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【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于疾病診斷預防,具體為circp58ipk在制備用于預防和/診斷和/檢測肝癌的產品中的應用。
技術介紹
1、肝癌包括肝細胞癌(hepatocellular?carcinoma,hcc)和肝內膽管細胞癌(intrahepatic?cholangiocarcinoma,icca)。其中肝細胞癌是原發性肝癌的主要類型,占75%至85%的病例目前肝癌診治主要存在早診率較低、惡性程度高、晚期治療難度大等多方面問題。晚期肝癌的五年生存率僅15%,大多數患者首次確診即為晚期。目前可用的肝癌治療方案有限。一般來說,對于早期和中期肝細胞癌患者,手術切除、肝移植和局部消融治療是可能的根治性治療手段。對于晚期、無法手術的肝癌患者來說,使用多激酶抑制劑(包括索拉非尼或樂伐替尼等)的系統治療雖然在一定程度上提高了患者的存活率,然而總存活率僅為10.7~13.6個月。因此有必要有效開發肝癌早期診斷的標志物。目前,肝癌的診斷篩查標志物主要有甲胎蛋白(alpha?fetoprotein,afp)、異常凝血酶原(protein?inducedby?vitamin?k?absence?or?antagonist-ii,pivka-ii)和病毒的拷貝數等。但是由于肝癌組織學類型的高度異質性,現有的肝癌的生物標志物在診斷的特異度和敏感度上均存在某種程度的不足,肝癌早期診斷依舊困難。因此,為了提高肝癌診斷的準確度和靈敏度,還需要開發新的可靠的診斷性生物標志物。
2、環狀rna(circrna)是一類內源性非編碼rna(ncrna),可調節許多生物
3、迄今為止,尚未見環狀rnacircp58ipk在診斷肝癌中的應用的相關研究和報道。
技術實現思路
1、為了克服現有技術的不足,解決目前肝癌診斷手段少的問題。一方面,本專利技術通過在肝癌細胞體外多種實驗證實circp58ipk真實存在于肝癌中,且結構較為穩定;另一方面,本專利技術通過對比肝癌臨床樣本中circp58ipk的表達水平發現,circp58ipk的表達水平在肝癌組織中明顯高于鄰近癌旁組織。本專利技術首次鑒定環狀rnacircp58ipk是肝癌的一個重要致癌因子,證實其可以作為肝癌診斷的分子標記物。
2、為了實現上述目的,本專利技術所采用的技術方案是:
3、本專利技術公開了circp58ipk在制備用于預防和/診斷和/檢測肝癌的產品中的應用,所述circp58ipk的核苷酸序列如seq?id?no:1所示,ctcaaatctaatccaagtgaaaatgaagaaaaggaagcacagtctcaacttataaaatctgatgaaatgcagcgtttgcgttcacaagcacttaacgcttttggaagtggagattatactgctgctatagccttccttgataagattttagaggtttgtgtttgggatgcagaactacgggaacttcgagctgaatgttttataaaagaaggagaacctaggaaagctataagtgacttaaaagctgcgtcaaagttgaagaatgataatactgaagcgttttataaaataagcacactgtactaccaactaggagaccacgaactgtccctcagtgaagttcgggaatgtcttaaacttgaccaggatcataaaaggtgttttgcacactataaacaagtaaagaaacttaataagctgattgagtcagctgaagagctcatcagagatggcagatacacagatgctaccagcaaatatgaatctgtcatgaaaacagagccaagcattgctgaatatacagttcgttcaaaggagaggatttgccactgcttttctaaggacgagaagcctgttgaagctattagggtttgttctgaagttttacagatggaacctgacaatgtgaatgccctgaaagatcgagcagaggcctatttgatagaggaaatgtatgatgaag
4、優選地,所述產品包括芯片或檢測試劑盒。
5、優選地,所述檢測試劑盒包含檢測circp58ipk的引物對。優選地,所述引物對包含以下:
6、circp58ipk_cp-e67_f:5'-agaccacgaactgtccctca-3'(seq?id?no:2)
7、circp58ipk_cp-e67_r:5'-tgagctcttcagctgactcaa-3'(seq?id?no:3);
8、circp58ipk_dp-e56_f:5'-gcagaactacgggaacttcg-3'(seq?id?no:8)
9、circp58ipk_dp-e56_r:5'-gcgttaagtgcttgtgaacg-3'(seq?id?no:9);
10、circp58ipk_dp-e59_f:5'-cctgaaagatcgagcagagg-3'(seq?id?no:10)
11、circp58ipk_dp-e59_r:5'-gcgttaagtgcttgtgaacg-3'(seq?id?no:11)。
12、優選地,所述芯片包括seq?id?no:14所示的原位雜交探針。
13、與現有技術相比,本專利技術的有益效果是:
14、本專利技術研究發現,circp58ipk是結構上穩定且真實存在的環狀rna,在肝癌組織中高表達,可以作為生物標志物用于肝癌診斷。
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1.circp58IPK在制備用于預防和/診斷和/檢測肝癌的產品中的應用,其特征在于,所述circp58IPK的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所示。
2.根據權利要求1所述的應用,其特征在于,所述產品包括芯片或檢測試劑盒。
3.根據權利要求2所述的應用,其特征在于,所述檢測試劑盒包含檢測circp58IPK的引物對。
4.根據權利要求3所述的應用,其特征在于,所述引物對包含以下:
5.根據權利要求2所述的應用,其特征在于,所述芯片包括SEQ?ID?NO:14所示的原位雜交探針。
【技術特征摘要】
1.circp58ipk在制備用于預防和/診斷和/檢測肝癌的產品中的應用,其特征在于,所述circp58ipk的核苷酸序列如seq?id?no:1所示。
2.根據權利要求1所述的應用,其特征在于,所述產品包括芯片或檢測試劑盒。
3.根據權利要求...
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