【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專(zhuān)利技術(shù)涉及藥物化學(xué)合成領(lǐng)域，具體涉及一種n-芴甲氧羰基-n′,n′,n′-三甲基-l-賴(lài)氨酸氯化物的制備方法。
技術(shù)介紹
1、n-芴甲氧羰基-n′,n′,n′-三甲基-l-賴(lài)氨酸氯化物，是一種用于藥物合成的中間體，也可以用來(lái)篩選藥物。其縮寫(xiě)fmoc-lys(me)3-oh.hcl。
2、組蛋白賴(lài)氨酸的甲基化由組蛋白賴(lài)氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶(hkmts)和組蛋白賴(lài)氨酸去甲基化酶(hkdms)是動(dòng)態(tài)調(diào)節(jié)的。hkdms的異常調(diào)節(jié)與多種癌癥的發(fā)生發(fā)展及耐藥密切相關(guān)，其中組蛋白修飾是指蛋白在相關(guān)的甲基化酶或去甲基化酶的作用下，發(fā)生甲基化、乙酰化、磷酸化和泛素化等修飾過(guò)程，當(dāng)調(diào)節(jié)異常時(shí)，在未改變?nèi)旧|(zhì)結(jié)構(gòu)下，導(dǎo)致基因表達(dá)水平發(fā)生改變，進(jìn)而導(dǎo)致腫瘤產(chǎn)生、轉(zhuǎn)移和侵襲。fmoc-lys(me)3-oh.hcl作為一種賴(lài)氨酸三甲基化合物，可以用與篩選hkdms小分子抑制劑，從而作為篩選抗腫瘤藥物用于治療癌癥，也可以作為化學(xué)探針來(lái)研究表觀遺傳學(xué)，因此對(duì)其開(kāi)發(fā)具有重要意義。
3、目前文獻(xiàn)報(bào)道n-芴甲氧羰基-n′,n′,n′-三甲基-l-賴(lài)氨酸氯化物的合成方法有兩種：第一種文獻(xiàn)[organic?letters,2019,vol.21,#20,p.8378-8382]和[chemicalcommunications,2017,vol.53,#99,p.13264-13267]報(bào)道采用fmoc-l-賴(lài)氨酸鹽酸鹽為原料，與甲醛發(fā)生還原胺化得到二甲基化合物，還原劑分別是硼氫化鈉和醋酸硼氫化鈉，然后在縛酸劑作用下與碘甲烷上甲基得n-芴甲氧羰基-
4、
5、另一種方法：文獻(xiàn)[journal?of?the?american?chemical?society,2012,vol.134,#35,p.14310-14313]報(bào)道n-alpha-叔丁氧羰基-n-ε-(二甲基)-l-賴(lài)氨酸為原料，dipea為縛酸劑，碘甲烷上甲基得到n-boc-n′,n′,n′-三甲基-l-賴(lài)氨酸碘化物，接著加入堿將陰離子i-去除，加入鹽酸得到n-boc-n′,n′,n′-三甲基-l-賴(lài)氨酸氯化物，隨后三氟乙酸脫保護(hù)，最后與fmoc-cl上保護(hù)得到n-芴甲氧羰基-n′,n′,n′-三甲基-l-賴(lài)氨酸氯化物，該方法優(yōu)點(diǎn)是應(yīng)用了boc保護(hù)近端的氨基為原料，使boc保護(hù)基團(tuán)更容易耐堿，相比叫fmoc-保護(hù)基團(tuán)在堿性條件下更容易脫除，進(jìn)而產(chǎn)生不易去除的雜質(zhì)。但n-alpha-叔丁氧羰基-n-ε-(二甲基)-l-賴(lài)氨酸價(jià)格高昂，與n-芴甲氧羰基-n′,n′,n′-三甲基-l-賴(lài)氨酸氯化物價(jià)格相當(dāng)，因此不符合經(jīng)濟(jì)性。反應(yīng)路線表示如下：
6、
