【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及電化學生物傳感器領域，具體涉及基于dna框架納米機器的血清素電化學傳感器的構建方法、構建結構及應用。
技術介紹
1、血清素是一種重要的信號分子，在大腦中作為一種神經遞質，對于人體的多項活動以及情緒具有非常重要的調節作用。血清素水平失衡與抑郁癥、成癮性和多種腫瘤的發生相關。因此，檢測血清素的含量變化對臨床診斷和醫學研究具有重要意義。測量血清素的傳統方法往往依賴于其化學結構、氧化還原活性和光學性質，這些方法需要專業昂貴的儀器設備，且存在特異性弱的問題。近年來，隨著分子探針的發展，可以利用探針與血清素的相互作用進行血清素的檢測，包括適配體、基因編碼的蛋白質和有機分子。其中，適配體是通過體外篩選實驗合成的寡核苷酸，具有較高的親和力、強的選擇性、易于合成等優點。因此，適配體傳感器是檢測血清素的有效工具。
2、熵驅動dna回路作為一種簡單而有效的放大策略，具有高效的催化能力、信號放大能力和易于編程等優點，已被廣泛應用于分子檢測和邏輯門構建的研究。與其他放大方法相比，熵驅動dna回路有效地降低了非特異性反應概率，具有較高的信噪比。然而，多數熵驅動dna回路是由溶液中的幾個自由擴散的dna組件組成，分子碰撞概率較小，反應效率降低。為了解決這個問題，該專利技術通過dna自組裝制備納米三棱柱(dtp)，以dtp負載熵驅動回路的反應物，提高反應效率，構建適配體傳感器，進行血清素的循環放大檢測。
技術實現思路
1、本專利技術所要解決的技術問題是提供一種基于dna框架納米機器的血清
2、為解決上述技術問題，本專利技術的技術方案為：基于dna框架納米機器的血清素電化學傳感器，其創新點在于：所述基于dna框架納米機器的血清素電化學傳感器包括以下步驟：
3、步驟s1：首先進行金電極的打磨和電化學處理，將固定探針ip修飾到金電極aue表面，并用巰基己醇mch進行封閉得到mch/ip/aue；
4、其中，所述ip的序列為5’-cgctcttctatattgtttttt-sh-(ch2)6-3’；
5、步驟s2：利用水熱法制備mof材料，在mof表面修飾上信號探針sp，得到sp-mof；
6、其中，所述sp的序列為5’-ccctacgcatcgaatcttttttttt-cooh-3’；
7、步驟s3：將dna單鏈s1、s2、s3混合退火得到dtp，接著將aptamer/bp、sp-mof、ap、fp、s1d、s3u、s3d自組裝到dtp結構中，得到dtp/(aptamer/bp+(sp-mof)-ap+fp)；
8、其中，所述s1的序列為5’-ctctattcacgtctattttttcatgagtcagggcgacgacatgagtcagggcttttgagatacacaaggtgagcacgagatacacaaggtttttgtttagagccaatgtccagtttagagccaattttttgagtccctctgagtcc-3’；所述s2的序列為5’-gaagctgattcgatgcgtagggcgctcttctatattgttttaatagacgtgaatagagggactcagagggactcattttaaagccgtagaacgaacgaaagccgtagaacttttagtcttctgtttggactggtgactagtcgtttgg-3’；所述s3的序列為5’-ctcaccttgtgtatctcttttacgaagcatacgaatctcacgaagcatacgattttccaaacgactagtcaccagtccaaacagaagactttttctcctaagatgccgtgtcctcctaagatgccttttaccttgtgtatctcgtg-3’；所述aptamer的序列為5’-cgactggtaggcagataggggaagctgattcgatgcgtgggtcggccctgactcatgtcgtcgccctgactcatg-3’；所述bp的序列為5’-acgcatcgaatcagcttc-3’；所述ap的序列為5’-caatatagaagagcg-3’；所述fp的序列為5’-gttctac?ggctttcgttcgttctacggctttttttttcaatatagaagagcgccctacgcatcgaatc-3’；所述s1d的序列為5’-attggctctaaactggacattggctctaaac-3’；所述s3u的序列為5’-tcgtatgcttcgtgagattcgtatgcttcgt-3’；所述s3d的序列為5’-ggcatcttaggaggacacggcatcttaggag-3’；
9、步驟s4：將不同濃度的血清素與dtp/(aptamer/bp+(sp-mof)-ap+fp)混合，轉移至mch/ip/aue表面反應，隨后進行mof的電化學轉化。
10、優選的，所述步驟s1中制備傳感界面的操作為，首先用三氧化鋁粉末打磨金電極，將電極置于稀硫酸溶液中進行循環伏安掃描，用氮氣吹干后將固定探針ip與三(2-羧乙基)膦反應60分鐘，滴加至電極表面避光反應12小時，沖洗過后再將巰基己醇mch滴加到電極上封閉30分鐘，即得到mch/ip/aue。
