【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及眼科材料制備，具體涉及一種脫細胞羊膜材料及其制備方法與在制備眼表修復材料中的應用。
技術介紹
1、羊膜是單層上皮細胞互相連接構成的薄膜；是胎膜最內一層，是一層半透明的薄膜，與覆蓋在胎盤、臍帶的羊膜層相連接。在眼科臨床中，羊膜可以作為一種生物材料用于治療眼表損傷；具有重要的應用價值。
2、如中國專利技術專利cn202210366231.9公開了一種脫細胞凍干羊膜產品的制備工藝，通過對胎盤剝離、分型，對羊膜進行化學處理、清洗、脫細胞、再清洗、冷凍干燥、切割成型、內包裝、輻照滅菌、外包成品的工藝，針對有絨毛層和無絨毛層兩種羊膜型號，能夠有效進行脫細胞，且充分考慮到羊膜透明、體積小等不易于換液以及冷凍干燥后尺寸難精準控制的關鍵點，合理規劃生產工藝，提高羊膜的成品率，促進羊膜產業發展。
3、然而，專利技術人在研究中發現，參照上述方法制備得到的脫細胞羊膜材料，其促進細胞增殖作用不強，將其用于眼表損傷修復時，修復的周期較長，有待進一步提高。
技術實現思路
1、為了解決現有技術中存在的至少之一的技術問題，本專利技術提供了一種脫細胞羊膜材料及其制備方法與在制備眼表修復材料中的應用。
2、本專利技術解決上述技術問題的技術方案如下：
3、本專利技術首先提供了一種脫細胞羊膜材料的制備方法，其包含如下步驟：
4、(1)取胎盤，將羊膜從胎盤上進行分離，接著用細胞刮匙去除羊膜表面多余的組織，得無絨毛層羊膜；
5、(2)將經過步
6、(3)將清洗后的無絨毛層羊膜放入脫細胞試劑中進行脫細胞處理，得脫細胞羊膜；
7、(4)將脫細胞羊膜進行清洗，接著放入含天然提取物的乙醇溶液中進行浸泡處理；
8、(5)取出經步驟(4)處理過的脫細胞羊膜，再經干燥、剪切以及輻照滅菌后，得所述的脫細胞羊膜材料。
9、本專利技術提供了一種全新的脫細胞羊膜材料的制備方法；研究表明，在本專利技術所述的制備方法中，通過將脫細胞羊膜進行天然提取物浸泡處理制備得到的脫細胞羊膜材料，其具有較好的促進細胞增殖作用。
10、優選地，步驟(1)所述的胎盤在分離羊膜處理前，進行病原體篩查。
11、優選地，步驟(2)中所述的清洗，是指用含青霉素的生理鹽水進行清洗。
12、優選地，所述的含青霉素的生理鹽水中青霉素的濃度為0.1～0.3mg/ml。
13、最優選地，所述的含青霉素的生理鹽水中青霉素的濃度為0.2mg/ml。
14、優選地，步驟(3)中所述的脫細胞試劑是指含有triton?x-100以及脫氧膽酸鈉的水溶液。
15、優選地，脫細胞試劑中triton?x-100的含量為0.1～1g/ml；脫氧膽酸鈉的含量為0.1～1g/ml；
16、最優選地，脫細胞試劑中triton?x-100的含量為0.5g/ml；脫氧膽酸鈉的含量為0.5g/ml。
17、優選地，步驟(4)含天然提取物的水溶液中的天然提取物通過如下方法制備得到：
18、藏紅花和靈芝粉碎后用有機溶劑進行提取，提取結束后取提取液，濃縮干燥后得藏紅花-靈芝有機溶劑提取物；
19、取藏紅花-靈芝有機溶劑提取物即得所述的天然提取物。
20、優選地，所述的有機溶劑為丙酮。
21、優選地，藏紅花和靈芝的重量比為4～6:1～3。
22、最優選地，藏紅花和靈芝的重量比為5:2。
23、優選地，中藥藏紅花和靈芝的總重量與有機溶劑的用量比為1kg:8～12l。
24、最優選地，中藥藏紅花和靈芝的總重量與有機溶劑的用量比為1kg:10l。
25、優選地，所述的天然提取物的制備方法具體還包括如下步驟：
26、取藏紅花-靈芝有機溶劑提取物，上大孔樹脂柱；先用體積分數為26～29％的乙醇水溶液洗脫去除雜質；接著再用體積分數為41～43％的乙醇水溶液洗脫，收集體積分數為41～43％的乙醇水溶液洗脫下來的洗脫液，濃縮干燥后即得所述的天然提取物。
27、最優選地，所述的促進組織再生物質的制備方法具體還包括如下步驟：
28、取藏紅花-靈芝有機溶劑提取物，上大孔樹脂柱；先用體積分數為28％的乙醇水溶液洗脫去除雜質；接著再用體積分數為42％的乙醇水溶液洗脫，收集體積分數為42％的乙醇水溶液洗脫下來的洗脫液，濃縮干燥后即得所述的天然提取物。
