【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及生物工程，特別是涉及靶向eb病毒的核酸適配體及其應(yīng)用。
技術(shù)介紹
1、epstein-barr(eb)病毒又被稱為人類皰疹病毒4型，是一種帶有包膜的雙鏈dna病毒，屬于人類γ皰疹病毒家族成員。其顆粒由核心蛋白、衣殼、殼皮、囊膜等四種結(jié)構(gòu)成分組成，其中核心蛋白緊密纏繞著病毒dna。eb病毒是最早被發(fā)現(xiàn)的人類腫瘤病毒，于1964年由epstein和barr首次從burkitt淋巴瘤細胞中成功分離。eb病毒感染在人群中非常普遍，全世界超過95％的人都曾感染eb病毒，一旦感染可終生潛伏。eb病毒是引起傳染性單核細胞增多癥的主要原因，是最早發(fā)現(xiàn)的人類腫瘤病毒，與鼻咽癌、胃癌等多種惡性腫瘤相關(guān)，給人類健康帶來了嚴重的威脅。eb病毒感染具有明顯的宿主選擇性，在體內(nèi)主要感染b淋巴細胞和上皮細胞，且eb病毒主要通過其表面多種包膜糖蛋白的不同搭配組合實現(xiàn)對人上皮細胞或者淋巴b細胞的感染。雖然研究者們對eb病毒具有一定了解，然而，迄今仍沒有針對eb病毒的有效疫苗和特異性抗病毒藥物上市，同時也缺乏特異性的靶向治療手段來治療eb病毒感染的相關(guān)疾病。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、針對上述問題，本專利技術(shù)提供一種靶向eb病毒的核酸適配體，該適配體能夠通過與ghgl蛋白特異性結(jié)合靶向eb病毒，且與ghgl蛋白具有較強的結(jié)合力、親和力，能夠用于eb病毒的診斷及治療、分子成像、藥物遞送等方面。
2、為了達到上述目的，本專利技術(shù)提供了一種靶向eb病毒的核酸適配體，該核酸適配體包括靶向序列，所述核酸適配體
3、該適配體能夠通過與ghgl蛋白特異性結(jié)合靶向eb病毒，且與ghgl蛋白具有較強的結(jié)合力、親和力，能夠用于eb病毒的診斷及治療、分子成像、藥物遞送等方面。
4、前期研究中發(fā)現(xiàn)糖蛋白ghgl在eb病毒感染人上皮細胞及淋巴b細胞的過程中都發(fā)揮著關(guān)鍵作用。同時，核酸適配體(aptamer)是通過指數(shù)富集的配基系統(tǒng)進化技術(shù)(systematic?evolution?of?ligands?by?exponential?enrichment,selex)從隨機文庫中篩選得到的單鏈核酸分子，核酸適配體具有復(fù)雜的三維莖環(huán)、發(fā)夾和假結(jié)結(jié)構(gòu)，可以通過氫鍵、范德華力、堿積堆積力和分子形狀互補的識別而結(jié)合靶標，獨特的二級或三級結(jié)構(gòu)與靶標進行特異性的結(jié)合。理論上，幾乎自然界中所有的物質(zhì)都可以作為核酸適配體的靶標，如氨基酸、核苷酸和抗生素等多種小分子物質(zhì)，也包括大分子物質(zhì)蛋白質(zhì)、組織細胞以及病原體如病毒和細菌。由于核酸適配體可以對靶標進行高特異性和高親和力的識別與結(jié)合，因此被稱為化學(xué)抗體或人工抗體。此外，核酸適配體與抗體相比，還具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性，方便修飾，成本低廉，被廣泛認為是抗體的替代品，因此核酸適配體的應(yīng)用也越來越廣泛在分子成像及靶向治療等多種領(lǐng)域有著良好的應(yīng)用前景。同時，考慮到ghgl蛋白作為eb病毒感染宿主細胞的關(guān)鍵蛋白分子，本專利技術(shù)人提出靶向eb病毒的ghgl蛋白篩選核酸適配體，并應(yīng)用于病毒檢測、分子成像或藥物遞送等方面，對深入理解eb病毒感染致病機理及預(yù)防和控制eb病毒感染具有重大意義，為我們在分子水平上深入理解人類皰疹病毒的感染過程以及預(yù)防eb病毒感染或靶向治療eb病毒相關(guān)疾病提供了有價值的信息和手段。
5、在其中一個實施例中，所述靶向序列包括seq?id?no.7或seq?no.9。
6、在其中一個實施例中，所述靶向序列選自seq?no.6或seq?no.8。
7、在其中一個實施例中，所述靶向序列為seq?no.6時，所述靶向序列的二級結(jié)構(gòu)如下所示：
8、
9、所述靶向序列為seq?no.8時，所述靶向序列的二級結(jié)構(gòu)如下所示：
10、
11、在其中一個實施例中，所述核酸適配體還包括標記物，所述標記物選自生物素、發(fā)光基團、酶中的至少1種。
12、本專利技術(shù)還提供了所述核酸適配體在制備用于檢測eb病毒的產(chǎn)品的應(yīng)用，所述應(yīng)用不包括在疾病診斷中的應(yīng)用。
