本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種HPLC指紋圖譜?聚類分析方法在判別評價岷縣產(chǎn)當(dāng)歸中的應(yīng)用，屬于中藥質(zhì)量評價分析領(lǐng)域。本發(fā)明專利技術(shù)針對現(xiàn)有當(dāng)歸藥材的產(chǎn)地相關(guān)的質(zhì)量評價技術(shù)方案存在的缺陷，提出一種結(jié)果分析準(zhǔn)確、客觀、基于三種關(guān)鍵產(chǎn)地信息相關(guān)成分的含量分布情況建立的HPLC判別分析方法，使當(dāng)歸質(zhì)量評價結(jié)果更全面、客觀。采用聚類分析方法對當(dāng)歸藥材的產(chǎn)地進(jìn)行分析評價，以各樣品成分整體相似程度作為判別依據(jù)，對各個樣品進(jìn)行全面分析。采用相關(guān)系數(shù)評估各樣品成分分布的相似程度，有助于當(dāng)歸產(chǎn)地的成分特征對照分析。對當(dāng)歸藥材采用與參照樣品三種關(guān)鍵指標(biāo)成分含量的歐式距離系數(shù)來評估各樣品成分與岷當(dāng)歸藥材的相似程度，有助于當(dāng)歸產(chǎn)地相關(guān)的成分分布特征對照分析。
本專利技術(shù)屬于中藥質(zhì)量評價分析領(lǐng)域，具體涉及一種hplc指紋圖譜-聚類分析方法在判別評價岷縣產(chǎn)當(dāng)歸中的應(yīng)用。
1、目前，中藥市場上當(dāng)歸藥材來源眾多，各產(chǎn)地樣品質(zhì)量參差不齊，影響藥材及相關(guān)藥品質(zhì)量。目前多認(rèn)為，產(chǎn)自甘肅省岷縣的當(dāng)歸藥材質(zhì)量佳、效用好，作為當(dāng)歸道地產(chǎn)區(qū)，來源當(dāng)歸藥材稱為“岷當(dāng)歸”。確定兼顧當(dāng)歸藥材來源判別與質(zhì)量等級評價的方法是當(dāng)歸藥材種植行業(yè)發(fā)展的關(guān)鍵問題，影響著藥材產(chǎn)收、加工、銷售、使用等各個領(lǐng)域。
2、中藥質(zhì)量評價研究中常使用高效液相色譜法（hplc）、薄層色譜法等、指紋圖譜等方法，在當(dāng)歸質(zhì)量評價分析上也有廣泛應(yīng)用。張明慧、唐文文、李曉晨等[1-4]多位研究人員進(jìn)行了當(dāng)歸藥材hplc指紋圖譜研究，建立了不同來源當(dāng)歸藥材hplc指紋圖譜、多種指標(biāo)性成分測定、一測多評法測定等質(zhì)量評價方法，但能夠?qū)崿F(xiàn)道地產(chǎn)區(qū)岷縣當(dāng)歸質(zhì)量級別的判別方法尚未見報道。
3、當(dāng)歸藥材成分復(fù)雜，對分離條件要求較高，現(xiàn)有hplc法對當(dāng)歸樣品的成分分析，未能明確與產(chǎn)地信息相關(guān)的指標(biāo)性成分的分析評價。而且采用高效液相色譜分析方法，能夠客觀描述當(dāng)歸質(zhì)量評價結(jié)果，補充外觀性狀評價不足。
1、本專利技術(shù)針對現(xiàn)有質(zhì)量評價方法無法實現(xiàn)岷縣當(dāng)歸藥材級別的藥材質(zhì)量判定缺陷，提出一種結(jié)果分析準(zhǔn)確、客觀，不局限于性狀觀察分辨能力影響的，基于三種與產(chǎn)地信息相關(guān)成分阿魏酸、洋川芎內(nèi)酯i、藁本內(nèi)酯分布情況，實現(xiàn)岷當(dāng)歸質(zhì)量級別的樣品判別與評價方案，判定結(jié)果更客觀、準(zhǔn)確。
>2、為了實現(xiàn)上述專利技術(shù)目的，本專利技術(shù)提供以下技術(shù)方案。3、本專利技術(shù)公開了一種當(dāng)歸產(chǎn)地和質(zhì)量評價判別方法的建立，其特征在于，所述具體包括以下步驟：
4、步驟1、取采集自甘肅岷縣及非甘肅岷縣的當(dāng)歸制成粉末，置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇，超聲提取，再次用70%甲醇補足缺失重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，用0.22μm微孔濾膜濾過，即得；
5、步驟2、分別取阿魏酸、洋川芎內(nèi)酯i、藁本內(nèi)酯三種對照品，加入甲醇配制成阿魏酸、洋川芎內(nèi)酯i、藁本內(nèi)酯的混合對照品溶液，4℃保存，備用；
