【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及生物醫藥，具體涉及紫甘薯花青素在制備誘導黃曲霉菌細胞凋亡的產品中的應用。
技術介紹
1、黃曲霉(a.flavus)是一種常見的病原絲狀真菌，在儲運過程中極易污染農作物、飼料及油料作物，嚴重影響農作物的質量及危害人類健康。由黃曲霉菌代謝產生的黃曲霉毒素是目前發現的毒性最強的次級代謝產物，具有致畸致癌致突變的作用。主要在食品生產、運輸及儲藏過程中對食品產生污染，尤其是在玉米、花生、大米及肉類制品中極易出現，此外各種植物性與動物性食品也會被其污染。據聯合國糧食及農業組織(fao)的研究報告，每年有25％的農作物被黃曲霉及其代謝產物污染，從而失去經濟價值，給人類經濟的發展帶來巨大的影響和損失。此外，儲存的農產品由于感染黃曲霉也會產生大量的致癌物質。因此，研發高效、安全、經濟的天然食品防腐劑并建立便攜的檢測手段，以有效控制真菌毒素對食品產生的污染，對于國民健康具有重大意義。
2、目前，國內外普遍通過使用化學保鮮劑控制食品腐敗變質，這些保鮮劑主要包括苯甲酸、山梨酸及其鹽類和對羥基苯甲酸酯類等。然而，化學保鮮防腐劑在食品中有殘留且具有致癌性、致畸性和特殊氣味等，使得這類防腐劑的使用越來越受到限制。與上述化學防腐劑相比，天然產物防腐劑將具有使用方便、應用廣泛、氣相防腐以及無殘留等優勢，因而進一步深入研究其抗菌作用機理對于開發新型天然食品防腐劑具有重要意義。目前關于紫甘薯花青素在誘導真菌細胞凋亡方面鮮有報道。
技術實現思路
1、本專利技術的目的是提供紫甘薯花青素在制備誘導黃
2、為實現上述目的，本專利技術提供了紫甘薯花青素在制備誘導黃曲霉菌細胞凋亡的產品中的應用。
3、優選的，所述的產品為防腐劑或抑菌劑。
4、進一步的，紫甘薯花青素誘導黃曲霉菌細胞凋亡的具體驗證過程包括以下步驟：
5、s1：構建對照組和處理組黃曲霉培養體系；其中，處理組添加一定濃度紫甘薯花青素干預；
6、s2：將對照組和處理組黃曲霉在相同條件下培養一段時間后，通過顯微鏡技術、紫外-可見分光技術、酶標儀來考察紫甘薯花青素誘導黃曲霉菌細胞凋亡的情況。
7、進一步的，所述步驟s2中，通過熒光顯微鏡技術對比對照組和處理組中黃曲霉細胞磷脂酰絲氨酸外翻情況，若處理組中磷脂酰絲氨酸外翻增強，則表明紫甘薯花青素可以有效引發黃曲霉細胞膜的破壞及晚期凋亡。
8、進一步的，所述步驟s2中，通過顯微鏡技術測定對照組和處理組中黃曲霉細胞內ros水平、黃曲霉細胞質ca2+濃度、黃曲霉線粒體膜電位的完整性，若處理組中ros水平比對照組升高，則表明紫甘薯花青素能夠引起ros在細胞內的積累；若處理組中ca2+濃度明顯升高，則表明紫甘薯花青素有效誘導黃曲霉細胞質ca2+濃度的增加；若處理組中黃曲霉線粒體膜電位發生改變，說明紫甘薯花青素有效破壞黃曲霉線粒體膜的完整性。
9、進一步的，所述步驟s2中，通過紫外-可見分光技術對比對照組和處理組中黃曲霉細胞內caspase-9的活性，若處理組中caspase-9活性明顯升高，則表明紫甘薯花青素對caspase-9有顯著激發作用。
10、進一步的，所述步驟s2中，通過酶標儀對比對照組和處理組中黃曲霉線粒體總脫氫酶活性，若處理組中黃曲霉線粒體總脫氫酶活性降低，說明紫甘薯花青素有效影響黃曲霉線粒體總脫氫酶的活性。
11、本專利技術選用產量高、價格低、來源豐富、易獲取的紫甘薯花青素來考察其對黃曲霉細胞凋亡的誘導，紫甘薯花青素作為一種安全環保的天然植物色素，與紫蘇子、紫葡萄、紫甘藍及黑米等其他花青素相比，其熱穩定性更高、光穩定性更強。實驗結果表明，紫甘薯花青素能夠引起黃曲霉細胞磷脂酰絲氨酸外翻，提升黃曲霉細胞內ros水平、黃曲霉細胞質ca2+濃度和黃曲霉細胞內caspase-9的活性，改變黃曲霉線粒體膜電位的完整性，降低黃曲霉線粒體總脫氫酶的活性。因此，紫甘薯花青素具有誘導黃曲霉菌細胞凋亡的功效，可作為開發新型高效的天然抗黃曲霉菌的防腐劑或抑菌劑。該方法簡單易行，減少各種化學防腐劑或抑菌劑的使用，避免了對環境造成污染，綠色環保。
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1.紫甘薯花青素在制備誘導黃曲霉菌細胞凋亡的產品中的應用。
2.根據權利要求1所述的紫甘薯花青素在制備誘導黃曲霉菌細胞凋亡的產品中的應用，其特征在于，所述的產品為防腐劑或抑菌劑。
3.根據權利要求1所述的紫甘薯花青素在制備誘導黃曲霉菌細胞凋亡的產品中的應用，其特征在于，紫甘薯花青素誘導黃曲霉菌細胞凋亡的具體驗證過程包括以下步驟：
4.根據權利要求3所述的紫甘薯花青素在制備誘導黃曲霉菌細胞凋亡的產品中的應用，其特征在于，所述步驟S2中，通過熒光顯微鏡技術對比對照組和處理組中黃曲霉細胞磷脂酰絲氨酸外翻情況。
5.根據權利要求3所述的紫甘薯花青素在制備誘導黃曲霉菌細胞凋亡的產品中的應用，其特征在于，所述步驟S2中，通過顯微鏡技術對比對照組和處理組中黃曲霉細胞內ROS水平、黃曲霉細胞質Ca2+濃度、黃曲霉線粒體膜電位的完整性。
6.根據權利要求3所述的紫甘薯花青素在制備誘導黃曲霉菌細胞凋亡的產品中的應用，其特征在于，所述步驟S2中，通過紫外-可見分光技術對比對照組和處理組中黃曲霉細胞內Caspase-9的活性。
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...【技術特征摘要】
1.紫甘薯花青素在制備誘導黃曲霉菌細胞凋亡的產品中的應用。
2.根據權利要求1所述的紫甘薯花青素在制備誘導黃曲霉菌細胞凋亡的產品中的應用，其特征在于，所述的產品為防腐劑或抑菌劑。
3.根據權利要求1所述的紫甘薯花青素在制備誘導黃曲霉菌細胞凋亡的產品中的應用，其特征在于，紫甘薯花青素誘導黃曲霉菌細胞凋亡的具體驗證過程包括以下步驟：
4.根據權利要求3所述的紫甘薯花青素在制備誘導黃曲霉菌細胞凋亡的產品中的應用，其特征在于，所述步驟s2中，通過熒光顯微鏡技術對比對照組和處理組中黃曲霉細胞磷脂酰絲氨酸外翻情況。
5.根據權利要求3所...
【專利技術屬性】
技術研發人員：苗向敏，李宗兵，冷明玉，崔艷陽，
申請(專利權)人：江蘇師范大學，
類型：發明
國別省市：
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