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    一種兩株產(chǎn)酯酵母菌株共培養(yǎng)提高發(fā)酵產(chǎn)酯含量的方法和應(yīng)用技術(shù)

    技術(shù)編號(hào):41764860 閱讀:9 留言:0更新日期:2024-06-21 21:43
    本發(fā)明專利技術(shù)屬于微生物、發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域,公開了一種兩株產(chǎn)酯酵母菌株共培養(yǎng)提高發(fā)酵產(chǎn)酯含量的方法,所述方法中使用庫(kù)德里阿茲威畢赤酵母(Pichia?kudriavzevii)PK2、異常威克漢姆酵母(Wickerhamomyces?anomalus)W4,且該兩株菌株同時(shí)發(fā)酵。本發(fā)明專利技術(shù)將庫(kù)德里阿茲威畢赤酵母和異常威克漢姆酵母應(yīng)用到醬香型白酒固態(tài)釀造工藝中,提高了出酒率和醬香型白酒的酯類含量,使酒體口感更柔和,酒體風(fēng)味更豐富,對(duì)進(jìn)一步提高酒體品質(zhì)具有重要作用。同時(shí),對(duì)功能性釀造微生物資源的強(qiáng)化利用和傳統(tǒng)釀酒過程的創(chuàng)新升級(jí)具有深遠(yuǎn)的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)意義。

    【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

    本專利技術(shù)屬于微生物、發(fā)酵,尤其是一種兩株產(chǎn)酯酵母菌株共培養(yǎng)提高發(fā)酵產(chǎn)酯含量的方法和應(yīng)用。


    技術(shù)介紹

    1、酯類是白酒的第一大類,對(duì)白酒品質(zhì)方面具有重要的作用,其種類、含量和比例是決定白酒酒體好壞的重要因素,在傳統(tǒng)白酒釀造方面具有重要的影響作用。研究表明,在傳統(tǒng)釀造食品中,酯類主要來(lái)源于微生物發(fā)酵,少量源于發(fā)酵過程中物質(zhì)的化學(xué)反應(yīng)和原料帶入,可見,如果能夠充分利用高產(chǎn)酯的微生物進(jìn)行發(fā)酵對(duì)于提升白酒品質(zhì)具有預(yù)見的可觀效果。通過前期研究發(fā)現(xiàn),在這些產(chǎn)酯微生物中,產(chǎn)酯酵母是傳統(tǒng)發(fā)酵食品中酯類物質(zhì)主要產(chǎn)生菌株。從白酒釀造體系中獲得能高產(chǎn)酯的功能微生物,并將其強(qiáng)化應(yīng)用到釀造體系中,對(duì)于提高白酒中酯類物質(zhì)含量具有重要意義。

    2、白酒釀造過程中原料、工藝、微生物、環(huán)境條件會(huì)引起酒體中風(fēng)味物質(zhì)的種類及含量的差異,其中,微生物是最重要的因素,而酵母菌是白酒風(fēng)味貢獻(xiàn)的主要微生物。酵母在發(fā)酵過程中會(huì)受到多種環(huán)境脅迫的影響,主要包括滲透壓、溫度、乙醇、低ph等,這些脅迫可以破壞酵母的細(xì)胞結(jié)構(gòu)從而影響其生長(zhǎng)、代謝和生理功能,導(dǎo)致酵母的生長(zhǎng)速率和存活率均較低,最終影響發(fā)酵效率。因此,酵母菌株在釀造過程中需具備多環(huán)境耐受性、廣譜底物適應(yīng)性、產(chǎn)酯等特點(diǎn)才有利于在工業(yè)生產(chǎn)中提高發(fā)酵效率、降低生產(chǎn)成本以及改善產(chǎn)品質(zhì)量。在眾多的產(chǎn)香酵母中,庫(kù)德里阿茲威畢赤酵母和異常威克漢姆酵母能夠高產(chǎn)酯類物質(zhì),賦予白酒花果香氣特征,能夠明顯改善白酒的香氣輪廓和白酒品質(zhì)。

