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【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及單克隆抗體,尤其涉及一種抗雞傳染性喉氣管炎病毒單克隆抗體、其雜交瘤細(xì)胞株、以及包含該單克隆抗體的雞傳染性喉氣管炎病毒抗體阻斷elisa檢測(cè)試劑盒。
技術(shù)介紹
1、雞傳染性喉氣管炎(avian?infectious?laryngotracheitis,ilt)是由雞傳染性喉氣管炎病毒(avian?infectious?lyngotracheitis?virus,iltv)引起的雞的一種急性呼吸道傳染病,該病是威脅我國(guó)養(yǎng)雞業(yè)的重要傳染病之一。可感染各年齡段的雞,但以成年雞多發(fā)且癥狀最典型。本病的癥狀為呼吸困難,咳血樣滲出物,有時(shí)滲出物形成假膜堵塞喉部,喉部和氣管粘膜腫脹,出血,并形成糜爛。該病可引起雞的死亡和產(chǎn)蛋率下降,雞群中的感染率可達(dá)90%以上,死亡率通常在5%~20%之間。有研究表明病毒糖蛋白對(duì)iltv復(fù)制和誘導(dǎo)宿主免疫反應(yīng)具有重要作用。
2、我國(guó)是一個(gè)禽類養(yǎng)殖大國(guó),龐大的養(yǎng)殖體量與集約化養(yǎng)殖模式給家禽疫病防控帶來(lái)挑戰(zhàn)。雞傳染性喉氣管炎感染后造成雞的死亡和產(chǎn)蛋率下降,給養(yǎng)殖企業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。免疫接種是預(yù)防該病的有效手段,而疫苗的設(shè)計(jì)要基于對(duì)病原與宿主細(xì)胞間互作機(jī)制的了解,選擇病毒吸附或侵入宿主細(xì)胞的關(guān)鍵蛋白來(lái)設(shè)計(jì)疫苗,更能取得理想的預(yù)防效果。
3、iltv的表面糖蛋白gd蛋白在吸附與侵入宿主細(xì)胞的作用機(jī)制仍缺乏深入研究,需要研制一種識(shí)別iltv?gd蛋白的單克隆抗體,為進(jìn)一步研究iltv與宿主細(xì)胞的相互作用提供有力工具,為開發(fā)iltv疫苗提供技術(shù)支持。
技
1、本專利技術(shù)要解決目前市場(chǎng)上缺乏研究雞傳染性喉氣管炎病毒與宿主細(xì)胞相互作用的單抗產(chǎn)品的技術(shù)問(wèn)題,提供一種抗雞傳染性喉氣管炎病毒單克隆抗體,該單克隆抗體能特異性識(shí)別雞傳染性喉氣管炎病毒gd蛋白,不僅可用于研究雞傳染性喉氣管炎病毒與宿主細(xì)胞的作用機(jī)制,而且還可用于檢測(cè)雞傳染性喉氣管炎病毒,對(duì)雞傳染性喉氣管炎病毒的臨床診斷及其疫苗的開發(fā)提供很好的產(chǎn)品。
2、為了解決上述技術(shù)問(wèn)題,本專利技術(shù)通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):
3、在本專利技術(shù)的一個(gè)方面,提供了一種特異性識(shí)別雞傳染性喉氣管炎病毒gd蛋白的單克隆抗體。
4、優(yōu)選的,所述單克隆抗體由保藏號(hào)為cctcc?no:c2024177的雜交瘤細(xì)胞株產(chǎn)生。
5、所述單克隆抗體的抗體亞型為igg1,輕鏈為κ鏈。
6、在本專利技術(shù)的另一方面,還提供了一種分泌產(chǎn)生上述單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株。
7、優(yōu)選的,該雜交瘤細(xì)胞株的保藏號(hào)為cctcc?no:c2024177。
8、在本專利技術(shù)的另一方面,還提供了一種雞傳染性喉氣管炎病毒抗體檢測(cè)試劑盒,包含上述的單克隆抗體。
9、優(yōu)選的,本專利技術(shù)試劑盒還包含雞傳染性喉氣管炎病毒抗原包被的elisa酶標(biāo)板、陽(yáng)性對(duì)照血清、陰性對(duì)照血清、樣品稀釋液、酶標(biāo)二抗、顯色液、終止液。
10、所述試劑盒采用阻斷elisa方法檢測(cè)雞傳染性喉氣管炎病毒抗體,包括以下步驟:
11、用純化的雞傳染性喉氣管炎病毒抗原包被elisa酶標(biāo)板;
12、將待測(cè)血清樣品與包被抗原作用后,依次加入上述的單克隆抗體、酶標(biāo)二抗、顯色液和終止液;
13、利用酶標(biāo)儀讀取吸光度值od450nm,并按公式:阻斷率pi(%)=(陰性對(duì)照孔平均od450nm值-樣品孔平均od450nm值)/陰性對(duì)照孔平均od450nm值×100%,計(jì)算待測(cè)血清樣品的阻斷率,得檢測(cè)結(jié)果。
