【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
【國(guó)外來華專利技術(shù)】
技術(shù)介紹
1、本專利技術(shù)涉及用標(biāo)簽標(biāo)記o-聚糖的領(lǐng)域，所述標(biāo)簽允許通過熒光、通過質(zhì)譜法以及通過紫外吸收進(jìn)行檢測(cè)。
2、在翻譯后通過添加諸如脂質(zhì)或碳水化合物的部分或通過磷酸化修飾由真核細(xì)胞產(chǎn)生的許多蛋白質(zhì)或肽。這些修飾可以顯著影響經(jīng)修飾的蛋白質(zhì)或肽的特性。
3、一組重要的此類翻譯后修飾是添加共價(jià)連接的、線性的或分支的碳水化合物鏈。蛋白質(zhì)-碳水化合物綴合物被稱為糖蛋白，而具有附接的碳水化合物的肽被稱為糖肽。碳水化合物與蛋白質(zhì)或肽附接的點(diǎn)被稱為糖基化位點(diǎn)。所附接的多糖和寡糖有時(shí)在本文中被稱為聚糖。n-聚糖被定義為通過天冬酰胺殘基的氮附接至蛋白質(zhì)或肽的那些，而o-聚糖被定義為通過絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、羥賴氨酸或羥脯氨酸側(cè)鏈的羥基氧附接至蛋白質(zhì)或肽的那些。
4、特定糖蛋白或糖肽上的特定聚糖模式通過產(chǎn)生蛋白質(zhì)或肽的特定細(xì)胞系和細(xì)胞生長(zhǎng)的條件來確定。由于與蛋白質(zhì)或肽綴合的聚糖可能影響對(duì)其功能至關(guān)重要的特征(包括藥代動(dòng)力學(xué)、穩(wěn)定性、生物活性或免疫原性)，在許多用途中，確定存在哪些聚糖是重要的。例如，美國(guó)食品和藥物監(jiān)督管理局(food?and?drug?administration)要求表征附接至治療性糖蛋白和疫苗的碳水化合物，以顯示物質(zhì)的組成和制造的一致性，導(dǎo)致需要對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行廣泛表征。碳水化合物譜的分析對(duì)于重組蛋白或肽生產(chǎn)中的質(zhì)量控制也是重要的，其中碳水化合物譜的變化可以指示系統(tǒng)中的應(yīng)激，如果不及時(shí)糾正，則可能需要丟棄商業(yè)規(guī)模的一發(fā)酵罐的昂貴蛋白質(zhì)。
5、當(dāng)前用于確定目的糖蛋白或糖肽上存在哪些
6、不幸的是，只有有限的通過酶釋放o-聚糖的手段是可用的。二糖gal-β(1,3)galnac可以通過酶o-糖苷酶酶促釋放，但通常沒有釋放具有分支鏈的完整o-聚糖的酶促手段。因此，已經(jīng)開發(fā)了許多通過使用化學(xué)品釋放這些更復(fù)雜的o-聚糖的方法。一旦o-聚糖已經(jīng)從糖蛋白或糖肽被釋放，典型地將它們?cè)谄溥€原末端進(jìn)行標(biāo)記，經(jīng)受高壓液相色譜法以分離標(biāo)記的聚糖，并且進(jìn)行分析以確定從目的糖蛋白或糖肽釋放的聚糖的類型和量。
7、大多數(shù)傳統(tǒng)的化學(xué)去糖基化技術(shù)涉及在相對(duì)苛刻的條件下對(duì)相對(duì)大量的起始樣品進(jìn)行化學(xué)去糖基化。例如，相對(duì)早期的用于釋放o-聚糖的方案要求在0℃下與三氟甲磺酸一起孵育0.5至2小時(shí)，隨后在-20℃下將酸用水性吡啶中和。carlson方法(許多人認(rèn)為其是釋放和分析o-聚糖的黃金標(biāo)準(zhǔn))始于20世紀(jì)60年代末，并且依賴于β-消除，即使用氫氧化鈉在堿性條件下釋放o-聚糖結(jié)合使用硼氫化鈉進(jìn)行還原、在45℃下孵育14-16小時(shí)并且固相萃取以富集聚糖，用于通過液相色譜-質(zhì)譜法(“l(fā)c-ms”)進(jìn)行分析。參見例如，carlson,d.,j.biol.chem.,243:616-626(1968)。maniatis方法需要1+毫克糖蛋白并且依賴于使用二甲胺的β-消除，在70℃下微波輻射70分鐘，以及羥基的完全甲基化，以通過基質(zhì)輔助激光解吸電離質(zhì)譜法(maldi-ms)進(jìn)行分析。參見例如，maniatis等人,anal.chem.82:2421-2425(2010)。merry等人的方法使用肼(在呈無水形式時(shí)有毒且不穩(wěn)定的化合物)，需要>40μg的糖蛋白，導(dǎo)致可能存在于o-聚糖核心中的乙酰基的不必要的去除，在60℃下孵育6小時(shí)，以及用熒光團(tuán)進(jìn)行再乙酰化和還原末端標(biāo)記的附加步驟。參見例如，merry等人,anal.biochem.304:91-99(2002)。其他人報(bào)告了使用釋放o-聚糖，其使用β-消除、含0.2m三乙胺的50％肼溶液、隨后用對(duì)氨基苯甲酸乙酯標(biāo)記的組合，并且發(fā)現(xiàn)在最佳孵育時(shí)間為48小時(shí)的情況下有良好結(jié)果。參見，kisiel等人,toxicology?mechanisms?and?methods,18:503-07(2008)；kisiel等人,acta?biochemica?polonica,1999,46(3):753-757。
