【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及糖化血紅蛋白檢測，具體的涉及一種糖化血紅蛋白檢測方法及檢測試劑盒。
技術介紹
1、糖化血紅蛋白(hba1c)是葡萄糖和紅細胞內的血紅蛋白形成的非酶催化的穩定糖基化產物，糖化血紅蛋白可以有效地反映過去2-3個月的平均血糖水平，不受每天血糖波動的影響，《中國2型糖尿病防治指南(2020年版)》將“糖化血紅蛋白”首次正式納入到糖尿病診斷標準中。糖化血紅蛋白也可作為長期血糖控制的重要監測指標，為臨床調整藥物劑量或治療方案提供參考。
2、目前，常用的測定糖化血紅蛋白的方法有離子交換層析、高效液相色譜、膠乳免疫比濁法、酶法等。其中離子交換層析、高效液相色譜法需要特定的儀器，試劑昂貴，測試成本較高，很難在基層醫院實驗室開展。酶法檢測糖化血紅蛋白是利用氧化還原反應，需要多種酶的參與，檢測精密度、準確度較差。膠乳免疫比濁法不需要特殊儀器，且結果比酶法準確，價格相比高效液相色譜方法低，測試成本比高效液相色譜法低，適用于批量檢測，因此，臨床上多用乳膠免疫比濁法，而臨床上常使用的免疫學方法檢測技術有兩種，一種是免疫透射比濁法，如常用的生化儀；另一種是免疫散射比濁法，如特定蛋白分析儀，相比較透射比濁法靈敏度、精密度均較高，檢測快速。
3、例如，公開號為cn101915849a的中國專利公開了一種測定糖化血紅蛋白百分比的方法，包括如下步驟：a.將全血樣本與溶血液混合均勻；b.取適量溶血后的樣本加入懸浮在甘氨酸緩沖液中的乳膠；c.經預定時間后再分別加入抗體b試劑及抗體a試劑；d.混合均勻后在單波長光照射條件下，通過特定蛋
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于克服現有技術中檢測方法耗時長、試劑盒成分復雜、操作繁瑣等缺陷。的缺陷，提供了一種糖化血紅蛋白檢測方法及檢測試劑盒。
2、為了實現以上目的及其他目的，本專利技術是通過以下技術方案實現的：
3、首先本專利技術提供了一種糖化血紅蛋白檢測方法，包括如下步驟：
4、步驟s1，使用溶血劑將全血樣本溶血，釋放血紅蛋白；
5、步驟s2，取適量溶血后的樣本加入膠乳試劑r1；
6、步驟s3，加入抗體試劑r2；
7、步驟s4，在單波長655nm照射下，通過特定蛋白分析儀讀取散射速率值；
8、步驟s5，根據散射速率值在標準曲線圖中讀取糖化血紅蛋白的含量。
9、在一實施例中，所述步驟s2中，所述膠乳試劑r1為0.05％～0.15％的空白膠乳微球懸浮在50mm的硼酸緩沖液中。
10、在一實施例中，所述步驟s3中，所述抗體試劑r2為鼠抗人hba1c單克隆抗體
11、在一實施例中，所述抗體試劑r2是0.015～0.025mg/l的鼠抗人hba1c單克隆抗體混合在50mm的磷酸緩沖液中。
12、在一實施例中，所述全血樣本用量為10μl，所述溶血劑的用量為1000μl，所述膠乳試劑r1的用量為225μl，所述抗體試劑r2的用量為75μl。
13、在一實施例中，所述步驟s5中校準曲線繪制時所需校準品為已溯源的校準品，其濃度分別為0％、4.8％、8.5％、11.5％和14.5％。
14、本專利技術還提供了一種糖化血紅蛋白檢測試劑盒，適用于上述任一項所述的糖化血紅蛋白檢測檢測方法，所述試劑盒包括膠乳試劑r1和抗體試劑r2，其中，
15、所述膠乳試劑r1包括如下含量的原料：
16、
17、所述抗體試劑r2包括如下原料：
18、
19、
20、在一實施例中，所述空白膠乳為聚苯乙烯膠乳微球，所述膠乳微球直徑為100～400nm。
21、在一實施例中，所述糖化血紅蛋白抗體是鼠抗人hba1c單克隆抗體
22、在一實施例中，所述抗體試劑r2中還可以包括血紅蛋白抗體。
23、本專利技術具備以下有益效果：