7、為了避免fmoc-脫除和經(jīng)濟(jì)性，本專(zhuān)利技術(shù)首先篩選出了羧基保護(hù)基團(tuán)，羧基保護(hù)基團(tuán)有芐基、叔丁基和烯丙基。通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)芐基在脫除時(shí)用pd/c催化氫化，會(huì)出現(xiàn)脫fmoc現(xiàn)象，大概芴烯生成量為2-3％，用叔丁基做保護(hù)基時(shí)，用氯化氫或三氟乙酸脫除不干凈，溶劑選擇較困難，產(chǎn)物溶解性不好，后處理往往需要柱層析。因此本專(zhuān)利技術(shù)采用烯丙基保護(hù)羧基。
8、因此，針對(duì)上述問(wèn)題，本專(zhuān)利技術(shù)采用對(duì)羧基丙烯基保護(hù)，解決了羧酸甲酯化，和fmoc-保護(hù)基團(tuán)溶劑脫掉的問(wèn)題，不僅原料易得，且更便宜，后處理簡(jiǎn)單，使產(chǎn)品收率高，提高了產(chǎn)品品質(zhì)等。更加符合工業(yè)化生產(chǎn)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、為解決上述現(xiàn)有技術(shù)中存在的問(wèn)題，本專(zhuān)利技術(shù)提供一種n-芴甲氧羰基-n′,n′,n′-三甲基-l-賴(lài)氨酸氯化物的制備方法，該制備方法以n-alpha-芴甲氧羰基-n-epsilon-叔丁氧羰基-l-賴(lài)氨酸為原料，與丙烯溴對(duì)羧基保護(hù)，接著脫boc保護(hù)得到n-芴甲氧羰基-l-賴(lài)氨酸1-烯丙基酯鹽酸鹽，隨后在dipea作用下與碘甲烷甲基化反應(yīng)得到n-芴甲氧羰基-n′,n′,n′-三甲基-l-賴(lài)氨酸烯丙酯碘化物，最后與四(三苯基磷)鈀和助劑脫烯丙酯得到n-芴甲氧羰基-n′,n′,n′-三甲基-l-賴(lài)氨酸氯化物。該方法原料易得，無(wú)需用到易制爆的硼氫化鈉或醋酸硼氫化鈉，通過(guò)對(duì)羧基進(jìn)行保護(hù)，避免了羧基甲基化，反應(yīng)簡(jiǎn)單，后處理無(wú)需制備液相或柱層析，更符合規(guī)模化生產(chǎn)。
2、本專(zhuān)利技術(shù)提出并公開(kāi)一種n-芴甲氧羰基-n′,n′,n′-三甲基-l-賴(lài)氨酸氯化物的制備方法，分為下面三個(gè)步驟：
3、步驟a)：將n-alpha-芴甲氧羰基-n-epsilon-叔丁氧羰基-l-賴(lài)氨酸與乙腈混合，加入碳酸鈉水溶液調(diào)節(jié)ph＝8.0-8.5，加入丙烯基溴，并控制ph＝8.0-8.5，反應(yīng)溫度30-35℃，接著降溫至10℃，滴加濃鹽酸脫boc保護(hù)得到n-芴甲氧羰基-l-賴(lài)氨酸1-烯丙基酯鹽酸鹽。
4、步驟b)：將n-芴甲氧羰基-l-賴(lài)氨酸1-烯丙基酯鹽酸鹽、混合溶劑與緩沖劑混合，降溫至0℃，加入碘甲烷，甲基化反應(yīng)得到n-芴甲氧羰基-n′,n′,n′-三甲基-l-賴(lài)氨酸烯丙酯碘化物。
5、步驟c)：將n-芴甲氧羰基-n′,n′,n′-三甲基-l-賴(lài)氨酸烯丙酯碘化物與有機(jī)溶劑混合，加入助劑和四(三苯基磷)鈀，氮?dú)庵脫Q反應(yīng)，經(jīng)后處理得到n-芴甲氧羰基-n′,n′,n′-三甲基-l-賴(lài)氨酸氯化物。
6、反應(yīng)路線表示如下：
7、
8、進(jìn)一步，步驟a)中所述n-alpha-芴甲氧羰基-n-epsilon-叔丁氧羰基-l-賴(lài)氨酸、烯丙基溴和濃鹽酸摩爾比例為1：2.5-3.5：3.0-3.5。
9、進(jìn)一步，步驟b)中所述混合溶劑選自乙腈與甲醇或異丙醇混合溶劑，即乙腈：甲醇或異丙醇體積比為3：1或2：1。
10、進(jìn)一步，步驟b)中所述緩沖劑選自醋酸鈉或醋酸鉀，優(yōu)選醋酸鈉.
