利要求17所述的抗體，其中所述fc區包含seq?id?no:44的氨基酸序列。
19.根據權利要求1-18中任一項所述的抗體，其中所述抗體從c5解離的低ph解離因數為約40％至約70％。
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【專利技術屬性】
技術研發人員：崔平，張建軍，朱細華，祁士鋼，宋文超，三輪隆史，佐藤紗也加，達莫達拉·勞·古利帕利，
申請(專利權)人：賓夕法尼亞大學理事會，
類型：發明
國別省市：
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