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【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于生物,具體涉及一種抗非洲豬瘟病毒蛋白特異性抗體及其用途。
技術介紹
1、非洲豬瘟(african?swine?fever,?asf)是由非洲豬瘟病毒(african?swinefever?virus,?asfv)在豬身上引起的一種以發熱和全身各臟器出血為特征的急性烈性傳染病。非洲豬瘟感染家豬和各種野豬,具有非常高致死率(接近100%),對全球養豬業造成巨大危害。非洲豬瘟尚且沒有安全有效的疫苗,國際上主要通過病原學和血清學方法進行非洲豬瘟的檢測和診斷。非洲豬瘟病毒基因ii型自2018年8月傳入我國以來,由于毒株的高致死率,對我國生豬產業影響深遠。目前,研究表明,臨床上不僅有低致病性的i型毒株,此外還有i型和ii型嵌合毒株。
2、因此,本領域需要一種高特異性和高靈敏度的非洲豬瘟病毒特異性抗體,從而為非洲豬瘟病毒的高精準的臨床檢測和診斷提供可行性方案。
技術實現思路
1、本專利技術基于噬菌體展示技術,以非洲豬瘟病毒(asfv)的p30蛋白為抗原蛋白,通過構建噬菌體鼠源免疫庫,篩選出具有生物活性、抗原結合能力強的抗asfv單鏈抗體,由此得到本專利技術。
2、在本專利技術的第一方面,提供了一種抗非洲豬瘟病毒抗體,所述抗體包括重鏈可變區和輕鏈可變區,其中所述重鏈可變區包括氨基酸序列分別為seq?id?no:?1-3的重鏈互補決定區vhcdr1、vhcdr2和vhcdr3,所述輕鏈可變區包括氨基酸序列分別為seq?id?no:?4-6的輕鏈互補決定區vlcd
3、在第二方面,提供了一種核酸分子,其編碼第一方面所述的抗非洲豬瘟病毒抗體。
4、在第三方面,提供了一種載體,其包含第二方面所述的核酸分子。
5、在第四方面,提供了一種表達細胞,其包含第二方面所述的核酸分子或第三方面所述的載體。
6、在第五方面,提供了第一方面所述的抗非洲豬瘟病毒抗體在制備用于檢測非洲豬瘟病毒的檢測劑中的用途。
7、在第六方面,提供了一種檢測非洲豬瘟病毒的方法,所述方法用于非診斷目的或者診斷目的,包括使用第一方面所述的抗非洲豬瘟病毒抗體的步驟。
8、在第七方面,提供了一種用于檢測非洲豬瘟病毒的試劑盒,包括第一方面所述的抗非洲豬瘟病毒抗體以及用于指導如何檢測非洲豬瘟病毒的使用說明。
9、綜上,本專利技術基于噬菌體展示技術篩選出一種新的抗非洲豬瘟病毒單鏈抗體,其表現出針對非洲豬瘟病毒p30蛋白的高靈敏度和高特異性,可以實現納克級濃度的更靈敏的檢測,極大地提高了非洲豬瘟病毒的檢出率,降低了檢測成本,為非洲豬瘟病毒的高精準檢測和診斷提供了可行性方案。
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1.一種抗非洲豬瘟病毒抗體,所述抗體包括重鏈可變區和輕鏈可變區,其中所述重鏈可變區包括氨基酸序列分別為SEQ?ID?NO:?1-3的重鏈互補決定區VH?CDR1、VH?CDR2和VHCDR3,所述輕鏈可變區包括氨基酸序列分別為SEQ?ID?NO:?4-6的輕鏈互補決定區VL?CDR1、VL?CDR2和VL?CDR3。
2.根據權利要求1所述的抗非洲豬瘟病毒抗體,其中,所述重鏈可變區的氨基酸序列由SEQ?ID?NO:7所示;所述輕鏈可變區的氨基酸序列由SEQ?ID?NO:8所示。
3.根據權利要求1或2所述的抗非洲豬瘟病毒抗體,其中,所述抗體是所述重鏈可變區和所述輕鏈可變區通過連接肽連接在一起的單鏈抗體。
4.根據權利要求3所述的抗非洲豬瘟病毒抗體,其中,所述連接肽為(GGGGS)n,其中n為2-5。
5.根據權利要求4所述的抗非洲豬瘟病毒抗體,其中,所述抗非洲豬瘟病毒抗體的氨基酸序列由SEQ?ID?NO:9所示。
6.一種核酸分子,其編碼權利要求1-5中任一項所述的抗非洲豬瘟病毒抗體。
7.一種載體,其包含權
8.根據權利要求7所述的載體,其中,所述載體為原核載體。
9.一種表達細胞,其包含權利要求6所述的核酸分子或權利要求7或8所述的載體。
10.根據權利要求9所述的表達細胞,其中,所述表達細胞為感受態大腸桿菌細胞。
11.權利要求1-5中任一項所述的抗非洲豬瘟病毒抗體在制備用于檢測非洲豬瘟病毒的檢測劑中的用途。
12.根據權利要求11所述的用途,其中,所述檢測是通過免疫層析法、酶標抗體法、化學發光法、電化學發光法來進行的。
13.一種檢測非洲豬瘟病毒的方法,所述方法用于非診斷目的,包括使用權利要求1-5中任一項所述的抗非洲豬瘟病毒抗體的步驟。
14.根據權利要求13所述的方法,其中,所述檢測是通過免疫層析法、酶標抗體法、化學發光法、電化學發光法來進行的。
15.一種用于檢測非洲豬瘟病毒的試劑盒,所述試劑盒包括權利要求1-5中任一項所述的抗非洲豬瘟病毒抗體以及用于指導如何檢測非洲豬瘟病毒的使用說明。
...【技術特征摘要】
1.一種抗非洲豬瘟病毒抗體,所述抗體包括重鏈可變區和輕鏈可變區,其中所述重鏈可變區包括氨基酸序列分別為seq?id?no:?1-3的重鏈互補決定區vh?cdr1、vh?cdr2和vhcdr3,所述輕鏈可變區包括氨基酸序列分別為seq?id?no:?4-6的輕鏈互補決定區vl?cdr1、vl?cdr2和vl?cdr3。
2.根據權利要求1所述的抗非洲豬瘟病毒抗體,其中,所述重鏈可變區的氨基酸序列由seq?id?no:7所示;所述輕鏈可變區的氨基酸序列由seq?id?no:8所示。
3.根據權利要求1或2所述的抗非洲豬瘟病毒抗體,其中,所述抗體是所述重鏈可變區和所述輕鏈可變區通過連接肽連接在一起的單鏈抗體。
4.根據權利要求3所述的抗非洲豬瘟病毒抗體,其中,所述連接肽為(ggggs)n,其中n為2-5。
5.根據權利要求4所述的抗非洲豬瘟病毒抗體,其中,所述抗非洲豬瘟病毒抗體的氨基酸序列由seq?id?no:9所示。
6.一種核酸分子,其編碼權利要求1-5中任一項所述的抗非洲豬瘟病毒抗體。
【專利技術屬性】
技術研發人員:楊波,谷琳琳,曾昊,趙夏薇,袁望,周巧妮,莫秋華,陳智英,付輝,
申請(專利權)人:深圳市易瑞生物技術股份有限公司,
類型:發明
國別省市:
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