11、進(jìn)一步，步驟b)中所述n-芴甲氧羰基-l-賴(lài)氨酸1-烯丙基酯鹽酸鹽、碘甲烷和dipea摩爾比例為1：8.0-8.5：2.7-3.0.
12、進(jìn)一步，步驟c)中所述有機(jī)溶劑選自二氯甲烷與四氫呋喃或甲基四氫呋喃混合溶劑，即二氯甲烷：四氫呋喃或甲基四氫呋喃體積比1：6或1：7。
13、進(jìn)一步，步驟c)中所述助劑選自巴比妥酸或1，3-二甲基巴比妥酸，優(yōu)選巴比妥酸。
14、進(jìn)一步，步驟c)中所述n-芴甲氧羰基-n′,n′,n′-三甲基-l-賴(lài)氨酸烯丙酯碘化物、助劑與四(三苯基磷)鈀摩爾比例為：1：3.5-4.0：0.005-0.01。
15、專(zhuān)利技術(shù)有益：
16、采用上述制備方法制備得到的n-芴甲氧羰基-n′,n′,n′-三甲基-l-賴(lài)氨酸氯化物，經(jīng)濟(jì)性較高，產(chǎn)品純度達(dá)到99％以上，產(chǎn)品的收率高，并且防止fmoc-保護(hù)基團(tuán)的脫除，后處理操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)。
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1.一種N-芴甲氧羰基-N',N',N'-三甲基-L-賴(lài)氨酸氯化物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟A)所述N-alpha-芴甲氧羰基-N-epsilon-叔丁氧羰基-L-賴(lài)氨酸、烯丙基溴和濃鹽酸摩爾比例為1：2.5-3.5：3.0-3.5。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟B)所述混合溶劑選自乙腈與甲醇或異丙醇混合溶劑，即乙腈：甲醇或異丙醇體積比為3：1或2：1。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟B)所述緩沖劑選自醋酸鈉或醋酸鉀。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟B)所述N-芴甲氧羰基-L-賴(lài)氨酸1-烯丙基酯鹽酸鹽、碘甲烷和DIPEA摩爾比例為1：8.0-8.5：2.7-3.0。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟C)所述有機(jī)溶劑選自二氯甲烷與四氫呋喃或甲基四氫呋喃混合溶劑，即二氯甲烷：四氫呋喃或甲基四氫呋喃體積比1：6或1：7。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟C)所述助劑選自巴比妥酸或
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟C)所述N-芴甲氧羰基-N',N',N'-三甲基-L-賴(lài)氨酸烯丙酯碘化物、助劑與四(三苯基磷)鈀摩爾比例為：1：3.5-4.0：0.005-0.01。
...【技術(shù)特征摘要】
1.一種n-芴甲氧羰基-n',n',n'-三甲基-l-賴(lài)氨酸氯化物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟a)所述n-alpha-芴甲氧羰基-n-epsilon-叔丁氧羰基-l-賴(lài)氨酸、烯丙基溴和濃鹽酸摩爾比例為1：2.5-3.5：3.0-3.5。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟b)所述混合溶劑選自乙腈與甲醇或異丙醇混合溶劑，即乙腈：甲醇或異丙醇體積比為3：1或2：1。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟b)所述緩沖劑選自醋酸鈉或醋酸鉀。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟b...
【專(zhuān)利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：于雙，楊明中，崔成才，陳茜，
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人：中科全同大連醫(yī)藥科技有限公司，
類(lèi)型：發(fā)明
國(guó)別省市：
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