【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及核苷酸生產，具體涉及一種制備核苷酸型酵母抽提物的方法，尤其是一種生物催化的制備核苷酸型酵母抽提物的方法。
技術介紹
1、食品的口感是由其內部的水溶性物質組成的，這其中涵蓋了核苷酸、氨基酸、縮氨酸、有機酸、有機堿和無機離子等成分。這些物質在人體內經過一系列復雜而又漫長的反應才能生成甜味、苦味或咸味。上面提到的各種成分都至少包含了咸、甜、酸、苦、鮮這五種味道中的一種。呈味核苷酸是這些物質之一，呈味核苷酸的種類包括但不限于肌苷酸、鳥苷酸、胞苷酸、尿苷酸以及黃苷酸等。呈味核苷酸在肉、魚、蛋、奶類制品中有較好的增鮮力，能增加其適口性。呈味核苷酸能夠增強甜味和肉味、醇厚的感覺，同時也能消除或抑制酸味、苦味、腥味和焦味等不良的風味。在一定程度上可以提高調味料的適口性。這樣可以有效地降低添加劑的用量，減少生產成本，并使食物的口感變得更加醇厚。另外，呈味核苷酸還可以提高肉類產品在貯藏過程中的貨架期。因此，呈味核苷酸經常被加入到各種調料中，例如雞精、雞粉、增鮮味精、醬油、調味包、湯料、番茄醬、蛋黃醬等，以增強其味道并優化口感。在食品工業中有廣闊應用前景。核苷酸型酵母抽提物，也被稱為5'-核苷酸型酵母抽提物，其成分包括5'-肌苷酸二鈉(imp)和5'-鳥苷酸二鈉(gmp)。這是新一代的核苷酸類食品增鮮劑，可以直接加入到食品中，發揮增鮮的效果。核苷酸型酵母抽提法是一種新型復合微生物添加劑，它可以與各種氨基酸形成多種風味物質。它是方便面、雞精、雞粉以及增鮮醬油等調味品的關鍵味道成分之一。另外，核苷酸型酵母抽提物還是生產生物活性物質如酶促反應
2、核苷酸型酵母抽提物的制備目前主要采用幾種方法：
3、(1)微生物發酵法：通過選用特定的生產菌株，進行生物發酵以直接獲得目標產物。這種方法的副產品較少，成本也比較低，但是受限于微生物的特性。
4、(2)化學合成法：在磷酸三乙酯和三氯氧磷的作用下，通過化學反應合成5'-肌苷酸二鈉(imp)和5'-鳥苷酸二鈉(gmp)。這種方法具有很強的專一性和較少的副產品，但是使用的化學原料和有機溶劑的毒性較強，對操作人員和環境的危害較大，工藝條件較為惡劣，且后續提取過程復雜，成本也較高。
5、(3)生物催化法：在磷酸化酶的催化下，肌苷或鳥苷與磷酸供體反應生成5'-肌苷酸二鈉(imp)和5'-鳥苷酸二鈉(gmp)。這種方法的優點包括高度專一性，磷酸供體的來源多樣且成本低，提取流程簡單方便，且對環境影響小。然而，現行的生物催化法在制備5'-肌苷酸二鈉(imp)和5'-鳥苷酸二鈉(gmp)時面臨轉化效率低的問題，提取技術亦存在限制，導致所得的核苷酸型酵母提取物純度不高，純度和收率難以兼顧。
技術實現思路
1、有鑒于此，本專利技術的目的在于針對現有技術中存在的問題，提供一種可高效、高產、簡便、風味更好，更安全的核苷酸型酵母抽提物的制備方法。
2、為實現本專利技術的目的，本專利技術采用如下技術方案：
3、一種制備核苷酸型酵母抽提物的方法，包括以下步驟：
4、(1)將酵母抽提物與rna混合，流加核酸酶溶液，進行第一酶解，得到第一酶解液；(2)在所述的第一酶解液中加入脫氨酶，進行第二酶解，得到第二酶解液；
5、(3)調節所述第二酶解液的ph，干燥，即得。
6、其中，步驟(1)中，所述的酵母抽提物經蛋白酶酶解后與rna混合；所述的蛋白酶為木瓜蛋白酶、堿性蛋白酶或中性蛋白酶中的任意一種或多種組合；蛋白酶酶解體系中，酵母抽提物的濃度為80-100g/l，蛋白酶的濃度為0.05-0.3g/l；所述蛋白酶酶解，酶解時間為0.5-4h，酶解溫度為25-40℃。優選地，所述的蛋白酶為木瓜蛋白酶或堿性蛋白酶中的任意一種或兩種組合；蛋白酶酶解體系中，酵母抽提物的濃度為100g/l，蛋白酶的濃度為0.1-0.2g/l；所述蛋白酶酶解，酶解時間為4h，酶解溫度為25℃。進一步優選地，所述的蛋白酶酶解在攪拌轉速為120rpm的環境中進行。
7、其中，步驟(1)中，所述的酵母抽提物在混合體系中的濃度為80-100g/l，所述的rna與所述的酵母抽提物的混合質量比為1:1.5-2；優選地，所述的混合體系，為酵母抽提物和rna在水中混合得到的混合體系。進一步優選地，混合體系中，酵母抽提物的濃度為100g/l，所述的rna與所述的酵母抽提物的混合質量比為1:2。
8、其中，步驟(1)中，所述的核酸酶溶液為核糖核酸酶水溶液，濃度為100-200g/l；所述的流加，初始流速為1-2ml/h，每小時流速增加0.5-1ml/h。優選地，所述的核糖核酸酶為核酸酶p1，所述的核酸酶溶液，濃度為100g/l，初始流速為1ml/h，每小時流速增加0.5ml/h。
9、其中，步驟(1)中，所述的第一酶解，酶解ph為5-7，酶解時間為3-10h，初始酶解溫度為60-80℃，采用階梯式降溫，每半小時溫度下降3-8℃，第一酶解反應結束時溫度為30-50℃。優選地，所述的第一酶解，酶解ph為5±0.5，酶解時間為5h，初始酶解溫度為70℃，采用階梯式降溫，每半小時溫度下降3℃，第一酶解反應結束時溫度為40℃。
