【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于生物分子，具體涉及到一種糖基化dna及其糖基化修飾方法和應用。
技術介紹
1、糖基化修飾可調控細胞內很多重要的生理功能，比如蛋白質正確折疊、運輸以及降解等都離不開糖基化的參與；細胞膜上的糖蛋白和糖脂在細胞之間的交流和信息傳遞過程中也扮演著不可或缺的角色。傳統的觀點認為蛋白質、脂類是糖基化修飾的主要目標分子，最近研究發現核糖酸(rna)也能作為糖基化修飾的目標分子，細胞表面核糖酸的糖基化導致它們與免疫細胞受體的直接相互作用。
2、蛋白質是細胞的基本工作單元，它具有所有細胞功能。基因dna中堿基的特定序列決定了蛋白質中氨基酸的順序。反過來，該序列決定了蛋白質的結構和功能。dna修飾可以顯著影響蛋白質的合成和功能，而無需直接更改dna代碼本身。這些修飾起著調節層的作用，影響了細胞如何訪問和利用遺傳指令。緊密填充的dna可以通過一些修改出現松動，從而使細胞內分子機器(molecule?machinery)更容易進入特定基因。另外，對dna或其包裝蛋白(組蛋白)的化學修飾可以作為基因開/關開關的作用。例如，dna乙酰化松動組蛋白，使dna更容易用于轉錄，從而導致蛋白質合成增加。相反，某些修飾可以直接阻斷rna聚合酶，從而完全抑制dna轉錄和蛋白質合成。雖然目前dna甲基化和乙酰化的研究已經十分深入，但dna糖基化(添加聚糖分子)在蛋白質合成和功能中的作用還沒有探索。
技術實現思路
1、本部分的目的在于概述本專利技術的實施例的一些方面以及簡要介紹一些較佳實施例。在本部
2、鑒于上述和/或現有技術中存在的問題，提出了本專利技術。
3、因此，本專利技術的目的是，克服現有技術中的不足，提供一種糖基化dna。
4、為解決上述技術問題，本專利技術提供了如下技術方案：所述糖基化dna由dna通過糖苷酶、二硫蘇糖醇或酸性緩沖液水解得到。
5、作為本專利技術所述糖基化dna的一種優選方案，其中：所述dna的糖基化類型包括n-糖基化、o-糖基化、o-glcnac-糖基化、c-糖基化、s-糖基化和糖化。
6、本專利技術的再一目的是，提供一種糖基化dna的修飾方法。
7、為解決上述技術問題，本專利技術提供了如下技術方案：包括，
8、提取得到的組織dna溶解于新配置的20～25mm碳酸氫銨緩沖液，振蕩確保充分溶解，得到dna溶液，向dna溶液中加入0.5～0.6μl糖苷酶，37℃孵育2～4小時，得到樣本溶液；
9、樣本溶液加到預處理的多孔石墨化碳柱，過濾液保留并再次加入多孔石墨化碳柱，用去離子水沖洗多孔石墨化碳柱4～6遍，將樣本中的鹽去除，再用0.2～0.4ml?50％乙腈將樣本從多孔石墨化碳柱洗脫，重復該步驟；
10、得到的樣本真空干燥，即得到糖基化dna。
11、作為本專利技術所述糖基化dna的制備方法的一種優選方案，其中：所述組織dna的提取方法包括，采用rnase酶和trypsin酶處理待提取樣本。
12、作為本專利技術所述糖基化dna的制備方法的一種優選方案，其中：所述組織dna為純dna，不含rna或蛋白質。
13、作為本專利技術所述糖基化dna的制備方法的一種優選方案，其中：所述糖苷酶包括n-糖苷酶、o-糖苷酶、o-glcnacase、二硫蘇糖醇。
14、作為本專利技術所述糖基化dna的制備方法的一種優選方案，其中：所述dna的糖基化修飾方法還包括，在酸性條件下通過化學法水解。
15、作為本專利技術所述糖基化dna的制備方法的一種優選方案，其中：
16、本專利技術的再一目的是，提供一種糖基化dna在作為生物標志物中的應用。
17、本專利技術的再一目的是，提供糖基化dna在藥物靶標識別中的應用。
18、本專利技術的再一目的是，提供一種包含糖基化dna以及藥學上可接受的載體的藥物組合物。
19、本專利技術有益效果：
20、(1)本申請研究首次發現dna本身存在糖基化(glycodna?or?gdna)，通過糖苷酶對提取到的dna進行酶解處理，即獲得對應糖基化修飾的dna，打破了以往只有蛋白質、脂質和rna能夠作為糖基化修飾目標分子的技術偏見。
21、(2)通過鑒定dna的糖基化可以揭示一種全新的細胞調控機制，有利于更深入的了解基因的打開和關閉方式，從而影響發育生物學和基因療法領域的研究，對于發育生物學和基因療法領域具有重要意義，包括，通過驗證dna糖基化與特定疾病之間的關系可以使用新的鑒定技術來更準確的診斷疾病，并通過解析糖基化如何改變基因表達來開發針對該修飾進行治療的新藥；通過識別個體中的dna糖基化模式可以允許更多個性化的藥物，這可能導致更有效和有針對性的療法；此外，鑒定dna糖基化還可能會導致全新的研究領域的突破。
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1.一種糖基化DNA，其特征在于：由DNA通過糖苷酶、二硫蘇糖醇或酸性緩沖液水解得到。
2.如權利要求1所述的糖基化DNA，其特征在于：所述DNA的糖基化類型包括N-糖基化、O-糖基化、O-GlcNAc-糖基化、C-糖基化、S-糖基化和糖化。
3.一種DNA的糖基化修飾方法，其特征在于：包括，
4.如權利要求3所述的DNA的糖基化修飾方法，其特征在于：所述組織DNA的提取方法包括，采用RNase酶和trypsin酶處理待提取樣本。
5.如權利要求3或4任一所述的DNA的糖基化修飾方法，其特征在于：所述組織DNA為純DNA，不含RNA或蛋白質。
6.如權利要求3所述的DNA的糖基化修飾方法，其特征在于：所述糖苷酶包括N-糖苷酶、O-糖苷酶、O-GlcNAcase、二硫蘇糖醇。
7.如權利要求3所述的DNA的糖基化修飾方法，其特征在于：所述DNA的糖基化修飾方法還包括，在酸性條件下通過化學法水解。
8.如權利要求1所述的糖基化DNA在作為生物標志物中的應用。
9.如權利要求1所述的糖基化D
10.一種藥物組合物，其特征在于：包含權利要求1所述的糖基化DNA以及藥學上可接受的載體。
...【技術特征摘要】
1.一種糖基化dna，其特征在于：由dna通過糖苷酶、二硫蘇糖醇或酸性緩沖液水解得到。
2.如權利要求1所述的糖基化dna，其特征在于：所述dna的糖基化類型包括n-糖基化、o-糖基化、o-glcnac-糖基化、c-糖基化、s-糖基化和糖化。
3.一種dna的糖基化修飾方法，其特征在于：包括，
4.如權利要求3所述的dna的糖基化修飾方法，其特征在于：所述組織dna的提取方法包括，采用rnase酶和trypsin酶處理待提取樣本。
5.如權利要求3或4任一所述的dna的糖基化修飾方法，其特征在于：所述組織dna...
【專利技術屬性】
技術研發人員：徐龍江，楊霜，肖晟，
申請(專利權)人：蘇州大學附屬第二醫院，
類型：發明
國別省市：
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