    3、已有報(bào)道中,專利技術(shù)專利201811379487.3和專利技術(shù)專利201711136361.9分別提供了一株高產(chǎn)乙醇的釀酒酵母及其與高產(chǎn)酯異常威克漢姆酵母共培養(yǎng)提高傳統(tǒng)發(fā)酵食品品質(zhì)的方法,其中專利技術(shù)專利201811379487.3涉及釀酒酵母yf1914和異常威克漢姆酵母yf1503在高粱酶解液培養(yǎng)基中雙菌共培養(yǎng)條件的優(yōu)化,最終乙酸乙酯含量達(dá)到4.30g/l,專利技術(shù)專利201711136361.9提供了一株高產(chǎn)乙醇的釀酒酵母yf3401及其與異常威克漢姆酵母yf3604協(xié)同發(fā)酵提高乙酸乙酯含量的最適比例及應(yīng)用,與本專利技術(shù)中產(chǎn)酯酵母的種類和性能不同,優(yōu)化共培養(yǎng)條件采用的培養(yǎng)基不同,本專利技術(shù)中采用模擬固態(tài)發(fā)酵和原位發(fā)酵試驗(yàn),將產(chǎn)酯酵母應(yīng)用于醬香型白酒第七輪次釀造過程,更具實(shí)際應(yīng)用意義,且本專利技術(shù)中不僅提高了發(fā)酵酒樣中乙酸乙酯的含量,總酯、己酸乙酯和乳酸乙酯含量均有顯著提升;專利技術(shù)專利202110120767.8提供了一株耐性優(yōu)良的扣囊覆膜酵母及其與馬克斯克魯維酵母共培養(yǎng)產(chǎn)乙酸等有機(jī)酸和乙酸苯乙酯的應(yīng)用,其采用玉米麩皮固體培養(yǎng)基,將兩株酵母按照一定的比例混合發(fā)酵,應(yīng)用于米酒發(fā)酵過程,與本專利技術(shù)中菌株種類、發(fā)酵培養(yǎng)基、功能和主要應(yīng)用環(huán)境均不同,且本專利技術(shù)菌株具有多環(huán)境耐受性能,且耐受性能更強(qiáng),適應(yīng)環(huán)境能力更強(qiáng)。專利技術(shù)專利201710827683.1提供了一種多菌種強(qiáng)化大曲發(fā)酵釀造清香型白酒的生產(chǎn)方法,將釀酒酵母、米根霉、煙色紅曲霉和枯草芽孢桿菌以一定比例用于強(qiáng)化大曲,提高了白酒乙/乳比,與本專利技術(shù)菌株來(lái)源相似,但功能和應(yīng)用環(huán)境不同,且本專利技術(shù)菌株耐受性能更強(qiáng),在提高白酒酯類物質(zhì)含量的同時(shí),豐富了菌種資源庫(kù),具有廣闊的應(yīng)用前景。

    4、綜上,根據(jù)目前利用產(chǎn)酯酵母強(qiáng)化發(fā)酵白酒的研究,對(duì)酵母菌耐受性能的考察較為片面,并且多為單一菌種的發(fā)酵應(yīng)用,導(dǎo)致強(qiáng)化菌種不具備廣譜適用性且功能單一。此外,目前多采用液態(tài)發(fā)酵法將產(chǎn)酯酵母應(yīng)用于醬香型白酒釀造過程,然而,這與實(shí)際生產(chǎn)的固態(tài)發(fā)酵環(huán)境相差較大,導(dǎo)致其研究只能停留在實(shí)驗(yàn)室規(guī)模,難以應(yīng)用于實(shí)際生產(chǎn)過程。

    5、相比之下,本專利技術(shù)中的兩株產(chǎn)酯酵母具有多環(huán)境耐受性且產(chǎn)酯能力更強(qiáng),進(jìn)一步采用高粱固態(tài)培養(yǎng)基優(yōu)化產(chǎn)酯酵母混合發(fā)酵的培養(yǎng)條件,通過原位發(fā)酵試驗(yàn)將其應(yīng)用于醬香型白酒第七輪次釀造過程,以提高白酒釀造中酯類物質(zhì)的含量,達(dá)到改善酒體風(fēng)味的目的,使酒體風(fēng)味更加柔和豐滿,從而提升醬香型白酒品質(zhì),不僅豐富了菌種資源庫(kù),而且具有更高的應(yīng)用價(jià)值和實(shí)際意義。


    技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

    1、本專利技術(shù)的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足之處,提供一種兩株產(chǎn)酯酵母菌株共培養(yǎng)提高發(fā)酵產(chǎn)酯含量的方法和應(yīng)用。

    2、本專利技術(shù)解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是:

    3、一種兩株產(chǎn)酯酵母菌株共培養(yǎng)提高發(fā)酵產(chǎn)酯含量的方法,所述方法中使用庫(kù)德里阿茲威畢赤酵母(pichia?kudriavzevii)pk2、異常威克漢姆酵母(wickerhamomycesanomalus)w4,且該兩株菌株同時(shí)發(fā)酵。

    4、進(jìn)一步地,所述庫(kù)德里阿茲威畢赤酵母pk2,其名稱為pk2,分類名稱為:pichiakudriavzevii,保藏編號(hào)為:cgmcc?no.29250,保藏日期:2023年12月6日,保藏單位:中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心,北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào);

    5、所述異常威克漢姆酵母w4,其名稱為w4,分類名稱為:wickerhamomycesanomalus,保藏編號(hào)為:cgmcc?no.29249,保藏日期:2023年12月6日,保藏單位:中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心,北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)。

    6、進(jìn)一步地,具體包括如下步驟:

