【技術實現步驟摘要】
本申請屬于病毒載體領域，具體涉及一種經過修飾的腺相關病毒衣殼蛋白及其用途。
技術介紹
1、當前，基因治療成為生物醫藥領域的研究熱點，基因治療中最常用的載體包括腺病毒、慢病毒以及腺相關病毒(adeno-associated?virus，aav，下同)。野生型腺相關病毒(wtaav，下同)隸屬于細小病毒科，是一個直徑為20nm的單鏈dna病毒，呈一個二十面體，衣殼蛋白里包被著一個兩端含有倒置末端重復序列(itr，下同)的病毒基因組，itr之間是一個開放閱讀框orf，包含衣殼蛋白cap、復制蛋白rep、包裝激活蛋白aap。已知野生型腺相關病毒會整合到人染色體aavs1位點。重組型腺相關病毒(raav，下同)基因組序列只保留了包裝病毒所必需的兩端的itr，中間全部替換為目的基因序列，這就保證了病毒基因組不整合進宿主基因組。
2、與腺病毒、慢病毒相比，重組型腺相關病毒(recombinant?adeno-associatedvirus，raav，下同)在人體中誘發免疫應答的幾率較低，這有助于提高載體遞送目的基因的效率，同時使用raav可以降低來自免疫相關的毒性風險；此外，raav可在體內外長期有效介導外源基因的持續穩定表達，已成為最有前景的基因治療載體之一。
3、研究表明，腺相關病毒的衣殼與病毒的感染力和組織親嗜性密切相關，在很大程度上影響了腺相關病毒載體的在不同細胞、組織和器官中的感染和表達效率，因此，對腺相關病毒衣殼蛋白的改進和優化有利于提高腺相關病毒載體藥物的表達效率和藥效。
技術
1、本申請的目的在于提供一種經過修飾的腺相關病毒衣殼蛋白及其用途。
2、本申請為解決上述技術問題，提出了如下技術方案：
3、本申請第一方面提供了一種腺相關病毒衣殼蛋白，其包含seq?id?no.1所示的氨基酸序列。
4、本申請第二方面提供了一種多核苷酸分子，其包含編碼本申請第一方面所提供的腺相關病毒衣殼蛋白的核苷酸序列或其互補序列的至少一種；優選地，所述多核苷酸分子包含seq?id?no.3所示的核苷酸序列。
5、本申請第三方面提供了一種表達載體，其包含本申請第二方面所提供的多核苷酸分子，其中，所述多核苷酸分子與啟動子序列可操作地連接。
6、本申請第四方面提供了一種細胞，其包含本申請第二方面所提供的多核苷酸分子或本申請第三方面所提供的表達載體。
7、本申請第五方面提供了一種重組病毒或病毒載體，其包含本申請第一方面所提供的腺相關病毒衣殼蛋白；優選地，所述重組病毒或病毒載體是aav；更優選地，所述aav是aav2。
8、本申請第六方面提供了一種藥物組合物，其包含本申請第五方面所提供的重組病毒或病毒載體，和藥學上可接受的載體和/或賦形劑。
9、本申請第七方面提供了本申請第一方面的腺相關病毒衣殼蛋白、本申請第二方面的多核苷酸分子、本申請第三方面的表達載體、本申請第四方面的細胞、本申請第五方面的重組病毒或病毒載體或本申請第六方面的藥物組合物在制備治療新生血管性眼病的藥物中的用途。
10、本申請第八方面還提供了一種治療或預防新生血管性眼病疾病方法，其包括通過玻璃體內注射或脈絡膜上腔注射，向受試者施用本申請第五方面的重組病毒或病毒載體或本申請第六方面的藥物組合物。
11、本申請的有益效果：本申請通過向aav衣殼蛋白中引入點突變，并采用突變后的衣殼蛋白組裝的aav載體，組裝的aav載體表達目標蛋白的效率明顯提升。
本文檔來自技高網...【技術保護點】
1.一種腺相關病毒衣殼蛋白，其包含SEQ?ID?NO.1所示的氨基酸序列。
2.一種多核苷酸分子，其包含編碼權利要求1所述的腺相關病毒衣殼蛋白的核苷酸序列或其互補序列的至少一種；優選地，所述多核苷酸分子包含SEQ?ID?NO.3所示的核苷酸序列。
3.一種表達載體，其包含權利要求2所述的多核苷酸分子，其中，所述多核苷酸分子與啟動子序列可操作地連接。
4.一種細胞，其包含權利要求2所述的多核苷酸分子或權利要求3所述的表達載體。
5.根據權利要求4所述的細胞，其進一步包含對治療性蛋白進行編碼的多核苷酸。
6.根據權利要求4或5所述的細胞，其進一步包含對rep蛋白進行編碼的多核苷酸。
7.一種重組病毒或病毒載體，其包含權利要求1所述的腺相關病毒衣殼蛋白；優選地，所述重組病毒或病毒載體是AAV；更優選地，所述AAV是AAV2。
8.根據權利要求7所述的重組病毒或病毒載體，其中，當玻璃體內或脈絡膜上腔注射到哺乳動物中時，所述重組病毒或病毒載體能夠結合并穿過內界膜。
9.根據權利要求7或8所述的重
10.一種藥物組合物，其包括權利要求7-9中任一項所述的重組病毒或病毒載體，和藥學上可接受的載體和/或賦形劑。
11.權利要求1所述的腺相關病毒衣殼蛋白、權利要求2所述的多核苷酸分子、權利要求3所述的表達載體、權利要求4-6中任一項所述的細胞、權利要求7-9中任一項所述的重組病毒或病毒載體或權利要求10所述的藥物組合物在制備治療新生血管性眼病的藥物中的用途；優選地，所述新生血管性眼病選自選年齡相關性黃斑變性(AMD)、濕性AMD、干性AMD、視網膜新生血管、脈絡膜新生血管、糖尿病性視網膜病變、增殖性糖尿病視網膜病變、視網膜靜脈阻塞、視網膜中央靜脈阻塞、視網膜分支靜脈阻塞、糖尿病性黃斑水腫、糖尿病性視網膜缺血、缺血性視網膜病變和糖尿病性視網膜水腫的至少一種。
...【技術特征摘要】
1.一種腺相關病毒衣殼蛋白，其包含seq?id?no.1所示的氨基酸序列。
2.一種多核苷酸分子，其包含編碼權利要求1所述的腺相關病毒衣殼蛋白的核苷酸序列或其互補序列的至少一種；優選地，所述多核苷酸分子包含seq?id?no.3所示的核苷酸序列。
3.一種表達載體，其包含權利要求2所述的多核苷酸分子，其中，所述多核苷酸分子與啟動子序列可操作地連接。
4.一種細胞，其包含權利要求2所述的多核苷酸分子或權利要求3所述的表達載體。
5.根據權利要求4所述的細胞，其進一步包含對治療性蛋白進行編碼的多核苷酸。
6.根據權利要求4或5所述的細胞，其進一步包含對rep蛋白進行編碼的多核苷酸。
7.一種重組病毒或病毒載體，其包含權利要求1所述的腺相關病毒衣殼蛋白；優選地，所述重組病毒或病毒載體是aav；更優選地，所述aav是aav2。
8.根據權利要求7所述的重組病毒或病毒載體，其中，當玻璃體內或脈絡膜上腔注射到哺乳動物中時，所述重...
【專利技術屬性】
技術研發人員：劉瑄，趙君竺，劉海燕，丁衛，謝興旺，程杉，趙春林，
申請(專利權)人：北京安龍生物醫藥有限公司，
類型：發明
國別省市：
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