11、優選的，所述步驟s2的實驗操作為，將三價鐵的水溶液(如，三氯化鐵溶液)與表面活性劑pluronic?f127混合，依次加入乙酸和對苯二甲酸攪拌2小時，隨后將其轉移至聚四氟乙烯反應釜中置于110℃高溫下反應24小時，離心烘干后將得到的mof與1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(edc)、n-羥基琥珀酰亞胺(nhs)和sp混合反應5小時，從而得到sp-mof。
12、優選的，所述步驟s3的實驗操作為，將dna單鏈s1、s2、s3等摩爾混合，置于95℃加熱10分鐘，接著以1℃/分鐘的速度降溫至室溫，得到dtp結構，隨后將其與aptamer/bp、sp-mof、ap、s1d、s3u、s3d等比例混合置于室溫下攪拌1小時，再加入等摩爾的fp置于室溫下攪拌1小時，得到dtp/(aptamer/bp+(sp-mof)-ap+fp)。
13、優選的，所述步驟s4的實驗操作為，將dtp/(aptamer/bp+(sp-mof)-ap+fp)與不同濃度的血清素混合，轉移至mch/ip/aue表面室溫下反應30分鐘，接著將電極置于k3fe(cn)6溶液中，施加1.6v的電壓產生fe3+，接著于0v的電壓下反應產生普魯士白pw，經氧氣氧化后，在電極表面獲得普魯士藍pb。
14、基于dna框架納米機器的血清素電化學傳感器的構建結構，應用所述的基于dna框架納米機器的血清素電化學傳感器的構建方法，所述基于dna框架納米本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.基于DNA框架納米機器的血清素電化學傳感器，其特征在于：所述基于DNA框架納米機器的血清素電化學傳感器包括以下步驟：
2.如權利要求1所述的基于DNA框架納米機器的血清素電化學傳感器，其特征在于：所述步驟S1中制備傳感界面的操作為，首先用三氧化鋁粉末打磨金電極，將電極置于稀硫酸溶液中進行循環伏安掃描，用氮氣吹干后將固定探針IP與三(2-羧乙基)膦反應60分鐘，滴加至電極表面避光反應12小時，沖洗過后再將巰基己醇MCH滴加到電極上封閉30分鐘，即得到MCH/IP/AuE。
3.如權利要求1所述的基于DNA框架納米機器的血清素電化學傳感器，其特征在于：所述步驟S2的實驗操作為，將三價鐵的水溶液(如，三氯化鐵溶液)與表面活性劑PluronicF127混合，依次加入乙酸和對苯二甲酸攪拌2小時，隨后將其轉移至聚四氟乙烯反應釜中置于110℃高溫下反應24小時，離心烘干后將得到的MOF與1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)、N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)和SP混合反應5小時，從而得到SP-MOF。
4.如權利要求1所述的基于DNA框架
5.如權利要求1所述的基于DNA框架納米機器的血清素電化學傳感器，其特征在于：所述步驟S4的實驗操作為，將DTP/(Aptamer/BP+(SP-MOF)-AP+FP)與不同濃度的血清素混合，轉移至MCH/IP/AuE表面室溫下反應30分鐘，接著將電極置于K3Fe(CN)6溶液中，施加1.6V的電壓產生Fe3+，接著于0V的電壓下反應產生普魯士白PW，經氧氣氧化后，在電極表面獲得普魯士藍PB。
6.基于DNA框架納米機器的血清素電化學傳感器的構建結構，應用如權利要求1至5其中任何一項所述的基于DNA框架納米機器的血清素電化學傳感器，其特征在于：所述基于DNA框架納米機器的血清素電化學傳感器的構建結構為采用基于DNA框架納米機器的血清素電化學傳感器的構建方法得到的電化學傳感器。
7.基于DNA框架納米機器的血清素電化學傳感器的應用，采用如權利要求6所述的基于DNA框架納米機器的血清素電化學傳感器的構建結構，其特征在于：所述基于DNA框架納米機器的血清素電化學傳感器的應用為所述電化學傳感器在檢測血清樣品中血清素含量方面的應用。
...【技術特征摘要】
1.基于dna框架納米機器的血清素電化學傳感器，其特征在于：所述基于dna框架納米機器的血清素電化學傳感器包括以下步驟：
2.如權利要求1所述的基于dna框架納米機器的血清素電化學傳感器，其特征在于：所述步驟s1中制備傳感界面的操作為，首先用三氧化鋁粉末打磨金電極，將電極置于稀硫酸溶液中進行循環伏安掃描，用氮氣吹干后將固定探針ip與三(2-羧乙基)膦反應60分鐘，滴加至電極表面避光反應12小時，沖洗過后再將巰基己醇mch滴加到電極上封閉30分鐘，即得到mch/ip/aue。
3.如權利要求1所述的基于dna框架納米機器的血清素電化學傳感器，其特征在于：所述步驟s2的實驗操作為，將三價鐵的水溶液(如，三氯化鐵溶液)與表面活性劑pluronicf127混合，依次加入乙酸和對苯二甲酸攪拌2小時，隨后將其轉移至聚四氟乙烯反應釜中置于110℃高溫下反應24小時，離心烘干后將得到的mof與1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(edc)、n-羥基琥珀酰亞胺(nhs)和sp混合反應5小時，從而得到sp-mof。
4.如權利要求1所述的基于dna框架納米機器的血清素電化學傳感器，其特征在于：所述步驟s3的實驗操作為，將dna單鏈s1、s2、s3等摩爾混合，置于95℃加熱10分鐘，接著以1℃/分鐘的速度降溫至室溫，得到dtp結構，隨后將...
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