【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及微生物領域，具體涉及類諾卡氏菌菌株yb-4及其降解嘔吐毒素的應用。
技術介紹
1、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（don，嘔吐毒素）是一種單端孢霉烯族毒素，普遍存在于生產食品和飼料的谷物中。雖然don是毒性最小的單端孢霉烯類物質之一，但它是谷物中非常常見的污染物。don在多種細胞系統和動物體中具有顯著的毒性。在細胞水平上，主要的毒性作用是通過與核糖體結合來抑制蛋白質合成。在動物體中，中度至低度攝入毒素可引起許多與發育能力和免疫功能下降，較高劑量則誘發嘔吐。don會改變大腦的神經化學物質，較高劑量的長期攝入會引起動物攝食行為的變化。豬對don比小鼠、家禽和反芻動物更敏感。目前，處理嘔吐毒素的一種有前途的方法是使用微生物進行生物解毒。據報道，從土壤、反芻動物、豬、家禽、魚類和其他農產品中選出的幾種好氧和厭氧微生物（ aspergillus? tubingensis、 devosia?sp.和 nocardioides?sp.等）顯示出不同的don轉化能力。
2、研究表明，don可以被微生物代謝為低毒性化合物。例如，?don在有氧條件下被從土壤樣品中分離的菌株降解為3-epi-don。雞腸道和牛瘤胃微生物也能夠通過去環氧化降解未dom-1。一些德沃斯氏菌被報道能夠降解嘔吐毒素降解菌株。這些菌株不能以don為唯一碳源進行利用，而僅能將其轉化為3-keto-don或3-epi-don。從德沃斯
技術實現思路
1、本專利技術的目的是提供一株用于降解嘔吐毒素的類諾卡氏菌菌株。
2、本專利技術的再一目的是利用所述類諾卡氏菌菌株制成的生物脫毒劑。
3、本專利技術的另一目的是提供制備上述生物脫毒劑的制備方法。
4、本專利技術的另一目的是提供上述類諾卡氏菌菌株的應用。
5、根據本申請的類諾卡氏菌（ nocardioides?sp.）菌株yb-4，其保藏編號為cgmccno.?30071。通過比對親緣模式菌株的形態學、分子生物學和生理生化特性，確定其為類諾卡氏屬（ nocardioides?sp.）中的一個新種。
6、根據本專利技術的生物脫毒劑，其包括作為活性成分的上述類諾卡氏菌（ nocardioides?sp.）菌株yb-4，或其細胞內溶物，例如胞內蛋白，該生物脫毒劑可以是液體劑型也可以是固體劑型，并通過現有技術中已公開的制備方法來制備。
7、根據本專利技術的制備上述生物脫毒劑的方法，包括以下步驟：
8、將本申請的類諾卡氏菌（ nocardioides?sp.）菌株yb-4活化，多級擴培發酵，當菌體處于穩定期時，收集發酵液，制備成液體型生物脫毒劑。
9、根據本專利技術的制備上述生物脫毒劑的方法，其中，該所述發酵液經自然沉降、離心、過濾等不影響菌體活性的方法濃縮后得到濃度較高的菌懸液；更優選地，所述菌懸液還可以加入營養液或營養液和保護劑的混合液，制備成液體型生物脫毒劑。進一步地，也可以利用本領域現有方法制備將該液體型生物脫毒劑制成固體型生物脫毒劑，例如加入吸附劑、保護劑等。
10、根據本專利技術的制備上述生物脫毒劑的方法，其中，所述方法還包括以下步驟：
11、將得到的濃度較高的菌懸液或菌體細胞，利用均質、超聲等現有的方法進行破碎，除去菌體細胞碎片等雜質后通過濃縮獲得濃度較高的蛋白液，制得液體型生物脫毒劑。
12、根據本專利技術的制備上述生物脫毒劑的方法，其中，多級擴培發酵所用的發酵培養基的配方：胰蛋白胨10g、酵母浸粉5g、氯化鈉10g，加蒸餾水至1l，ph7.0-7.2，121℃滅菌20min。
13、本專利技術的優點在于：
14、（1）本專利技術分離得到一株類諾卡氏菌（ nocardioides? sp.）菌株yb-4，該菌株為mdsbc?41菌株經誘變獲得的突變株，與mdsbc41相比，該菌株能夠將有毒化合物don完全降解，最終將其完全轉化為幾乎無毒的化合物3-epi-don，反應過程不可逆，反應條件溫和，不會引起二次污染。
15、（2）本專利技術提供的類諾卡氏菌（ nocardioides?sp.）菌株yb-4可用于制備各種don的生物脫毒制劑。
16、（3）本專利技術提供的菌株可應用于被don污染的土壤或水體等各種生態系統，達到生態體修復的目的。
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1.類諾卡氏菌（Nocardioides?sp.）菌株YB-4，其特征在于，所述類諾卡氏菌（Nocardioides?sp.）菌株YB-4的保藏編號為CGMCC?No.?30071。
2.一種生物脫毒劑，其特征在于，所述生物脫毒劑包括作為活性成分的權利要求1所述的類諾卡氏菌（Nocardioides?sp.）菌株YB-4，或其細胞內溶物。
3.一種制備權利要求2所述生物脫毒劑的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：
4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述方法進一步包括以下步驟：
5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，向所述高濃度菌懸液中加入營養液或營養液和保護劑的混合液，制備成液體型生物脫毒劑。
6.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，所述多級擴培發酵所用的發酵培養基的配方為：胰蛋白胨10g、酵母浸粉5g、氯化鈉10g，加蒸餾水至1L，pH7.0-7.2，121℃滅菌20min。
7.權利要求1所述的類諾卡氏菌（Nocardioides?sp.）菌株YB-4用于降解嘔吐毒素的應用。
【技術特征摘要】
1.類諾卡氏菌（nocardioides?sp.）菌株yb-4，其特征在于，所述類諾卡氏菌（nocardioides?sp.）菌株yb-4的保藏編號為cgmcc?no.?30071。
2.一種生物脫毒劑，其特征在于，所述生物脫毒劑包括作為活性成分的權利要求1所述的類諾卡氏菌（nocardioides?sp.）菌株yb-4，或其細胞內溶物。
3.一種制備權利要求2所述生物脫毒劑的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：
4.根據權利要求3所述的方法，其特...
【專利技術屬性】
技術研發人員：羅會穎，張宏海，秦星，黃火清，涂濤，王曉璐，田健，王亞茹，張杰，張紅蓮，柏映國，王苑，于會民，姚斌，
申請(專利權)人：中國農業科學院北京畜牧獸醫研究所，
類型：發明
國別省市：
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