【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及基因工程和蛋白質工程，具體涉及一種高比活脂肪酶突變體及其應用。
技術介紹
1、脂肪酶是一類可以水解甘油三酯生成不同鏈長的游離脂肪酸與甘油的水解酶，可以催化解脂、酯交換、酯合成等反應。脂肪酶的主要來源有植物、動物和微生物。微生物具有種類多、繁殖快、易變異的特點，其分泌的脂肪酶種類繁多，底物廣譜性大，可適應不同的ph值與溫度范圍，有些極端環境獲取的微生物菌株其酶學特性更加突出。目前發現產脂肪酶的微生物分布非常廣泛，已分離鑒定的達60余個屬，其中酵母菌有10個屬、其它真菌有23個屬、放線菌有4個屬、細菌有28個屬。高產脂肪酶的真菌菌株多來源于根酶（rhizopus）、曲霉（aspergillus）、青霉（penicillium）、毛霉（mucor）、地霉（geotrichum）等等。
2、脂肪酶在飼料中具有廣泛的效應。脂肪酶可以補充動物內源消化酶的不足，提高營養的利用率。為滿足幼齡動物對高能量日糧的要求，外源添加脂肪酶能有效改善粗脂肪的消化及吸收，提高脂肪的利用率，同時降低腹瀉的發生。脂肪酶能顯著提高飼料中脂肪的消化率和利用率，從而降低飼料成本，還能對壓縮配方空間起到一定的作用。在飼料中添加脂肪酶還能促進脂肪溶性維生素和其他微量元素的吸收利用，提高動物的日增重、降低料肉比、改善毛色。研究表明，豬能完整地吸收脂肪酸并沉積于脂肪中，豬肉脂肪中的脂肪酸組成與日糧中的脂肪酸密切相關。通過在日糧中添加脂肪酶能提高脂肪的消化吸收率，同時能增加肌間脂肪酸含量，增強肉的色澤、肌肉大理石紋、持水性、嫩度、風味等作用。不同來源的
3、脂肪酶還可廣泛應用于油脂加工、食品、洗滌、醫藥、日化等工業領域。脂肪酶可以用于生產黃油、奶酪等脂肪含量較高的食品，可以用于改善面包質量、提高蛋白的發泡性等；可用于制造藥品，促進脂肪類原料的轉化；還可作為增效劑，幫助去除油污。
4、綜上，篩選性能優良、生產成本低的脂肪酶對于其推廣應用具有重要意義。
技術實現思路
1、本專利技術的目的是提供一種高比活脂肪酶突變體及其應用。所述突變體的比活力比野生型得到顯著提高，有利于其推廣應用。
2、本專利技術涉及一種脂肪酶突變體，是氨基酸序列為seq?id?no:1的脂肪酶第234位氨基酸由ile突變為asp。
3、所述突變體的氨基酸序列為seq?id?no：3。
4、本專利技術還涉及編碼上述脂肪酶突變體的dna分子。
5、本專利技術還涉及包含上述dna分子的重組表達載體。
6、本專利技術還涉及一種宿主細胞，包含上述重組表達載體。
7、將上述的質粒轉入宿主細胞中，重組表達的脂肪酶突變體的比活力得到顯著提升。
8、所述宿主細胞為畢赤酵母（ pichia?pastoris）。
9、所述宿主細胞為黑曲霉（ aspergillus?niger）。
10、所述宿主細胞為里氏木霉（ trichoderma?reesei）。
11、本專利技術還涉及所述脂肪酶突變體在飼料生產中的應用。
12、與野生型脂肪酶rl相比，本專利技術提供的包含i234d單點突變的脂肪酶突變體比活力提高了66.4%，比活力高達4837?u/mg，取得意料不到的技術效果。
13、綜上所述，本專利技術提供的脂肪酶突變體具有更高的比活力，有利于降低其生產成本，促進其在飼料等領域的廣泛應用。
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1.一種脂肪酶突變體，其特征在于，所述突變體是將氨基酸序列為SEQ?ID?NO：1的脂肪酶的第234位氨基酸由Ile變為Asp后得到的。
2.編碼權利要求1所述脂肪酶突變體的DNA分子。
3.包含權利要求2所述DNA分子的重組表達載體。
4.包含權利要求3所述重組表達載體的宿主細胞。
5.如權利要求4所述的宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞為畢赤酵母（Pichia?pastoris）或黑曲霉（Aspergillus?niger）或里氏木霉（Trichoderma?reesei）。
6.權利要求1所述脂肪酶突變體在飼料生產中的應用。
7.一種飼料添加劑，其特征在于，所述飼料添加劑包含權利要求1所述的脂肪酶突變體。
【技術特征摘要】
1.一種脂肪酶突變體，其特征在于，所述突變體是將氨基酸序列為seq?id?no：1的脂肪酶的第234位氨基酸由ile變為asp后得到的。
2.編碼權利要求1所述脂肪酶突變體的dna分子。
3.包含權利要求2所述dna分子的重組表達載體。
4.包含權利要求3所述重組表達載體的宿主細胞。
5.如權利要...
【專利技術屬性】
技術研發人員：徐雪梅，徐曉東，黃慶華，金融，李佩佩，郭嬌，
申請(專利權)人：濰坊康地恩生物科技有限公司，
類型：發明
國別省市：
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