【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及食品安全領域，具體涉及一種氟尼辛葡甲胺單克隆抗體、檢測試紙條及其應用。
技術介紹
1、氟尼辛是一種動物專用的非甾體抗炎藥（nsaids），在獸醫臨床上常與增溶劑葡甲胺1:1結合形成穩定的葡甲胺鹽，即氟尼辛葡甲胺（fm）。氟尼辛葡甲胺于2008年在中國批準上市，被用于治療多種動物疾病，該藥物對于緩解馬的內臟及骨骼疼痛、牛乳房炎、豬乳房炎、子宮炎以及犬貓關節炎等疾病均有顯著的抗炎鎮痛效果。與其他同類藥物相比，氟尼辛葡甲胺具有給藥量小、吸收迅速、持續時間長、療效顯著、毒性小等優點。隨著氟尼辛葡甲胺在獸醫臨床上的廣泛應用，一方面為動物帶去了福音，另一方面，藥物殘留引起的不良反應也逐漸被人們熟知。
2、為了有效監督監測獸醫臨床上使用氟尼辛葡甲胺的情況，需要尋找一種特異性好、靈敏度高的測定方法，而目前檢測方法如薄層層析法、氣相色譜法、液相色譜法等，不僅需要各種儀器，成本高昂，還分離純化過程冗長，靈敏度低，加上干擾物多，難以獲得準確結果。因此建立快速簡便的氟尼辛葡甲胺檢測方法具有重要意義。酶聯免疫法（elisa）是一種極為高效、敏感、快速的檢測方法，檢測時對樣本的純度要求不高而且操作簡便，適用于大量樣本的現場快速檢測。建立高效的氟尼辛免疫學檢測方法，篩選高特異性的單克隆抗體是重中之重。
技術實現思路
1、為此，本專利技術提供了一種氟尼辛葡甲胺單克隆抗體、檢測試紙條及其應用。
2、為了實現上述目的，本專利技術實施例提供如下技術方案：
3、第一方面，
4、所述單克隆抗體的vh的氨基酸序列如seq?id?no.1所示；
5、所述單克隆抗體的vl的氨基酸序列如seq?id?no.3所示；
6、所述vh和vl均由互補決定區和框架區組成，所述互補決定區均由cdr1、cdr2和cdr3組成；
7、所述單克隆抗體的vh的cdr1的氨基酸序列如seq?id?no.5所示；
8、所述單克隆抗體的vh的cdr2的氨基酸序列如seq?i?dno.6所示；
9、所述單克隆抗體的vh的cdr3的氨基酸序列如seq?id?no.7所示；
10、所述單克隆抗體的vl的cdr1的氨基酸序列如seq?id?no.8所示；
11、所述單克隆抗體的vl的cdr2的氨基酸序列如seq?id?no.9所示；
12、所述單克隆抗體的vl的cdr3的氨基酸序列如seq?id?no.10所示。
13、第二方面，本專利技術提供上述氟尼辛葡甲胺單克隆抗體，其特征在于：
14、編碼所述單克隆抗體的vh的核苷酸序列如序列表中seq?id?no.2所示；
15、編碼所述單克隆抗體的vl的核苷酸序列如序列表中seq?id?no.4所示。
16、第三方面，本專利技術提供一種氟尼辛葡甲胺人工抗原的制備方法，其特征在于，包含以下步驟：
17、（a1）稱取氟尼辛葡甲胺溶于1ml?dmf中，充分攪拌混勻后加入nhs和edc，室溫攪拌過夜即得活化液；
18、（a2）次日，稱取ova溶0.01m?ph7.4的pbs中，再將活化液緩慢滴入稀釋后的ova緩沖液中，室溫反應2h后將溶液裝入透析袋中，并在4℃條件下用0.01m?pbs（ph7.4）進行透析，三次后即得到氟尼辛葡甲胺人工抗原。
19、第四方面，本專利技術提供上述的氟尼辛葡甲胺單克隆抗體在制備氟尼辛葡甲胺檢測制品中的應用。
20、第五方面，本專利技術提供一種氟尼辛葡甲胺檢測試紙條，其特征在于：t線包被上述氟尼辛葡甲胺人工抗原。
21、本專利技術的有益效果：
22、本專利技術提供了一種氟尼辛葡甲胺單克隆抗體及其應用，以應用于食品安全檢測中對氟尼辛的檢測，制備的單克隆抗體不僅特異性強、靈敏度高、穩定性好，還適用于進一步制備氟尼辛檢測制品。本專利技術提供的氟尼辛膠體金檢測試紙條具有靈敏度高、特異性強、成本低、操作簡單、檢測時間短、適合各種單位使用、儲存簡單、保質期長的優點，具有較高的實用價值和推廣價值。
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1.一種氟尼辛葡甲胺單克隆抗體，其特征在于：所述單克隆抗體含有名稱為VH的重鏈可變區和名稱為VL的輕鏈可變區；
2.根據權利要求1所述的氟尼辛葡甲胺單克隆抗體，其特征在于：
3.一種氟尼辛葡甲胺人工抗原的制備方法，其特征在于，包含以下步驟：
4.根據權利要求1-2任一所述的氟尼辛葡甲胺單克隆抗體在制備氟尼辛葡甲胺檢測制品中的應用。
5.一種氟尼辛葡甲胺檢測試紙條，其特征在于：T線包被權利要求3所述的氟尼辛葡甲胺人工抗原。
【技術特征摘要】
1.一種氟尼辛葡甲胺單克隆抗體，其特征在于：所述單克隆抗體含有名稱為vh的重鏈可變區和名稱為vl的輕鏈可變區；
2.根據權利要求1所述的氟尼辛葡甲胺單克隆抗體，其特征在于：
3.一種氟尼辛葡甲胺人工抗原的制備方法...
【專利技術屬性】
技術研發人員：梁斌，杜錦然，趙松，孫雅麗，鞏玉潔，趙榮茂，李德元，
申請(專利權)人：北京納百生物科技有限公司，
類型：發明
國別省市：
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