24、1、本專利技術提供的糖化血紅蛋白檢測方法以速率散射比濁法為檢測原理，靈敏度高，無需單獨測定血液樣本中的總血紅蛋白及糖化血紅蛋白含量；
25、2、無需手動處理樣本，由自動化儀器完成檢測過程，有效避免醫護人員接觸血液的時間和機會，減少了污染，同時也避免了人為操作誤差；同時本方法測試時間僅需要68s，測試時間短，便于臨床運用；
26、3、本專利技術提供的糖化血紅蛋白檢測試劑盒中含有空白膠乳微球，能夠快速吸附血液中血紅蛋白和糖化血紅蛋白；采用雙試劑，操作簡單，靈敏度高，線性范圍廣，可以廣泛應用于各種透射或者散射分析儀，包括普通生化分析儀、特定蛋白分析儀等。
27、4、通過在本專利技術提供的糖化血紅蛋白檢測試劑盒中添加血紅蛋白抗體，可以使糖化血紅蛋白檢測試劑盒在用作檢測糖化血紅蛋白時不受血紅蛋白增多的影響，從而降低血紅蛋白增多個體差異的影響。
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1.一種糖化血紅蛋白檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：
2.根據權利要求1所述的一種糖化血紅蛋白檢測方法，其特征在于，所述步驟S2中，所述膠乳試劑R1為0.05％～0.15％的空白膠乳微球懸浮在50mM的硼酸緩沖液中。
3.根據權利要求2所述的一種糖化血紅蛋白檢測方法，其特征在于，所述步驟S3中，所述抗體試劑R2為鼠抗人HbA1c單克隆抗體。
4.根據權利要求3所述的一種糖化血紅蛋白檢測方法，其特征在于，所述抗體試劑R2是0.015～0.025mg/L的鼠抗人HbA1c單克隆抗體混合在50mM的磷酸緩沖液中。
5.根據權利要求1所述的一種糖化血紅蛋白檢測方法，其特征在于，所述全血樣本用量為10μL，所述溶血劑的用量為1000μL，所述膠乳試劑R1的用量為225μL，所述抗體試劑R2的用量為75μL。
6.根據權利要求1所述的一種糖化血紅蛋白檢測方法，其特征在于，所述步驟S5中校準曲線繪制時所需校準品為已溯源的校準品，其濃度分別為0％、4.8％、8.5％、11.5％和14.5％。
7.一種糖化血紅蛋白檢測試劑
8.根據權利要求7所述的一種糖化血紅蛋白檢測試劑盒，其特征在于，所述空白膠乳為聚苯乙烯膠乳微球，所述膠乳微球直徑為100～400nm。
9.根據權利要求8所述的一種糖化血紅蛋白檢測試劑盒，其特征在于，所述糖化血紅蛋白抗體是鼠抗人HbA1c單克隆抗體。
10.根據權利要求7所述的一種糖化血紅蛋白檢測試劑盒，其特征在于，所述抗體試劑R2中還包括血紅蛋白抗體。
...【技術特征摘要】
1.一種糖化血紅蛋白檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：
2.根據權利要求1所述的一種糖化血紅蛋白檢測方法，其特征在于，所述步驟s2中，所述膠乳試劑r1為0.05％～0.15％的空白膠乳微球懸浮在50mm的硼酸緩沖液中。
3.根據權利要求2所述的一種糖化血紅蛋白檢測方法，其特征在于，所述步驟s3中，所述抗體試劑r2為鼠抗人hba1c單克隆抗體。
4.根據權利要求3所述的一種糖化血紅蛋白檢測方法，其特征在于，所述抗體試劑r2是0.015～0.025mg/l的鼠抗人hba1c單克隆抗體混合在50mm的磷酸緩沖液中。
5.根據權利要求1所述的一種糖化血紅蛋白檢測方法，其特征在于，所述全血樣本用量為10μl，所述溶血劑的用量為1000μl，所述膠乳試劑r1的用量為225μl，所述抗體試劑r2的用量為75μl...
【專利技術屬性】
技術研發人員：范文萍，馬麗利，邵建輝，
申請(專利權)人：精匠診斷技術江蘇有限公司，
類型：發明
國別省市：
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