【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】
[]本專利技術涉及藥物配制品領域及其制備方法。本專利技術進一步涉及用于冷凍和冷凍干燥脂質納米顆粒(lnp)的方法。
技術介紹
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技術介紹
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1、脂質納米顆粒(lnp)已被證明有效地將多種類型的治療活性劑遞送到細胞中(thi等人,vaccines[疫苗],2021,9(4),359)。例如，含有核酸的lnp(如lnp-mrna)引起了人們的極大興趣，最近證明了它們在疫苗領域的功效和安全性，并經證明在應對covid-19大流行中起到非常重要的作用(reichmuth等人,therapeutic?delivery[治療遞送],2016,7(5),319-334；khurana等人,nano?today[今日納米],2021,38,101142)。
2、然而，目前獲得許可的mrna-脂質納米顆粒(lnp)covid-19疫苗的一個重要缺點是疫苗必須儲存在非常低的溫度下(schoenmaker等人,international?journal?ofpharmaceutics[國際藥學雜志],2021,601,120586)。事實上，兩種獲得許可的疫苗所需的儲存溫度條件分別是莫德納(moderna)疫苗的約-20℃和拜恩泰科/輝瑞(biontech/pfizer)疫苗的約-80℃至-60℃(crommelin等人,j?pharm?sci.[美國藥學雜志]2021；110(3):997-1001)。
3、作為有組織結構的lnp可能會受到冷凍過程和此類儲存溫度的負面影響。lnp結構的改變可能導致lnp將其貨
4、此外，這樣的溫度條件必然在藥物組合物的整個制造、分銷和包裝過程中對冷鏈的維護造成多重困難。冷鏈管理的任何失敗都必然導致產品浪費。
5、雖然大流行形勢需要全球性范圍的迅速應對，但要確保維持基于lnp的疫苗質量所需的溫度水平和控制需求，則可能會減緩生產設施、全球分銷組織以及當地供應和管理的部署。
6、冷凍干燥(或凍干)是制藥工業中使易變產品穩定的常用方法。冷凍干燥是這樣一種技術：通過冷凍使產品固化，并且在低大氣壓(或真空)下或在冷的干燥氣體流下加熱通過升華使含有產品的溶劑(例如水)蒸發。冷凍干燥可以通過小瓶中的常規凍干或通過噴霧冷凍干燥(sfd)進行。
7、用于噴霧冷凍干燥的方法和設備在adali等人,processes[方法].2020；8(6)、wanning等人,int?j?pharm[國際藥學雜志].2015；488(1-2):136-153、wo?2009/109550a1、wo?2013/050162?a1、wo?2013/050156?a1或wo?2013/050159?a1中披露。
8、ali等人(int?j?pharm[國際藥學雜志].2017,；516(1-2):170-177)描述了脂質納米顆粒的噴霧冷凍干燥。
9、fukushige等人(int?j?pharm[國際藥學雜志].2020；583:119338)描述了含有魚精蛋白-sirna復合物的脂質體的噴霧冷凍干燥。
10、zhao等人,bioact?mater[生物活性材料].2020；5(2):358-363報道了一項關于含有mrna和不同濃度的冷凍保護劑(蔗糖、海藻糖或甘露醇)的脂質樣納米顆粒(lln)在冷凍或凍干過程條件下穩定性的研究。
11、然而，還已知lnp的冷凍干燥也會導致幾種應力，從而導致lnp的物理不穩定性，例如聚集、融合或內容物泄漏(trenkenschuh等人,eur?j?pharm?biopharm[歐洲藥劑學和生物藥劑學雜志].2021年8月；165:345-360)。ball等人(int?j?nanomedicine[國際納米醫學雜志],2016,12,305-315)報道了凍干對lnp穩定性的影響。
12、因此，仍然需要對lnp結構和/或穩定性沒有負面影響或負面影響減少的用于冷凍或冷凍干燥lnp的方法。
