鹽酸金剛烷胺含量的高效液相色譜蒸發光散射測定法制造技術

本發明專利技術提供了高效液相色譜蒸發光散射測定鹽酸金剛烷胺含量的方法，檢測器為蒸發光散射檢測器，流動相為醋酸銨溶液與甲醇的組合體系。本發明專利技術技術方法簡便、靈敏度高，專屬性強，可用于單方或多種復方藥物制劑中鹽酸金剛烷胺含量的測定。

The content of amantadine hydrochloride high performance liquid chromatography with evaporative light scattering method

The invention provides a high performance liquid chromatography method for the determination of the content of amantadine hydrochloride steaming light scattering detector, ELSD, combination system of mobile phase of ammonium acetate solution and methanol. The technique method of the invention is simple, high sensitivity, strong specificity, can be used to determine the content of one or more compound amantadine hydrochloride in pharmaceutical preparations.

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及測定鹽酸金剛烷胺含覽的方法，特別是髙效液相色譜蒸發光散射測定含量的 相關技術。
技術介紹
鹽酸金剛垸胺化學名稱為三環[3. 3. 3. l]癸烷-1-胺鹽酸鹽。其結構式為分子式C8H9N02 分子量151.16理化性質為白色結晶或結晶性粉末；無臭，味苦；在水或乙醇中易溶，在二氯甲烷中溶解。鹽酸金剛烷胺具有抗感冒A型病毒作用， 一直作為抗病毒藥用于亞洲流感病毒的預防和 感染治療。在長期的臨床使用中，不僅對其抗流感病毒的療效給予肯定，而且發現了一些新 用途，如改善帕金森病癥狀等。目前國內市場上的金剛烷胺品種是口服單方鹽酸金剛烷胺， 和復方感冒藥，復方中與對乙酰氨基酚、咖啡因等組方。2005年版藥典二部中規定其含量測 定方法采用非水溶液滴定法，文獻報道有采用酸性染料比色法測定其含量，但這些方法都不 具有專一性，專屬性不強，特別是測定復方制劑中鹽酸金剛烷胺的含量時，其余成分很容易 影響測定結果的準確性。
技術實現思路
本專利技術就是針對現有技術的不足，采用高效液相色譜法來進行鹽酸金剛垸胺含量測定方 法；高效液相色譜法最常用的檢測器為紫外檢測器，但鹽酸金剛烷胺的結構為二環癸烷-1-胺鹽酸鹽,分子結構無共軛雙鍵，因而在紫外區無吸收?？紤]采用蒸發光散射檢測器(ELSD)， ELSD是質量檢測器，ELSD檢測的是不揮發的溶質顆粒，因而其響應值與被測物質的官能團和 光學性質無關。采用蒸發光散射檢測器進行鹽酸金剛垸胺的含量測定，有效地避免了復方制 劑中其余成分的干擾。本專利技術的目的可以通過以下技術方案實現31、 色譜柱選用規格為250mmX4. 6mm的的KromasilC18柱作為色譜固定相。2、 蒸發光散射檢測器漂移管溫度40'C，載氣(空氣)流速2.0bar3、 流動相體系由醋酸銨溶液與甲醇組成。4、 上述醋酸銨溶液濃度范圍為0.001 0.01rao1/1，優選為0.005 mo1/1。5、 醋酸銨溶液與甲醇溶液比例優選為(70-80) :(20 30)，更優選為(80:20)。6、 流動相流速為O. 4~1. Oml/min。高效液相色譜法與非水滴定法相比有以下優勢(1) 非水滴定法用于復方制劑中的鹽酸金剛垸胺含量測定專屬性不強，組方中其余成 分的干擾太大。而高效液相蒸發光散射檢測法的應用克服了這一缺陷，這由專屬性試驗色譜 圖可知，鹽酸金剛烷胺對照品、原料及其復方制劑的色譜圖比較，三者鹽酸金剛垸胺色譜峰 保留時間保持一致，并且陰性樣品未在此位置出峰，不干擾檢測。具體圖譜見附圖。(2) 用高效液相色譜蒸發光測定樣品含量，并進行方法學驗證，有良好的線性關系， 回收率高，精密度和溶液的日間穩定性良好，并且比滴定法靈敏度更高。(3) 高效液相色譜測定含量較之滴定法所需樣品量從幾克減少到了幾十毫克，減少了 樣品的浪費。因此本專利技術技術進步在于方法簡便、靈敏度高，專屬性強，可用于單方或多種復方藥物 制劑中鹽酸金剛烷胺含量的測定。 附圖說明圖l鹽酸金剛烷胺對照品溶液HPLC圖 圖2鹽酸金剛烷胺原料樣品溶液HPLC圖 圖3鹽酸金剛垸胺復方制劑樣品溶液HPLC圖 圖4鹽酸金剛烷胺制劑陰性樣品溶液HPLC圖 本專利技術的具體試驗過程如下 1.