【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專(zhuān)利技術(shù)屬于真菌毒素降解和基因工程，具體涉及一株產(chǎn)嘔吐毒素降解酶的菌株和來(lái)源于該菌株的嘔吐毒素降解酶在嘔吐毒素降解中的應(yīng)用。
技術(shù)介紹
1、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol，don)，又名嘔吐毒素，是由禾谷鐮刀菌等真菌產(chǎn)生的有毒代謝產(chǎn)物，屬于b型單端孢霉烯族毒素。don污染普遍發(fā)生在小麥、玉米等谷類(lèi)作物及其制品中，對(duì)糧食和飼料產(chǎn)生的影響嚴(yán)重，造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。don對(duì)動(dòng)物機(jī)體具有多種毒性作用，可分為慢性毒性和急性毒性。動(dòng)物長(zhǎng)期食用低劑量don污染的飼料通常會(huì)導(dǎo)致厭食、生長(zhǎng)緩慢和免疫受損等癥狀，急性毒性則表現(xiàn)為腹瀉和嘔吐等。don能穿透血腦屏障，改變大腦激素水平，導(dǎo)致腦損傷和行為異常。此外，don還會(huì)引發(fā)免疫毒性，增加動(dòng)物感染疾病的風(fēng)險(xiǎn)。利用微生物和酶降解霉菌毒素具有特異性強(qiáng)，轉(zhuǎn)化效率高，不影響飼料營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，對(duì)適口性影響小和環(huán)保性等優(yōu)點(diǎn)，使其成為理想的脫毒方式。
2、綜上所述，don廣泛污染飼料及飼料原料，對(duì)畜禽養(yǎng)殖危害極大。基于微生物和酶降解的生物脫毒是don防控的高效方法。開(kāi)發(fā)具有高效降解活性的don脫毒酶制劑是減少飼料業(yè)和畜牧業(yè)經(jīng)濟(jì)損失的重要手段，具有重要應(yīng)用前景。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本專(zhuān)利技術(shù)的第一個(gè)目的是提供一株產(chǎn)don降解酶的roseobacteraceae科新屬細(xì)菌d-g18，該菌株可作為產(chǎn)don降解酶的供體。
2、本專(zhuān)利技術(shù)的第二個(gè)目的是提供d-g18在構(gòu)建don脫毒工程菌或培育don耐受轉(zhuǎn)基因植物中的應(yīng)用。
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4、本專(zhuān)利技術(shù)的第四個(gè)目的是提供一種含有g(shù)18-ddh編碼基因的載體。
5、本專(zhuān)利技術(shù)的第五個(gè)目的是提供含有g(shù)18-ddh編碼基因的重組菌株。
6、本專(zhuān)利技術(shù)通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：
7、本專(zhuān)利技術(shù)從湖泊沉積物中分離得到一株能夠產(chǎn)don降解酶的菌株d-g18。經(jīng)過(guò)16srrna和平均核苷酸一致性(ani)比較分析，鑒定d-g18為roseobacteraceae科的新屬菌株，命名為roseobacteraceae?gen.d-g18(以下簡(jiǎn)稱(chēng)d-g18)。該菌株已于2024年4月1日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏地址：廣州市先烈中路100號(hào)大院59號(hào)樓5樓，其保藏編號(hào)為gdmcc?no：64486。
8、本專(zhuān)利技術(shù)還提供了菌株d-g18在制備don降解酶制劑的應(yīng)用。
9、本專(zhuān)利技術(shù)還提供了來(lái)源于菌株d-g18的don降解酶g18-ddh。
10、本專(zhuān)利技術(shù)還提供了上述don降解酶g18-ddh的編碼基因，其核苷酸序列和氨基酸序列分別為seq?id?no.1和seq?id?no.2。
11、本專(zhuān)利技術(shù)還提供了含有上述編碼基因的重組表達(dá)載體。
12、本專(zhuān)利技術(shù)還提供了含有上述編碼基因的重組菌株或細(xì)胞。
13、本專(zhuān)利技術(shù)還提供了上述don降解酶g18-ddh在降解don中的應(yīng)用。
14、本專(zhuān)利技術(shù)還提供了菌株d-g18和don降解酶g18-ddh在制備飼料添加劑或食品添加劑的應(yīng)用。
15、在本專(zhuān)利技術(shù)的一些實(shí)施方式中，所述菌株為roseobacteraceae?gen.d-g18(d-g18)。
16、在本專(zhuān)利技術(shù)的一些實(shí)施方式中，所述載體為pet15b載體。
17、在本專(zhuān)利技術(shù)的一些實(shí)施方式中，所述重組菌可以是以大腸桿菌，芽孢桿菌，酵母為宿主構(gòu)建得到的。
18、在本專(zhuān)利技術(shù)的一些實(shí)施方式中，g18-ddh降解don時(shí)，孵育溫度為10-50℃，ph為4-12。
19、本專(zhuān)利技術(shù)具有以下有益效果：
20、本專(zhuān)利技術(shù)提供的產(chǎn)don降解酶菌株d-g18是roseobacteraceae科的一株新屬細(xì)菌，其編碼的don降解酶g18-ddh是一種全新的酶。g18-ddh具有較好的溫度和ph穩(wěn)定性，對(duì)don有較強(qiáng)的降解活性，降解能力強(qiáng)，有應(yīng)用于飼料和食品加工領(lǐng)域don脫毒制劑制備的潛力。
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1.一株產(chǎn)嘔吐毒素(DON)降解酶的Roseobacteraceae科新屬細(xì)菌D-G18(以下簡(jiǎn)稱(chēng)D-G18)，其特征在于，該菌株已于2024年4月1日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，其保藏編號(hào)為GDMCC?NO：64486。
2.菌株D-G18在降解DON中的應(yīng)用。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于D-G18在制備DON脫毒劑，DON脫毒酶和DON脫毒工程菌中的應(yīng)用。
4.一種來(lái)源于菌株D-G18的脫氫酶G18-DDH用于降解DON的應(yīng)用。其特征在于，具有：
5.一種包含根據(jù)權(quán)利要求4所述的核苷酸和氨基酸序列的重組表達(dá)載體，所述表達(dá)載體應(yīng)用于DON脫毒。
6.一種能降解DON的重組菌，其特征在于，所述重組菌表達(dá)權(quán)利要求4所述的脫氫酶。
7.一種DON生物降解劑，其特征在于，包括根據(jù)權(quán)利要求4所述的脫氫酶G18-DDH，以及生理上可接受的配伍載體。
【技術(shù)特征摘要】
1.一株產(chǎn)嘔吐毒素(don)降解酶的roseobacteraceae科新屬細(xì)菌d-g18(以下簡(jiǎn)稱(chēng)d-g18)，其特征在于，該菌株已于2024年4月1日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，其保藏編號(hào)為gdmcc?no：64486。
2.菌株d-g18在降解don中的應(yīng)用。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于d-g18在制備don脫毒劑，don脫毒酶和don脫毒工程菌中的應(yīng)用。
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【專(zhuān)利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：鄧詣群，國(guó)崇文，母培強(qiáng)，孫峪，文繼開(kāi)，陳慶梅，管璐，王籽驕，王澤元，
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)，
類(lèi)型：發(fā)明
國(guó)別省市：
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