13、本專利技術(shù)還提供了一種用于檢測eb病毒的試劑盒，包括所述核酸適配體。
14、在其中一個實施例中，所述核酸適配體還包括標記物，所述標記物選自生物素、發(fā)光基團、酶中的至少1種。
15、本專利技術(shù)還提供了一種非診斷目的的eb病毒檢測方法，包括以下步驟：將待測樣品與所述試劑盒中的核酸適配體進行孵育，洗滌，對所述標記物的標記信號進行檢測。
16、本專利技術(shù)還提供了所述核酸適配體在制備抗eb病毒藥物中的應(yīng)用。
17、本專利技術(shù)還提供了一種抗eb病毒藥物，包括藥物活性成分和載體，所述載體為所述核酸適配體。
18、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本專利技術(shù)具有以下有益效果：
19、本專利技術(shù)的靶向eb病毒的核酸適配體及其應(yīng)用，該適配體能夠通過與ghgl蛋白特異性結(jié)合靶向eb病毒，且與ghgl蛋白具有較強的結(jié)合力、親和力，能夠用于eb病毒的診斷及治療、分子成像、藥物遞送等方面。
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1.一種靶向EB病毒的核酸適配體，其特征在于，該核酸適配體包括靶向序列，所述核酸適配體與EB病毒的gHgL蛋白特異性結(jié)合。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的核酸適配體，其特征在于，所述靶向序列包括SEQ?ID?NO.7或SEQ?NO.9。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的核酸適配體，所述靶向序列選自SEQ?ID?NO.6或SEQ?ID?NO.8。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的核酸適配體，其特征在于，所述靶向序列為SEQ?ID?NO.6時，所述靶向序列的二級結(jié)構(gòu)如下所示：
5.權(quán)利要求1-4中任一項所述核酸適配體在制備用于檢測EB病毒的產(chǎn)品的應(yīng)用，所述應(yīng)用不包括在疾病診斷中的應(yīng)用。
6.一種用于檢測EB病毒的試劑盒，其特征在于，包括權(quán)利要求1-4中任一項所述的核酸適配體。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的試劑盒，其特征在于，所述核酸適配體還包括標記物，所述標記物選自生物素、發(fā)光基團、酶中的至少1種。
8.一種非診斷目的的EB病毒檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：將待測樣品與權(quán)利要求7所述試劑盒中的核酸適配體進行孵育，洗滌，對
9.權(quán)利要求1-4中任一項所述核酸適配體在制備抗EB病毒藥物中的應(yīng)用。
10.一種抗EB病毒藥物，其特征在于，包括藥物活性成分和載體，所述載體為權(quán)利要求1-4中任一項所述核酸適配體。
...【技術(shù)特征摘要】
1.一種靶向eb病毒的核酸適配體，其特征在于，該核酸適配體包括靶向序列，所述核酸適配體與eb病毒的ghgl蛋白特異性結(jié)合。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的核酸適配體，其特征在于，所述靶向序列包括seq?id?no.7或seq?no.9。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的核酸適配體，所述靶向序列選自seq?id?no.6或seq?id?no.8。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的核酸適配體，其特征在于，所述靶向序列為seq?id?no.6時，所述靶向序列的二級結(jié)構(gòu)如下所示：
5.權(quán)利要求1-4中任一項所述核酸適配體在制備用于檢測eb病毒的產(chǎn)品的應(yīng)用，所述應(yīng)用不包括在疾病診斷中的應(yīng)用。<...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：劉嘉昕，方智新，裘建香，閆修魁，龐澤芬，陳康虹，朱丹東，
申請(專利權(quán))人：廣東省第二人民醫(yī)院廣東省衛(wèi)生應(yīng)急醫(yī)院，
類型：發(fā)明
國別省市：
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