10、其中，步驟(2)中，所述的脫氨酶以脫氨酶溶液的方式流加加入，所述脫氨酶溶液的濃度為18-40g/l；所述的流加，初始流速為1-2ml/h，每小時增加0.5-1ml/h；所述的第二酶解，酶解時間為3-10h，初始酶解溫度為30-50℃，采用階梯式降溫，每半小時溫度下降2-3℃，當溫度下降至22-25℃時進行恒溫反應。優選地，脫氨酶溶液的濃度為18g/l，初始流速為1ml/h，每小時增加0.5ml/h；所述的第二酶解，酶解時間為8h，初始酶解溫度為40℃，采用階梯式降溫，每半小時溫度下降2℃，當溫度下降至24℃時進行恒溫反應。
11、其中，步驟(3)中，所述的ph調節至5-7；所述的干燥為噴霧干燥，進風溫度為150-200℃，出風溫度80-100℃。優選地，所述的干燥前先進行離心，以去除不溶物。進一步優選地，所述的ph調節至6±0.5；所述的噴霧干燥，進風溫度為150℃，出風溫度95℃。
12、第二方面，本專利技術提供了第一方面所述的方法制備得到的核苷酸型酵母抽提物。其中，所述核苷酸型酵母抽提物的核苷酸含量大于35％w/w。
13、第三方面，本專利技術提供了第二方面所述的核苷酸型酵母抽提物在食品調味劑中的應用。
14、其中，所述核苷酸型酵母抽提物在食品調味劑中的質量含量為0.01?-0.3％。
15、有益效果：
16、本專利技術使用酵母抽提物與rna作為原料，經過一系列ph、溫度和酶解方式的調控，制成富含核苷酸型酵母抽提物的料液，經噴干處理得到富含核苷酸型酵母抽提物的粉末。本專利技術設計的制備方法高效、簡便，無需使用有本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種制備核苷酸型酵母抽提物的方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述的酵母抽提物經蛋白酶酶解后與RNA混合；所述的蛋白酶為木瓜蛋白酶、堿性蛋白酶或中性蛋白酶中的任意一種或多種的組合；蛋白酶酶解體系中，酵母抽提物的濃度為80-100g/L，蛋白酶的濃度為0.05-0.3g/L；所述蛋白酶酶解，酶解時間為0.5-4h，酶解溫度為25-40℃。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述的酵母抽提物在混合體系中的濃度為80-100g/L，所述的RNA與所述的酵母抽提物的混合質量比為1:1.5-2。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述的核酸酶溶液為核糖核酸酶水溶液，濃度為100-200g/L；所述的流加，初始流速為1-2mL/h，每小時流速增加0.5-1mL/h；所述的第一酶解，酶解pH為5-7，酶解時間為3-10h，初始酶解溫度為60-80℃，采用階梯式降溫，每半小時下降3-8℃，第一酶解反應結束時溫度為30-50℃。
5.根據權利要求1
6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(3)中，所述的pH調節至5-7；所述的干燥為噴霧干燥，進風溫度為150-200℃，出風溫度80-100℃。
7.權利要求1-6任意一項所述的方法制備得到的核苷酸型酵母抽提物。
8.根據權利要求7所述的核苷酸型酵母抽物，其特征在于，其核苷酸含量大于35％w/w。
9.權利要求7或權利要求8所述的核苷酸型酵母抽提物在食品調味劑中的應用。
10.根據權利要求9所述的應用，其特征在于，所述核苷酸型酵母抽提物在食品調味劑中的質量含量為0.01-0.3％。
...【技術特征摘要】
1.一種制備核苷酸型酵母抽提物的方法，其特征在于，包括以下步驟：
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述的酵母抽提物經蛋白酶酶解后與rna混合；所述的蛋白酶為木瓜蛋白酶、堿性蛋白酶或中性蛋白酶中的任意一種或多種的組合；蛋白酶酶解體系中，酵母抽提物的濃度為80-100g/l，蛋白酶的濃度為0.05-0.3g/l；所述蛋白酶酶解，酶解時間為0.5-4h，酶解溫度為25-40℃。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述的酵母抽提物在混合體系中的濃度為80-100g/l，所述的rna與所述的酵母抽提物的混合質量比為1:1.5-2。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述的核酸酶溶液為核糖核酸酶水溶液，濃度為100-200g/l；所述的流加，初始流速為1-2ml/h，每小時流速增加0.5-1ml/h；所述的第一酶解，酶解ph為5-7，酶解時間為3-10h，初始酶解溫度為60-80℃，采用階梯式降溫，每半小時下降3-8℃，第一酶解反應結束時...
【專利技術屬性】
技術研發人員：徐有帥，陳曉春，湯亦文，
申請(專利權)人：南京同凱兆業生物技術有限責任公司，
類型：發明
國別省市：
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