8、最近，已經(jīng)開發(fā)了幾種“一鍋法”程序。一種這樣的一鍋法方法使用用二甲胺的β-消除與用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮或“pmp”的還原端標(biāo)記的組合。所述方法要求將非常少的樣品(約5μg)與40％二甲胺在0.5m?pmp中在甲醇中在85℃下孵育2小時(shí)，隨后干燥樣品并且固相萃取所釋放的聚糖以濃縮它們用于液相色譜-質(zhì)譜法(lc-ms)分析。參見例如，zauner等人,biochim.biophys.acto.1820:142o-1428(2012)(以下，“zauner”)。wang等人(proteomics?11:4229-4242(2011))和furukawa等人(anal.chem,83:906o-9067(2011))是用于釋放o-聚糖并且用pmp標(biāo)記它們的其他一鍋法β消除方法。wuhrer等人傳授了他們堅(jiān)稱的“用于從糖蛋白釋放以及標(biāo)記o-聚糖的一鍋法方法”...包括在標(biāo)記劑的存在下使糖蛋白與胺(例如，甲胺、二甲胺或氨、nh3)接觸”。摘要，wuhrer等人，wo?2011/038874。最近，在共同擁有的pct申請(qǐng)(公開為wo?2021/119333)中披露了使用pmp作為標(biāo)簽的一鍋法程序。
9、從糖蛋白或糖肽釋放的n-聚糖典型地用既可通過熒光又可通過質(zhì)譜法(“ms”)檢測(cè)的標(biāo)簽(諸如(agilent?technologies,inc.，加利福尼亞州圣克拉拉))標(biāo)記。這允許通過檢測(cè)其熒光信號(hào)來定量n-聚糖，并且然后通過ms分析確定其分子種類。不幸的是，沒有單一的組合了所有希望特征的用于o-聚糖的可用標(biāo)簽。雖然標(biāo)簽2-氨基苯甲酰胺(“2-ab”)為o-聚糖提供了可通過熒光和ms兩者檢測(cè)的標(biāo)簽，但它不能用于一鍋釋放且標(biāo)記方法。并且，雖然pmp可以用于此類一鍋法方法并且為o-聚糖提供可通過ms檢測(cè)的信號(hào)，但它不是發(fā)熒光的。希望具有這樣的試劑，所述試劑可以用于一鍋法方法以釋放并且標(biāo)記o-聚糖，并且所述試劑將提供具有標(biāo)簽的所得的標(biāo)記的o-聚糖衍生物，所述標(biāo)簽可以通過uv、通過熒光以及通過ms檢測(cè)。
10、仍需要這樣的試劑，所述試劑可以用于標(biāo)記從糖蛋白或糖肽釋放的o-聚糖，以便它們可以通過uv、熒光和ms來檢測(cè)；可以用于一鍋法程序；僅需要少量樣品體積；僅需要中等反應(yīng)條件；僅需要很短的孵育時(shí)間；以及可以本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.一種發(fā)熒光的標(biāo)記O-聚糖的化合物，所述化合物包含
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的發(fā)熒光的標(biāo)記O-聚糖的化合物，其中將所述吡唑啉酮核心共價(jià)連接至所述香豆素核心的所述接頭由以下構(gòu)成：
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的發(fā)熒光的標(biāo)記O-聚糖的化合物，其中所述橋接基團(tuán)獨(dú)立地選自酯基、胺基、烷基、芐基和硫代酸酯基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的發(fā)熒光的標(biāo)記O-聚糖的化合物，其中將所述吡唑啉酮核心共價(jià)連接至所述香豆素核心的所述接頭由四個(gè)或更少個(gè)碳原子構(gòu)成。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的發(fā)熒光的標(biāo)記O-聚糖的化合物，其中所述接頭是一個(gè)碳原子。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的發(fā)熒光的標(biāo)記O-聚糖的化合物，其中所述吡唑啉酮通過接頭共價(jià)連接至所述香豆素核心，所述接頭具有以從所述吡唑啉酮核心至所述香豆素核心的順序的第一碳原子、第二碳原子和從所述第二碳原子至所述香豆素核心的原子的醚連接中的氧原子的鏈。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的發(fā)熒光的標(biāo)記O-聚糖的化合物，其中所述吡唑啉酮通過接頭共價(jià)連接至所述香豆素核心，所述接頭具有以從所述吡唑啉酮核心至所述香豆素核心的順序
