【技術實現步驟摘要】
本申請涉及一種托匹司他中微量氮氧化物雜質的測定方法，屬于難溶制劑分析檢測。
技術介紹
1、托匹司他，英文名：topiroxostat，化學名稱：4-[5-(吡啶-4-基)-1h-1,2,4-三唑-3-基]吡啶-2-甲腈，cas號：577778-58-6，是一種由日本富士藥品株式會社研究開發的非嘌呤型選擇性黃嘌呤氧化還原抑制劑，應用于痛風和高尿酸血癥。在托匹司他的制備過程中可能產生bdm并存在殘留。
2、
3、按ich-m7指南分類標準，bdm為具有警示結構的3類雜質。ich-m7要求對這類雜質采取充分的控制措施，確保該類雜質不超過可接受限度(適宜的ttc)；或者對該類雜質單獨進行細菌致突變試驗。托匹司他的每日最大使用劑量為160mg，根據ich-m7，基于ttc計算可接受攝入量，單個致突變雜質每人每天攝入1.5ug時，其風險認為是可以忽略的(終生暴露情況下理論患癌風險小于十萬分之一)，因此托匹司他中氮氧雜質bdm的限度為9.3ppm。
4、cn115308347a公開了一種托吡司特中氮氧化物雜質的分析方法，其采用液質聯用儀對托匹司他中的氮氧化物雜質f進行檢測，但并未對氮氧化物雜質bdm進行檢測。同時，該方法采用昂貴的三重四極桿液質色譜儀進行檢測，無法在普通分析實驗室進行推廣重復。在供試品的制備中，我們還發現，由于托匹司他水溶性及在各溶劑中溶解情況均不理想，供試品沒有完全溶解，這導致超聲提取雜質時，存在雜質沒有完全提取的風險。
技術實現思路
1、有
2、具體地，本申請是通過以下方案實現的：
3、一種托匹司他中微量氮氧化物雜質的測定方法，步驟如下：
4、步驟一，樣品處理：向待檢測阿托匹他中加入dmso，加熱并全部溶解后，冷卻至室溫，加入甲醇水溶液，搖勻，過濾，
5、步驟二，以耐酸性色譜柱進行梯度分離測定：
6、填充劑為十八烷基硅烷鍵合硅膠，
7、流動相由流動相a和流動相b組成，所述流動相a由二水合磷酸二氫鈉及磷酸組成，其二水合磷酸二氫鈉0.02m，流動相a的ph值為3.8～4.2；流動相b為甲醇，
8、流動相進行梯度洗脫，流速為0.9～1.1ml/min，柱溫為32～38℃，洗脫條件為：
9、 時間，min 0 10 13 20 21 30 流動相b，％ 15 20 80 80 15 15
10、。
11、本申請步驟一所提供的溶解體系中，托匹司他在dmso中具有較高的溶解度，氮氧化物雜質bdm在一定比例的甲醇水中具有良好的峰型，基于該特點，我們先用一定量的dmso加熱溶解樣品，再加入一定比例的甲醇水溶液改善bdm峰型的方法，而后采用高效液相色譜法，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為色譜柱的填充劑，所形成的色譜柱為耐酸性色譜柱，以一定比例的二水合磷酸二氫鈉溶液-有機相為流動相進行梯度洗脫，從而進行有效研究并控制bdm的殘留量，該方法具有測試靈敏、結果準確可靠與重現性好等優點。
12、進一步的，作為優選：
13、步驟一中，
14、加熱至80℃。
15、所述dmso、甲醇、水的質量比為50:10:40，此時，甲醇水溶液的質量濃度為20％。dmso、甲醇、水形成dmso-甲醇-水溶解體系。
16、步驟二中：
17、所述柱溫為35℃。
18、所述流速為1.0ml/min。
19、所述流動相a的ph值為4.0，其ph可以采用磷酸調節。
20、檢測波長為280nm。
21、耐酸性色譜柱的規格為：長度250mm，內徑4.6mm，填料粒徑5μm。
22、樣品檢測限度為0.46ppm。
23、上述氮氧化物雜質的結構式為：
24、本專利技術采用常見的液相色譜儀作為分析工具，可在普通的液相色譜儀下即可完成對低含量的基因毒性雜質bdm進行準確的殘留量測定，具有檢測儀器常見、檢測成本低等優點。同時，所提供的供試品的溶解方法，實現了高濃度供試品溶液的獲取，并兼顧樣品溶解和色譜峰峰型控制兩方面，系統適用性穩定，具有靈敏度高、方法準確度高、耐用性好等優點。
25、上述方案應用于高效液相色譜法測定托匹司他中氮氧化物雜質含量，優點可以概括如下：
26、1、本專利技術很好的解決了托匹司他中n-氧化物檢測的技術空白，該雜質為托匹司他的氧化雜質，是藥物潛在的降解雜質，可作為常規方法進行托匹司他的日常質量控制。
27、2、本專利技術通過分析實驗室中最常見的液相色譜儀即可進行相關檢測，使用的試劑和色譜柱簡單易得，無需使用貴重的液質色譜等技術。
28、3、本專利技術解決了托匹司他供試品難溶解而無法大濃度配制，從而影響方法靈敏度的難題，通過優化溶解方法，同時兼顧了樣品完全溶解及色譜峰型兩方面的問題。
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1.一種托匹司他中微量氮氧化物雜質的測定方法，其特征在于，步驟如下：
2.根據權利要求1所述的一種托匹司他中微量氮氧化物雜質的測定方法，其特征在于：所述DMSO、甲醇、水的質量比為50:10:40。
3.根據權利要求1所述的一種托匹司他中微量氮氧化物雜質的測定方法，其特征在于：所述柱溫為35℃。
4.根據權利要求1所述的一種托匹司他中微量氮氧化物雜質的測定方法，其特征在于：所述流速為1.0ml/min。
5.根據權利要求1所述的一種托匹司他中微量氮氧化物雜質的測定方法，其特征在于：所述流動相A的pH值為4.0。
6.根據權利要求1所述的一種托匹司他中微量氮氧化物雜質的測定方法，其特征在于：檢測波長為280nm。
7.根據權利要求1所述的一種托匹司他中微量氮氧化物雜質的測定方法，其特征在于，耐酸性色譜柱的規格為：長度250mm，內徑4.6mm，填料粒徑5μm。
8.根據權利要求1所述的一種托匹司他中微量氮氧化物雜質的測定方法，其特征在于：樣品檢測限度為0.46ppm。
9.根據權利要求1
10.根據權利要求9所述的一種托匹司他中微量氮氧化物雜質的測定方法，其特征在于：步驟一中，加熱至80℃。
...【技術特征摘要】
1.一種托匹司他中微量氮氧化物雜質的測定方法，其特征在于，步驟如下：
2.根據權利要求1所述的一種托匹司他中微量氮氧化物雜質的測定方法，其特征在于：所述dmso、甲醇、水的質量比為50:10:40。
3.根據權利要求1所述的一種托匹司他中微量氮氧化物雜質的測定方法，其特征在于：所述柱溫為35℃。
4.根據權利要求1所述的一種托匹司他中微量氮氧化物雜質的測定方法，其特征在于：所述流速為1.0ml/min。
5.根據權利要求1所述的一種托匹司他中微量氮氧化物雜質的測定方法，其特征在于：所述流動相a的ph值為4.0。
6.根據權利要求1所述的一...
【專利技術屬性】
技術研發人員：賀文，趙普，王李洪，百德玲，李覺，艾彥杉，金勇，邱家軍，
申請(專利權)人：浙江國邦藥業有限公司，
類型：發明
國別省市：
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