13、需要對lnp聚集和lnp粒度分布沒有影響或影響減少的用于冷凍或冷凍干燥lnp的方法。
14、需要對包裹在lnp中的藥劑的包裹率沒有影響或影響減少的用于冷凍或冷凍干燥lnp的方法。
15、需要對lnp結構和/或穩定性沒有負面影響或負面影響減少的適合噴霧冷凍或噴霧冷凍干燥的lnp配制品。
16、需要對lnp聚集和lnp粒度分布沒有影響或影響減少的適合噴霧冷凍或噴霧冷凍干燥的lnp配制品。
17、需要對包裹在lnp中的藥劑的包裹率沒有影響或影響減少的適合噴霧冷凍或噴霧冷凍干燥的lnp配制品。
18、需要用于冷凍干燥lnp的方法和/或適合進行冷凍干燥的lnp配制品，其允許獲得能夠在2℃-8℃下儲存的冷凍干燥的lnp，對lnp聚集和lnp粒度分布沒有影響或影響減少。
19、需要用于冷凍干燥lnp的方法和/或適合進行冷凍干燥的lnp配制品，其允許獲得能夠在2℃-8℃下儲存的冷凍干燥的lnp，對包裹在lnp中的藥劑(例如mrna)的包裹率沒有影響或影響減少。
20、需要用于冷凍干燥含有mrna的lnp的方法和/或適合進行冷凍干燥的含有mrna的lnp配制品，其適合提供能夠在2℃-8℃下儲存的冷凍干燥的lnp，對被包裹的mrna的包裹率沒有影響或影響減少。
21、需要用于冷凍干燥含有mrna的lnp的方法和/或適合進行冷凍干燥的含有mrna的lnp配制品，其適合提供能夠在施用后維持或產生增強的mrna蛋白表達的冷凍干燥的lnp。
22、本專利技術的目的是滿足全部或部分這些需求。
技術實現思路
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技術實現思路
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1、根據其目的之一，本專利技術涉及一種用于冷凍脂質納米顆粒(lnp)的方法，所述lnp至少包含作為脂質組分的陽離子可電離脂質、中性脂質和類固醇或其酯，所述lnp包含至少一種核酸，其中所述方法包括以下步驟：
2、a)提供包含所述lnp的液體組合物，
3、b)在適合獲得液滴的條件下噴霧步驟a)的組合物，以及
4、c)冷凍在步驟b)中獲得的液滴以獲得冷凍的lnp。
5、如實例部分中所示，諸位專利技術人已出人意料地觀察到，與在小瓶中冷凍相比，在例如-80℃的冷凍溫度下冷凍含有lnp的液滴允許減少lnp的聚集，該lnp為例如至少包含作為脂質組分的陽離子可電離脂質、中性脂質和類固醇或其酯以及任選的peg脂質的lnp。維持lnp的粒度分布。此外，對于含有核酸(例如mrna)的lnp，與在小瓶中冷凍的lnp相比，觀察到以液滴形式冷凍的lnp的核酸包裹率更高。本文披露的方法有利地允許維持冷凍的lnp的穩定性。
6、在注射由冷凍的lnp重構的配制品時，lnp聚集減少可能是有利的，因為構成大塊的聚集物可能會引起不良反應，如疼痛。此外，維持良好的核酸(如mrna)包裹率將提高相應的蛋白質本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種用于冷凍脂質納米顆粒(LNP)的方法，所述LNP至少包含作為脂質組分的陽離子可電離脂質、中性脂質和類固醇或其酯，所述LNP至少包含核酸，其中所述方法包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的方法，其中噴霧的步驟b)用電磁液滴流發生器、壓電液滴流發生器、液壓液滴氣溶膠發生器、氣動噴嘴、超聲波噴嘴、熱液滴流發生器或電流體動力學液滴(EHD)發生器進行。
3.根據權利要求1或2中任一項所述的方法，其中冷凍的步驟c)通過用壓縮的二氧化碳將這些液滴噴霧到低溫氣氛中，噴霧到低溫液體上方的蒸氣中，噴霧到低溫液體中或噴霧到冷固體表面上來進行。
4.一種用于冷凍干燥脂質納米顆粒(LNP)的方法，所述方法至少包括以下步驟：
5.根據權利要求4所述的方法，其中干燥的步驟e)通過轉鼓真空凍干、冷空氣流常壓干燥、真空室凍干或真空隧道凍干進行。
6.根據權利要求1至5中任一項所述的方法，其中這些LNP包含：
7.根據權利要求1至6中任一項所述的方法，其中
8.根據權利要求1或7所述的方法，其中這些LNP進一步包含作為脂
