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【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于水產養殖,具體涉及刺激菲牛蛭分泌唾液的方法,進而能夠從菲牛蛭唾液中提取更多的水蛭素及菲牛蛭素。
技術介紹
1、菲牛蛭( poecilobdella?manillensis?lesson),俗稱金邊螞蟥,是云南特色的藥用動物資源。云南省制定了《菲牛蛭凍干粉質量標準》(云ypbz-0199-2013),將其作為直接口服中藥飲片使用,具有破血通經、逐瘀消癥的功效。用于血瘀經閉、癥瘕痞塊、中風偏癱、跌打損傷,以及治療腦血栓、腦溢血、高黏血癥、高脂血癥、高血壓病、肺心病等。
2、現代醫學研究證明,水蛭素和菲牛蛭素是菲牛蛭發揮上述藥效的有效成分,其中水蛭素約由65-66個氨基酸分子組成,分子量約為7000d;菲牛蛭素則由60個左右氨基酸分子組成,分子量也為7000d,但二者僅有50%-60%的氨基酸殘基是相同的,但菲牛蛭素的抗凝活性則是水蛭素的10倍以上。菲牛蛭素和水蛭素可用于治療各種血栓性疾病,尤其是靜脈血栓和彌漫性血管內凝血的治療,也可用于外科手術后預防動脈血栓的形成,用于溶解血栓或預防血管再造后血栓的形成,改善體外血液循環和血液透析過程,可促進傷口愈合,在腫瘤治療中也能發揮作用。動物試驗和臨床研究表明,靜脈或皮下注射水蛭素均無明顯毒副作用,對血壓、心率、血相、出血時間和血液化學成分均不受影響,呼吸系統也沒有影響,無過敏反應,無特異抗體發現,且非常安全。加之水蛭素和菲牛蛭素還可以口服,給用藥帶來很大方便。水蛭素和菲牛蛭素性質比較穩定,胰蛋白酶和糜蛋白酶不破壞其活
3、由于水蛭素和菲牛蛭素具有極其重要的開發價值,而菲牛蛭的來源有限,使用菲牛蛭提取的天然水蛭素和菲牛蛭素價格昂貴,故國內外醫藥界均著重研究通過基因工程獲得重組水蛭素,目前上市的重組水蛭素類藥品有來匹盧定、比伐盧定等。相對于天然水蛭素和菲牛蛭素,重組水蛭素由于63位酪氨酸殘基未硫酸化,其對凝血酶的抑制常數比天然水蛭素和菲牛蛭素降低了90%以上,所以難以發揮溶栓效果;另一方面,存在容易引起出血的副作用,只能注射使用,半衰期短等缺陷。上述缺陷使其無法與天然水蛭素相比。因此,開發新的能夠有效降低天然水蛭素和菲牛蛭素提取成本的方法,可以獲得極大的社會效益和經濟效益。
4、水蛭素和菲牛蛭素是菲牛蛭唾液腺分泌的成分,所以,刺激菲牛蛭分泌唾液并從菲牛蛭唾液中提取水蛭素和菲牛蛭素,是一種有效的降低水蛭素和菲牛蛭素提取成本的方法。
5、在此背景下,申請人持續開展了從活體菲牛蛭中提取天然水蛭素的相關研究,得到了如下研究結論:
6、①使用臭氧刺激菲牛蛭分泌唾液的方法不可行,該方法菲牛蛭分泌的唾液量極少且活性較低。
7、②使用負壓刺激菲牛蛭分泌唾液的方法同樣不可行,該方法菲牛蛭分泌的唾液量較少且活性較低。
8、③使用電刺激法可有效促使菲牛蛭分泌唾液,但電壓較難控制,稍微偏高即可導致菲牛蛭吐血甚至致死,偏低則分泌唾液量極少,而且不論電壓高低菲牛蛭分泌的唾液水蛭素活性均較低。
9、④使用香辛料如辣椒、木姜子、生姜、花椒等的提取物溶液可有效促進菲牛蛭分泌唾液,但同樣存在分泌的唾液量較少,活性低等缺點,同時高濃度時可導致菲牛蛭吐血或死亡。
10、⑤使用中藥如常山、瓜蒂等的提取物溶液可促進菲牛蛭分泌唾液,但唾液中水蛭素含量偏低。
11、⑥使用酸味水果如李子、蘋果、楊梅、梅子、余甘子等的汁液則可以有效的促進菲牛蛭分泌唾液,其分泌的唾液量較多且活性高,同時實驗過程中未發生菲牛蛭吐血或死亡現象。
12、中國專利申請cn117362415a公開了一種菲牛蛭催吐液及其在規模化水蛭素提取中的應用,其采用韭菜提取物、黃芪提取物、銀杏葉提取物、八角蓮提取物來作為菲牛蛭催吐液,將新鮮韭菜、干黃芪、干銀杏葉或干八角蓮用水熬煮提取并稀釋后用作菲牛蛭催吐液。但其方法仍然較為繁瑣,并且提取水蛭素和菲牛蛭素的提取效率以及提取物的抗凝血酶活性仍然不高。
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于提供一種方法簡單、成本低、效率高、并可提高菲牛蛭唾液中水蛭素和菲牛蛭素含量的菲牛蛭唾液提取方法。
2、本專利技術采取的技術方案如下:
3、使用酸味水果提取菲牛蛭唾液的方法,是使用酸味水果的汁液喂食菲牛蛭,刺激菲牛蛭分泌唾液并進行提取。
4、所述使用酸味水果提取菲牛蛭唾液的方法,步驟如下:
5、1)取新鮮酸味水果,榨汁,汁液用水稀釋1-50倍備用;
6、2)取菲牛蛭,放入稀釋的酸味水果汁液中,持續10-60分鐘,刺激菲牛蛭分泌唾液;
7、3)收集菲牛蛭唾液即可。
8、較佳地,所述酸味水果為李子、蘋果、楊梅、梅子、余甘子中的一種或幾種。
9、上述酸味水果中含有蘋果酸、酒石酸、琥珀酸、齊墩果酸、沒食子酸、訶子酸等多種果酸,果酸的ph值為2-6。
10、本專利技術方法具有操作簡單、材料易得價廉、菲牛蛭唾液提取率高、菲牛蛭唾液中水蛭素和菲牛蛭素活性高、菲牛蛭無死亡可重復利用等顯著優點,可以極大的降低水蛭素和菲牛蛭素的提取成本。
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1.使用酸味水果提取菲牛蛭唾液的方法,其特征是,使用酸味水果的汁液喂食菲牛蛭,刺激菲牛蛭分泌唾液并進行提取。
2.如權利要求1所述的使用酸味水果提取菲牛蛭唾液的方法,其特征在于,方法步驟如下:
3.如權利要求1或2所述的使用酸味水果提取菲牛蛭唾液的方法,其特征在于,所述酸味水果為李子、蘋果、楊梅、梅子、余甘子等中的一種或幾種。
【技術特征摘要】
1.使用酸味水果提取菲牛蛭唾液的方法,其特征是,使用酸味水果的汁液喂食菲牛蛭,刺激菲牛蛭分泌唾液并進行提取。
2.如權利要求1所述的使用酸味水果提取菲牛蛭唾液的方法...
【專利技術屬性】
技術研發人員:溫先敏,楊緬南,孫靜濤,金韜,
申請(專利權)人:云南三江本草藥業有限公司,
類型:發明
國別省市:
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