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的發(fā)熒光的標(biāo)記O-聚糖的化合物，其中所述吡唑啉酮通過接頭共價(jià)連接至所述香豆素核心，所述接頭具有至多九個(gè)碳原子和芐基的鏈。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的發(fā)熒光的標(biāo)記O-聚糖的化合物，其中所述吡唑啉酮通過接頭共價(jià)連接至所述香豆素核心，所述接頭具有以從所述吡唑啉酮核心起的順序的一個(gè)碳原子和芐基。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的發(fā)熒光的標(biāo)記O-聚糖的化合物，其中所述吡唑啉酮通過接頭共價(jià)連接至所述香豆素核心，所述接頭具有碳原子和攜帶羰基的碳原子的鏈，前提是至少一個(gè)未經(jīng)取代的碳原子被布置在每個(gè)攜帶羰基的碳原子之間。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的發(fā)熒光的標(biāo)記O-聚糖的化合物，其中所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)：結(jié)構(gòu)3，
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的發(fā)熒光的標(biāo)記O-聚糖的化合物，其中所述化合物是結(jié)構(gòu)3的化合物，并且具有結(jié)構(gòu)1的結(jié)構(gòu)：
13.根據(jù)權(quán)利要求11所述的發(fā)熒光的標(biāo)記O-聚糖的化合物，其中所述化合物是結(jié)構(gòu)4的化合物，并且具有以下結(jié)構(gòu)：
14.一種用于釋放、標(biāo)記以及任選地分析存在于選定的目的糖綴合物上的O-聚糖的方法，所述方法包括：在容器中將所述選定的目的糖綴合物在包含發(fā)熒光的標(biāo)記O-聚糖的化合物的溶液中在0℃至100℃的溫度下孵育約10分鐘與23小時(shí)之間的時(shí)間，所述化合物包含吡唑啉酮核心、接頭和香豆素核心，
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中將所述吡唑啉酮核心共價(jià)連接至所述香豆素核心的所述接頭由以下構(gòu)成：
16.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述發(fā)熒光的標(biāo)記O-聚糖的化合物具有以下結(jié)構(gòu)：結(jié)構(gòu)3，
17.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述發(fā)熒光的標(biāo)記O-聚糖的化合物是結(jié)構(gòu)3的化合物，并且具有結(jié)構(gòu)1的結(jié)構(gòu)：
18.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述發(fā)熒光的標(biāo)記O-聚糖的化合物是結(jié)構(gòu)4的化合物，并且具有以下結(jié)構(gòu)：
19.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述發(fā)熒光的標(biāo)記O-聚糖的化合物的所述接頭包含總計(jì)四個(gè)或更少個(gè)碳和橋接基團(tuán)，并且所述溶液是完全水性的。
20.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述發(fā)熒光的標(biāo)記O-聚糖的化合物的所述接頭包含總計(jì)四個(gè)或更少個(gè)碳和橋接基團(tuán)，并且所述溶液是水溶液和有機(jī)溶劑的混合物，所述有機(jī)溶劑是極性質(zhì)子有機(jī)溶劑或非質(zhì)子有機(jī)溶劑。
21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述有機(jī)溶劑是極性質(zhì)子有機(jī)溶劑。