9.根據權利要求8所述的方法，其中這些LNP包含0.5％至15％，或0.5％至10％，或0.8％至5％，或1％至3％，或1.5％至2％的所述PEG脂質，以相對于所述LNP的脂質組分的總重量的w/w％計。
10.根據權利要求8或9所述的方法，其中該PEG脂質選自由以下組成的組：PEG-DAG；DMG-PEG-2000；PEG-PE；PEG-S-DAG；PEG-S-DMG；PEG-cer；PEG-二烷氧基丙基氨基甲酸酯；2-[(聚乙二醇)-2000]-N,N-二十四烷基乙酰胺(ALC-0159)；及其組合。
11.根據權利要求8至10中任一項所述的方法，其中這些LNP包含：
12.根據權利要求1至11中任一項所述的方法，其中該核酸是RNA。
13.根據權利要求1至11所述的方法，其中該核酸是信使RNA(mRNA)；微RNA(miRNA)；短(或小)干擾RNA(siRNA)；小發夾RNA(shRNA)；長非編碼RNA(lncRNA)；不對稱干擾RNA(aiRNA)；自擴增RNA(saRNA)；指導RNA(gRNA)；及其組合。
14.根據權利要求1至12中任一項所述的方法，其中該核酸編碼選自基因組編輯多肽、趨化因子、細胞因子、生長因子、抗體、酶、結構蛋白、血液蛋白、激素、轉錄因子或抗原的治療劑。
15.根據權利要求1至14中任一項所述的方法，其中包含所述LNP的該液體組合物包含冷凍保護劑。
16.根據權利要求15所述的方法，其中該冷凍保護劑是海藻糖和右旋糖酐的混合物。
17.根據權利要求16所述的方法，其中該海藻糖和該右旋糖酐以相對于該組合物總體積相等量的重量體積百分比存在。
18.一種冷凍干燥的LNP，其可根據權利要求4至13中任一項所述的方法獲得。
19.一種冷凍干燥的LNP，其至少包含核酸和至少包含作為脂質組分的陽離子可電離脂質、中性脂質和類固醇或其酯，所述冷凍干燥的LNP在冷凍干燥的微粒中。
20.根據權利要求15所述的冷凍干燥的LNP，其中該核酸編碼選自基因組編輯多肽、趨化因子、細胞因子、生長因子、抗體、酶、結構蛋白、血液蛋白、激素、轉錄因子或抗原的治療劑。
...【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】
1.一種用于冷凍脂質納米顆粒(lnp)的方法，所述lnp至少包含作為脂質組分的陽離子可電離脂質、中性脂質和類固醇或其酯，所述lnp至少包含核酸，其中所述方法包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的方法，其中噴霧的步驟b)用電磁液滴流發生器、壓電液滴流發生器、液壓液滴氣溶膠發生器、氣動噴嘴、超聲波噴嘴、熱液滴流發生器或電流體動力學液滴(ehd)發生器進行。
3.根據權利要求1或2中任一項所述的方法，其中冷凍的步驟c)通過用壓縮的二氧化碳將這些液滴噴霧到低溫氣氛中，噴霧到低溫液體上方的蒸氣中，噴霧到低溫液體中或噴霧到冷固體表面上來進行。
4.一種用于冷凍干燥脂質納米顆粒(lnp)的方法，所述方法至少包括以下步驟：
5.根據權利要求4所述的方法，其中干燥的步驟e)通過轉鼓真空凍干、冷空氣流常壓干燥、真空室凍干或真空隧道凍干進行。
6.根據權利要求1至5中任一項所述的方法，其中這些lnp包含：
7.根據權利要求1至6中任一項所述的方法，其中
8.根據權利要求1或7所述的方法，其中這些lnp進一步包含作為脂質組分的至少一種peg脂質。
9.根據權利要求8所述的方法，其中這些lnp包含0.5％至15％，或0.5％至10％，或0.8％至5％，或1％至3％，或1.5％至2％的所述peg脂質，以相對于所述lnp的脂質組分的總重量的w/w％計。
10.根據權利要求8或9所述的方法，其中該peg脂質選自由以下組成的組：peg-dag；dmg-peg-2000；peg-pe；peg-s-dag；peg-s-dmg；peg-cer；peg-二烷氧基丙基氨基甲酸酯；2-[(聚乙...
【專利技術屬性】
技術研發人員：F·佩拉爾，B·沃尼特，E·布特里，
申請(專利權)人：賽諾菲，
類型：發明
國別省市：
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