    7、以高粱固態(tài)培養(yǎng)基為發(fā)酵產(chǎn)酯培養(yǎng)基,裝填量為200g/500ml,在布拉迪酵母bd-2接入36h后,將活化好的庫(kù)德里阿茲威畢赤酵母pk2和異常威克漢姆酵母w4按照菌濃度106cfu/ml:108cfu/ml的接種比例,以5%的接種量同時(shí)接入到高粱固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行產(chǎn)酯培養(yǎng),接種后在30℃下靜置培養(yǎng)7天,發(fā)酵結(jié)束。

    8、進(jìn)一步地,所述方法得到的總酯含量達(dá)到1294.62mg/l。

    9、進(jìn)一步地,所述方法為兩株產(chǎn)酯酵母菌株共培養(yǎng)提高白酒品質(zhì)的方法,包括如下步驟:

    10、將庫(kù)德里阿茲威畢赤酵母pk2和異常威克漢姆酵母w4菌懸液以106:108的接種比例混合,即庫(kù)德里阿茲威畢赤酵母pk2菌濃度為2×106cfu/ml,異常威克漢姆酵母w4菌濃度為2×108cfu/ml,接種時(shí)間為b-36,即堆積發(fā)酵36h后,按照5%的接種量將菌懸液接種于六輪次攤涼拌曲后的酒醅中,待酒醅自然堆積發(fā)酵和窖池發(fā)酵結(jié)束。

    11、進(jìn)一步地,所述方法得到的總酯含量為11283.83mg/l。

    12、如上所述的方法在食品發(fā)酵方面中的應(yīng)用。

    13、如上所述的方法在原位發(fā)酵方面中的應(yīng)用。

    14、如上所述的方法在白酒發(fā)酵方面中的應(yīng)用。

    15、本專利技術(shù)取得的優(yōu)點(diǎn)和積極效果為:

    16、1、本專利技術(shù)將庫(kù)德里阿茲威畢赤酵母和異常威克漢姆酵母應(yīng)用到醬香型白酒固態(tài)釀造工藝中,提高了出酒率和醬香型白酒的酯類含量,使酒體口感更柔和,酒體風(fēng)味更豐富,對(duì)進(jìn)一步提高酒體品質(zhì)具有重要作用。同時(shí),對(duì)功能性釀造微生物資源的強(qiáng)化利用和傳統(tǒng)釀酒過程的創(chuàng)新升級(jí)具有深遠(yuǎn)的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)意義。

    17、2、本專利技術(shù)通過對(duì)庫(kù)德里阿茲威畢赤酵母(pichia?kudria本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

    【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】

    1.一種兩株產(chǎn)酯酵母菌株共培養(yǎng)提高發(fā)酵產(chǎn)酯含量的方法,其特征在于:所述方法中使用庫(kù)德里阿茲威畢赤酵母(Pichia?kudriavzevii)PK2、異常威克漢姆酵母(Wickerhamomyces?anomalus)W4,且該兩株菌株同時(shí)發(fā)酵。

    2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于:所述庫(kù)德里阿茲威畢赤酵母PK2,其名稱為PK2,分類名稱為:Pichia?kudriavzevii,保藏編號(hào)為:CGMCC?No.29250,保藏日期:2023年12月6日,保藏單位:中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心,北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào);

    3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法,其特征在于:具體包括如下步驟:

    4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法,其特征在于:所述方法得到的總酯含量達(dá)到1294.62mg/L。

    5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述方法為兩株產(chǎn)酯酵母菌株共培養(yǎng)提高白酒品質(zhì)的方法,包括如下步驟:

    6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法,其特征在于:所述方法得到的總酯含量為11283.83mg/L。

    7.如權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)所述的方法在食品發(fā)酵方面中的應(yīng)用。

    8.如權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)所述的方法在原位發(fā)酵方面中的應(yīng)用。

    9.如權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)所述的方法在白酒發(fā)酵方面中的應(yīng)用。

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    【技術(shù)特征摘要】

    1.一種兩株產(chǎn)酯酵母菌株共培養(yǎng)提高發(fā)酵產(chǎn)酯含量的方法,其特征在于:所述方法中使用庫(kù)德里阿茲威畢赤酵母(pichia?kudriavzevii)pk2、異常威克漢姆酵母(wickerhamomyces?anomalus)w4,且該兩株菌株同時(shí)發(fā)酵。

    2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于:所述庫(kù)德里阿茲威畢赤酵母pk2,其名稱為pk2,分類名稱為:pichia?kudriavzevii,保藏編號(hào)為:cgmcc?no.29250,保藏日期:2023年12月6日,保藏單位:中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心,北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào);

    3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所...

    【專利技術(shù)屬性】
    技術(shù)研發(fā)人員:李繼齊李昂,杜麗平,尹亞格,孫羊羊,李夢(mèng)
    申請(qǐng)(專利權(quán))人:天津蘆臺(tái)春釀造有限公司
    類型:發(fā)明
    國(guó)別省市:

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