22.根據(jù)權(quán)利要求21所述的方法，其中所述極性質(zhì)子有機(jī)溶劑是甲醇。
23.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述發(fā)熒光的標(biāo)記O-聚糖的化合物的所述接頭包含總計(jì)五至十個(gè)碳和橋接基團(tuán)，并且所述溶液包含至多90％極性非質(zhì)子有機(jī)溶劑。
24.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述溶液進(jìn)一步包含有效量的堿。
25.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述水溶液和有機(jī)溶劑的混合物進(jìn)一步包含有效量的堿。
26.根據(jù)權(quán)利要求23所述的方法，其中包含至多90％極性非質(zhì)子有機(jī)溶劑的所述溶液進(jìn)一步包含有效量的堿。
27.根據(jù)權(quán)利要求24所述的方法，其中所述堿是二甲胺、三乙胺(“TEA”)、氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鋰和氫氧化銨。
28.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，...
【技術(shù)特征摘要】
【國(guó)外來華專利技術(shù)】
1.一種發(fā)熒光的標(biāo)記o-聚糖的化合物，所述化合物包含
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的發(fā)熒光的標(biāo)記o-聚糖的化合物，其中將所述吡唑啉酮核心共價(jià)連接至所述香豆素核心的所述接頭由以下構(gòu)成：
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的發(fā)熒光的標(biāo)記o-聚糖的化合物，其中所述橋接基團(tuán)獨(dú)立地選自酯基、胺基、烷基、芐基和硫代酸酯基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的發(fā)熒光的標(biāo)記o-聚糖的化合物，其中將所述吡唑啉酮核心共價(jià)連接至所述香豆素核心的所述接頭由四個(gè)或更少個(gè)碳原子構(gòu)成。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的發(fā)熒光的標(biāo)記o-聚糖的化合物，其中所述接頭是一個(gè)碳原子。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的發(fā)熒光的標(biāo)記o-聚糖的化合物，其中所述吡唑啉酮通過接頭共價(jià)連接至所述香豆素核心，所述接頭具有以從所述吡唑啉酮核心至所述香豆素核心的順序的第一碳原子、第二碳原子和從所述第二碳原子至所述香豆素核心的原子的醚連接中的氧原子的鏈。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的發(fā)熒光的標(biāo)記o-聚糖的化合物，其中所述吡唑啉酮通過接頭共價(jià)連接至所述香豆素核心，所述接頭具有以從所述吡唑啉酮核心至所述香豆素核心的順序的第一碳原子、第二碳原子和從所述第二碳原子至所述香豆素核心的原子的酰胺連接中的氮原子的鏈，其中氮原子能夠具有氫或具有式cnh2n+1的烷基的取代基。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的發(fā)熒光的標(biāo)記o-聚糖的化合物，其中所述吡唑啉酮通過接頭共價(jià)連接至所述香豆素核心，所述接頭具有至多九個(gè)碳原子和芐基的鏈。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的發(fā)熒光的標(biāo)記o-聚糖的化合物，其中所述吡唑啉酮通過接頭共價(jià)連接至所述香豆素核心，所述接頭具有以從所述吡唑啉酮核心起的順序的一個(gè)碳原子和芐基。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的發(fā)熒光的標(biāo)記o-聚糖的化合物，其中所述吡唑啉酮通過接頭共價(jià)連接至所述香豆素核心，所述接頭具有碳原子和攜帶羰基的碳原子的鏈，前提是至少一個(gè)未經(jīng)取代的碳原子被布置在每個(gè)攜帶羰基的碳原子之間。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的發(fā)熒光的標(biāo)記o-聚糖的化合物，其中所述化合物具有以下結(jié)構(gòu)：結(jié)構(gòu)3，