6、步驟3、采用色譜柱，流動相為0.1%甲酸(a)-乙腈(b)，梯度洗脫(0~10min，10%b；10~15min，10%~20%b；15~20min，20%b；20~35min，20%~40%b；35~37min，40%~50%b；37~50min，50%~57%b；50~51min，57%~70%b；51~60min，70%~75%b；60~65min，75%~10%b)；檢測波長270nm；流速1?ml·min-1；柱溫30℃；進(jìn)樣量10μl，進(jìn)行梯度洗脫；
7、步驟4、制備當(dāng)歸樣本藥材中藥指紋圖譜；以阿魏酸為參照，確認(rèn)14個共有峰，計算峰面積，以峰面積為變量，采用組間平均連接法，以歐式距離平方作為樣品的測度，各樣本采用系統(tǒng)聚類分析法進(jìn)行模式識別分析；
8、步驟5、采用數(shù)據(jù)分析軟件，對各樣本數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)性分析，得到各樣本間相關(guān)系數(shù)；
9、步驟6、計算當(dāng)歸樣本中三種阿魏酸、洋川芎內(nèi)酯i、藁本內(nèi)酯成分含量；以采集自甘肅岷縣當(dāng)歸樣品中阿魏酸、洋川芎內(nèi)酯i和藁本內(nèi)酯三種成分含量平均值作為標(biāo)準(zhǔn)值，計算非甘肅岷縣的當(dāng)歸樣本中三種成分含量與標(biāo)準(zhǔn)值之間的歐式距離；
10、步驟7、按照與對照樣品的相關(guān)系數(shù)大小情況進(jìn)行當(dāng)歸樣本相似程度分類情況；歐式距離刻度判斷值，判定樣品質(zhì)量為岷縣當(dāng)歸級別。
11、進(jìn)一步地，步驟2中所述對照品的濃度分別為：加入甲醇配制成每1ml含阿魏酸0.03mg/ml、洋川芎內(nèi)酯i?0.01?mg/ml、藁本內(nèi)酯0.80/ml。
12、進(jìn)一步地，步驟4中所述歐式距離判斷值為15。
13、進(jìn)一步地，步驟6中所述標(biāo)準(zhǔn)值為：阿魏酸含量1.08mg·g-1、洋川芎內(nèi)酯i含量0.0081mg·g-1、藁本內(nèi)酯含量18.69mg·g-1。
14、進(jìn)一步地，步驟7中所述相似程度分類為：相關(guān)系數(shù)在0.930以上為一類，相關(guān)系數(shù)在0.90-0.93之間為第二類，相關(guān)系數(shù)在0.90之間為第三類。
15、進(jìn)一步地，步驟7中所述歐式距離刻度判斷值小于9。
16、本專利技術(shù)還公開了一種當(dāng)歸產(chǎn)地和質(zhì)量評價判別方法，其特征在于，具體包括以下步驟：
17、步驟1、取待測當(dāng)歸樣品，以阿魏酸為參照，制備藥材指紋圖譜并計算峰面積；
18、步驟2、以峰面積為變量，采用數(shù)據(jù)分析軟件，得到待測樣品相關(guān)系數(shù)，得出待測當(dāng)歸樣品相似程度分類情況；
19、步驟3、測定待測樣本中阿魏酸、洋川芎內(nèi)酯i、藁本內(nèi)酯成分含量；
20、步驟4、以阿魏酸含量1.08mg·g-1、洋川芎內(nèi)酯i含量0.0081mg·g-1、藁本內(nèi)酯含量18.69mg·g-1為標(biāo)準(zhǔn)，計算待測當(dāng)歸樣本中三種成分含量與標(biāo)準(zhǔn)值之間的歐式距離；
21、步驟5、歐式距離刻度判斷值小于9，判定樣品質(zhì)量為岷縣當(dāng)歸級別。
22、本專利技術(shù)還公開了一種計算機(jī)可讀存儲介質(zhì)，其上存儲有計算機(jī)程序，其特征在于，所述計算機(jī)程序被處理器執(zhí)行時實現(xiàn)權(quán)利要求7所述當(dāng)歸產(chǎn)地和質(zhì)量評價判別方法中的步驟。
23、本專利技術(shù)還公開了一種當(dāng)歸產(chǎn)地和質(zhì)量評價判別模型，其特征在于，通過如權(quán)利要求7所述的當(dāng)歸產(chǎn)地和質(zhì)量評價判別方法構(gòu)建得到。
24、本專利技術(shù)還公開了一種當(dāng)歸產(chǎn)地和質(zhì)量評價判別裝置，其特征在于，包括如權(quán)利要求7所述的當(dāng)歸產(chǎn)地和質(zhì)量評價判別模型。
25、與現(xiàn)有技術(shù)比，本專利技術(shù)的有益效果如下。
26、本專利技術(shù)針對現(xiàn)有當(dāng)歸藥材的產(chǎn)地相關(guān)的質(zhì)量評價技術(shù)方案存在的缺陷，提出一種結(jié)果分析準(zhǔn)確、客觀、基于三種關(guān)鍵產(chǎn)地信息相關(guān)成分的含量分布情況建立的hplc判別分析方法，使當(dāng)歸質(zhì)量評價結(jié)果更全面、客觀。采用聚類分析方法對當(dāng)歸藥材的產(chǎn)地進(jìn)行分析評價，以各樣品成分整體相似程度作為判別依據(jù)，對各個樣品進(jìn)行全面分析。采用相關(guān)系數(shù)評估各樣品成分分布的相似程度，有助于當(dāng)歸產(chǎn)地的成分特征對照分析。對當(dāng)歸藥材采用與參照樣品三種關(guān)鍵指標(biāo)成分含量的歐式距離系數(shù)來評估各樣品成分與岷當(dāng)歸藥材的相似程度，有助于當(dāng)歸產(chǎn)地相關(guān)的成分分布特征對照分析。