29、在本專利技術所述制備方法中，將脫細胞羊膜采用將藏紅花-靈芝有機溶劑提取物物進一步通過本專利技術上述大孔樹脂洗脫條件制備得到的天然提取物進行浸泡處理，相比于采用藏紅花-靈芝有機溶劑提取物作為天然提取物進行浸泡處理，可以大幅提高制備得到的脫細胞羊膜材料的促進細胞增殖作用。
30、此外，專利技術人在研究中還發現，本專利技術的大孔樹脂洗脫條件也十分關鍵；將脫細胞羊膜必須采用將藏紅花-靈芝有機溶劑提取物進一步通過本專利技術上述大孔樹脂洗脫條件制備得到的天然提取物進行浸泡處理，相比于采用藏紅花-靈芝有機溶劑提取物作為天然提取物進行浸泡處理，才能進一步大幅提高制備得到的脫細胞羊膜材料的促進細胞增殖作用；然而，采用將藏紅花-靈芝有機溶劑提取物物進一步通過其它大孔樹脂洗脫條件制備得到的天然提取物進行浸泡處理，并不能進一步大幅提高制備得到的脫細胞羊膜材料的促進細胞增殖作用。
31、優選地，驟(4)含天然提取物的乙醇溶液中天然提取物的質量分數為0.5～2％。
32、最優選地，驟(4)含天然提取物的乙醇溶液中天然提取物的質量分數為1％。
33、優選地，驟(4)含天然提取物的乙醇溶液中的乙醇溶液是指體積分數為75％的乙醇溶液。
34、優選地，步驟(4)中的浸泡處理的時間為3～6h。
35、最優選地，步驟(4)中的浸泡處理的時間為5h。
36、本專利技術還提供了一種上述制備方法制備得到的脫細胞羊膜材料。
37、本專利技術還提供了一種上述脫細胞羊膜材料在制備眼表修復材料中的應用。
38、有益效果：本專利技術提供了一種全新的脫細胞羊膜材料的制備方法；研究表明，在本專利技術所述的制備方法中，通過將脫細胞羊膜進行天然提取物浸泡處理制備得到的脫細胞羊膜材料，其具有較好的促進細胞增殖作用。因此，將本專利技術制備得到的脫細胞羊膜材料用于眼表損傷修復時，有助于縮短修復周期，具有重要的應用價值。
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1.一種脫細胞羊膜材料的制備方法，其特征在于，包含如下步驟：
2.根據權利要求1所述的脫細胞羊膜材料的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述的胎盤在分離羊膜處理前，進行病原體篩查。
3.根據權利要求1所述的脫細胞羊膜材料的制備方法，其特征在于，步驟(2)中所述的清洗，是指用含青霉素的生理鹽水進行清洗。
4.根據權利要求3所述的脫細胞羊膜材料的制備方法，其特征在于，所述的含青霉素的生理鹽水中青霉素的濃度為0.1～0.3mg/mL；
5.根據權利要求1所述的脫細胞羊膜材料的制備方法，其特征在于，步驟(3)中所述的脫細胞試劑是指含有Triton?X-100以及脫氧膽酸鈉的水溶液。
6.根據權利要求5所述的脫細胞羊膜材料的制備方法，其特征在于，脫細胞試劑中Triton?X-100的含量為0.1～1g/mL；脫氧膽酸鈉的含量為0.1～1g/mL；
7.根據權利要求1所述的脫細胞羊膜材料的制備方法，其特征在于，步驟(4)含天然提取物的水溶液中的天然提取物通過如下方法制備得到：
8.根據權利要求1所述的脫細胞羊膜
9.權利要求1～8任一項所述的制備方法制備得到的脫細胞羊膜材料。
10.權利要求9所述的脫細胞羊膜材料在制備眼表修復材料中的應用。
...【技術特征摘要】
1.一種脫細胞羊膜材料的制備方法，其特征在于，包含如下步驟：
2.根據權利要求1所述的脫細胞羊膜材料的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述的胎盤在分離羊膜處理前，進行病原體篩查。
3.根據權利要求1所述的脫細胞羊膜材料的制備方法，其特征在于，步驟(2)中所述的清洗，是指用含青霉素的生理鹽水進行清洗。
4.根據權利要求3所述的脫細胞羊膜材料的制備方法，其特征在于，所述的含青霉素的生理鹽水中青霉素的濃度為0.1～0.3mg/ml；
5.根據權利要求1所述的脫細胞羊膜材料的制備方法，其特征在于，步驟(3)中所述的脫細胞試劑是指含有triton?x-100以及脫氧膽酸鈉的水溶液...
【專利技術屬性】
技術研發人員：官習鵬，鐘杏霞，陳詩浩，曹昭昭，
申請(專利權)人：廣州悅清再生醫學科技有限公司，
類型：發明
國別省市：
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