儀器與試劑島津LC-10ATvp泵；迪馬SEDEX型低溫蒸發光散射檢測器，漂移管溫度40'C，載氣(空 氣)流速2.0bar。色譜柱KromasilC18， 250mmX4.6,, 5um 試劑醋酸銨分析純，甲醇色譜純，水為二次重蒸水 流動相0.005mol/l醋酸銨溶液-甲醇(75:25) 流速0. 4ml/rain 進樣2(M2.測定方法的建立及方法驗證 (1)流動相的選擇根據蒸發光散射檢測器的相關文獻， 一般來說，流動相的揮發性越好，方法的靈敏度越 高。中性物質的分析，其流動相一般能滿足要求。但絕大多數酸堿化合物的檢測都需要緩沖鹽，而緩沖鹽的揮發性、純度及濃度將直接影響到ELSD檢測的基線水平、基線漂移程度及噪 音大小。緩沖鹽揮發性差，純度低，或濃度高，均會提高基線水平，增大基線漂移程度，從 而降低信噪比；揮發性好，載氣流速和漂移管溫度較低。因而，用作緩沖鹽的鹽既要容易揮 發(一般是熱分解揮發)，又要具有較高的純度。通常使用的緩沖鹽由醋酸、甲酸、二氟醋酸、 硝酸銨、磷酸氫二銨等組成。根據鹽酸金剛垸胺的特性選擇緩沖鹽與有機溶劑相結合的流動相，緩沖鹽選擇醋酸銨， 有機相選擇甲醇。以醋酸銨緩沖鹽和甲醇為基本配比，進行流動相比例的調節，使其達到最 佳狀態。分別以醋酸銨的比例、甲醇的比例、醋酸銨溶液的濃度為考察因素，設計正交試驗 表，結果見表l。表l流動相選擇結果試驗^^\醋酸銨濃度 (mol/L)醋酸銨比例A先甲醇比例 100%-A%結果評價10. 0018020峰型較好，可分離20. 0017525峰型較好，可分離30. 0017030峰型較好，可分離40,0016040峰型較差，不能分離50. 0058020峰型好，可分離60. 0057525峰型好，可分離70.0057030峰型好，可分離80. 0056040峰型較好，不能分離90. 018020峰型較好，可分離100. 017525峰型較好，可分離110. 017030峰型較好，可分離120. 016040峰型較好，不能分離130. 058020前沿峰，可分離140.057525前沿峰，可分離150. 057030前沿峰，可分離160. 056040前沿峰，可分離170. 18020前沿峰，可分離180. 17525前沿峰，可分離190. 17030前沿峰，可分離200. 16040前沿峰，不能分離由上表結果可知，醋酸銨溶液與甲醇比例(70-80) :(20~30)，濃度在O. 001-0. Olmol/1 范圍內，峰型較好，且分離度R〉1. 5，其中更優選為0.005mol/l醋酸銨溶液-甲醇(75:25)。(2)流速的選擇一般來說，采用ELSD檢測時，在一定范圍內，流動相的流速越低，流動相完全揮發所需 的載氣流速越低，形成的溶質顆粒越大，對激光散射能力越強，相應的信號越強。但流速過 低，會造成分析樣品出峰太早，影響分離度，流速過高，分析樣品出峰太晚，會導致峰型變 差，并加長了分析時間。因此選擇流動相流速為O. 1 1.0ml/min，優選為O. 4ml/min，峰型好， 分離度滿足分析要求，且保留時間適宜。 (3)方法的驗證照1.項下的色譜條件進行相關方法學的驗證。A專屬性陰性試驗取按處方配制的除鹽酸金剛垸胺外的陰性溶液，吸取注入高效液相色 譜儀，記錄色譜圖。結果輔料無干擾。 B線性與范圍精密稱取鹽酸金剛烷胺對照品適量，用水稀釋成不同濃度的溶液，按上述色譜條件，分 別吸取20W注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，以濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，計算 線性回歸方程為A-608952C-446673, r=0. 9999 (n=5)，表明鹽酸金剛烷胺濃度在0. 201 2.01mg/ml范圍內，線性關系良好。C精密度試驗照前述色譜條件，取濃度為1. 0mg/ml的鹽酸金剛烷胺對照品溶液，重復進樣6次，計 算峰面積的相對標準偏差RSD為0. 20%,表明精密度試驗結果良好。 D回收率試驗取鹽酸金剛烷胺約25mg，加入對照品適量本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種鹽酸金剛烷胺含量的測定方法，其特征在于用高效液相色譜法測定，檢測器為蒸發光散射檢測器。

【技術特征摘要】
1、一種鹽酸金剛烷胺含量的測定方法，其特征在于用高效液相色譜法測定，檢測器為蒸發光散射檢測器。2、 根據權利要求l所述的測定方法，其特征在于色譜柱選用規格為250mmX4.6mm的 KromasilC18柱作為色譜固定相。3、 根據權利要求l所述的測定方法，其特征在于其蒸發光檢測器漂移管溫度為4(TC，載 氣(空氣)流速2. Obar。4、 根據權利要求1所述的測定方法，其特征在于其流動相體系由醋酸銨溶液與...

【專利技術屬性】
技術研發人員：張玲玲，
申請(專利權)人：北京瑞伊人科技發展有限公司，安英，
類型：發明
國別省市：11[中國|北京]