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【技術(shù)保護(hù)點】
1.一種當(dāng)歸產(chǎn)地和質(zhì)量評價判別方法的建立，其特征在于，所述具體包括以下步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法的建立，其特征在于，步驟2中所述對照品的濃度分別為：加入甲醇配制成每1mL含阿魏酸0.03mg/mL、洋川芎內(nèi)酯I?0.01?mg/mL、藁本內(nèi)酯0.80/mL。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法的建立，其特征在于，步驟4中所述歐式距離判斷值為15。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法的建立，其特征在于，步驟6中所述標(biāo)準(zhǔn)值為：阿魏酸含量1.08mg·g-1、洋川芎內(nèi)酯I含量0.0081mg·g-1、藁本內(nèi)酯含量18.69mg·g-1。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法的建立，其特征在于，步驟7中所述相似程度分類為：相關(guān)系數(shù)在0.930以上為一類，相關(guān)系數(shù)在0.90-0.93之間為第二類，相關(guān)系數(shù)在0.90之間為第三類。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法的建立，其特征在于，步驟7中所述歐式距離刻度判斷值小于9。
7.一種當(dāng)歸產(chǎn)地和質(zhì)量評價判別方法，其特征在于，具體包括以下步驟：
8.一種計算機(jī)可讀存儲介質(zhì)，其上存儲有計算機(jī)程序，其特征在于，所述計算機(jī)程序被處理器執(zhí)行時實現(xiàn)權(quán)利要求5所述當(dāng)歸產(chǎn)地和質(zhì)量評價判別方法中的步驟。
9.一種當(dāng)歸產(chǎn)地和質(zhì)量評價判別模型，其特征在于，通過如權(quán)利要求5所述的當(dāng)歸產(chǎn)地和質(zhì)量評價判別方法構(gòu)建得到。
10.一種當(dāng)歸產(chǎn)地和質(zhì)量評價判別裝置，其特征在于，包括如權(quán)利要求7所述的當(dāng)歸產(chǎn)地和質(zhì)量評價判別模型。
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【技術(shù)特征摘要】
1.一種當(dāng)歸產(chǎn)地和質(zhì)量評價判別方法的建立，其特征在于，所述具體包括以下步驟：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法的建立，其特征在于，步驟2中所述對照品的濃度分別為：加入甲醇配制成每1ml含阿魏酸0.03mg/ml、洋川芎內(nèi)酯i?0.01?mg/ml、藁本內(nèi)酯0.80/ml。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法的建立，其特征在于，步驟4中所述歐式距離判斷值為15。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法的建立，其特征在于，步驟6中所述標(biāo)準(zhǔn)值為：阿魏酸含量1.08mg·g-1、洋川芎內(nèi)酯i含量0.0081mg·g-1、藁本內(nèi)酯含量18.69mg·g-1。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法的建立，其特征在于，步驟7中所述相似程度分類為：相關(guān)系數(shù)在0...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：邸學(xué)，李天媛，高峰，王海波，李坤玉，孫婉婷，姜雨，楊淼，
申請(專利權(quán))人：遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：
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