14、在本專利技術(shù)的另一方面,還提供了上述單克隆抗體在制備診斷雞傳染性喉氣管炎的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
15、在本專利技術(shù)的另一方面,還提供了上述單克隆抗體在制備預(yù)防和/或治療雞傳染性喉氣管炎的藥物中的應(yīng)用。
16、在本專利技術(shù)的另一方面,還提供了上述雜交瘤細(xì)胞株在制備預(yù)防和/或治療雞傳染性喉氣管炎的藥物中的應(yīng)用。
17、在本專利技術(shù)的另一方面,還提供了上述雞傳染性喉氣管炎病毒抗體檢測(cè)試劑盒在制備診斷雞傳染性喉氣管炎的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
18、本專利技術(shù)抗雞傳染性喉氣管炎病毒單克隆抗體,能特異性識(shí)別雞傳染性喉氣管炎病毒gd蛋白,不僅為研究雞傳染性喉氣管炎病毒(iltv)與宿主細(xì)胞的相互作用提供有力工具,而且還可用于檢測(cè)雞傳染性喉氣管炎病毒,在雞傳染性喉氣管炎病毒的臨床診斷及其疫苗的開發(fā)方面具有很好的應(yīng)用前景。
本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.一種特異性識(shí)別雞傳染性喉氣管炎病毒gD蛋白的單克隆抗體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的單克隆抗體,其特征在于,所述單克隆抗體由保藏號(hào)為CCTCCNO:C2024177的雜交瘤細(xì)胞株產(chǎn)生。
3.一種分泌產(chǎn)生權(quán)利要求1所述單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的雜交瘤細(xì)胞株,其特征在于,該雜交瘤細(xì)胞株的保藏號(hào)為CCTCCNO:C2024177。
5.一種雞傳染性喉氣管炎病毒抗體檢測(cè)試劑盒,其特征在于,包含權(quán)利要求1或2所述的單克隆抗體。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的雞傳染性喉氣管炎病毒抗體檢測(cè)試劑盒,其特征在于,還包含雞傳染性喉氣管炎病毒抗原包被的ELISA酶標(biāo)板、陽(yáng)性對(duì)照血清、陰性對(duì)照血清、樣品稀釋液、酶標(biāo)二抗、顯色液、終止液。
7.權(quán)利要求1或2所述單克隆抗體在制備診斷雞傳染性喉氣管炎的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
8.權(quán)利要求1或2所述單克隆抗體在制備預(yù)防和/或治療雞傳染性喉氣管炎的藥物中的應(yīng)用。
9.權(quán)利要求3或4所述雜交瘤細(xì)胞株在制備預(yù)防和/或治療雞傳染性喉氣管炎的藥物中的應(yīng)用。
>10.權(quán)利要求5或6所述雞傳染性喉氣管炎病毒抗體檢測(cè)試劑盒在制備診斷雞傳染性喉氣管炎的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
...【技術(shù)特征摘要】
1.一種特異性識(shí)別雞傳染性喉氣管炎病毒gd蛋白的單克隆抗體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的單克隆抗體,其特征在于,所述單克隆抗體由保藏號(hào)為cctccno:c2024177的雜交瘤細(xì)胞株產(chǎn)生。
3.一種分泌產(chǎn)生權(quán)利要求1所述單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的雜交瘤細(xì)胞株,其特征在于,該雜交瘤細(xì)胞株的保藏號(hào)為cctccno:c2024177。
5.一種雞傳染性喉氣管炎病毒抗體檢測(cè)試劑盒,其特征在于,包含權(quán)利要求1或2所述的單克隆抗體。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的雞傳染性喉氣管炎病...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員:李澤君,張志飛,崔利兵,苑純秀,劉芹防,滕巧泱,閆大為,許榜豐,潘學(xué),
申請(qǐng)(專利權(quán))人:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心上海分中心,
類型:發(fā)明
國(guó)別省市:
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