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的發(fā)熒光的標(biāo)記o-聚糖的化合物，其中所述化合物是結(jié)構(gòu)3的化合物，并且具有結(jié)構(gòu)1的結(jié)構(gòu)：
13.根據(jù)權(quán)利要求11所述的發(fā)熒光的標(biāo)記o-聚糖的化合物，其中所述化合物是結(jié)構(gòu)4的化合物，并且具有以下結(jié)構(gòu)：
14.一種用于釋放、標(biāo)記以及任選地分析存在于選定的目的糖綴合物上的o-聚糖的方法，所述方法包括：在容器中將所述選定的目的糖綴合物在包含發(fā)熒光的標(biāo)記o-聚糖的化合物的溶液中在0℃至100℃的溫度下孵育約10分鐘與23小時(shí)之間的時(shí)間，所述化合物包含吡唑啉酮核心、接頭和香豆素核心，
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中將所述吡唑啉酮核心共價(jià)連接至所述香豆素核心的所述接頭由以下構(gòu)成：
16.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述發(fā)熒光的標(biāo)記o-聚糖的化合物具有以下結(jié)構(gòu)：結(jié)構(gòu)3，
17.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述發(fā)熒光的標(biāo)記o-聚糖的化合物是結(jié)構(gòu)3的化合物，并且具有結(jié)構(gòu)1的結(jié)構(gòu)：
18.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述發(fā)熒光的標(biāo)記o-聚糖的化合物是結(jié)構(gòu)4的化合物，并且具有以下結(jié)構(gòu)：
19.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述發(fā)熒光的標(biāo)記o-聚糖的化合物的所述接頭包含總計(jì)四個(gè)或更少個(gè)碳和橋接基團(tuán)，并且所述溶液是完全水性的。
20.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述發(fā)熒光的標(biāo)記o-聚糖的化合物的所述接頭包含總計(jì)四個(gè)或更少個(gè)碳和橋接基團(tuán)，并且所述溶液是水溶液和有機(jī)溶劑的混合物，所述有機(jī)溶劑是極性質(zhì)子有機(jī)溶劑或非質(zhì)子有機(jī)溶劑。
21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述有機(jī)溶劑是極性質(zhì)子有機(jī)溶劑。
22.根據(jù)權(quán)利要求21所述的方法，其中所述極性質(zhì)子有機(jī)溶劑是甲醇。
23.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述發(fā)熒光的標(biāo)記o-聚糖的化合物的所述接頭包含總計(jì)五至十個(gè)碳和橋接基團(tuán)，并且所述溶液包含至多90％極性非質(zhì)子有機(jī)溶劑。
24.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述溶液進(jìn)一步包含有效量的堿。
25.根據(jù)權(quán)利要求20所述的方法，其中所述水溶液和有機(jī)溶劑的混合物進(jìn)一步包含有效量的堿。
26.根據(jù)權(quán)利要求23所述的方法，其中包含至多90％極性非質(zhì)子有機(jī)溶劑的所述溶液進(jìn)一步包含有效量的堿。
27.根據(jù)權(quán)利要求24所述的方法，其中所述堿是二甲胺、三乙胺(“tea”)、氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鋰和氫氧化銨。
28.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中所述堿是二甲胺、三乙胺(“tea”)、氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鋰、氫氧化銨或這些中的兩種或更多種的組合。
29.根據(jù)權(quán)利要求26所述的方法，其中所述堿是二甲胺、三乙胺(“tea”)、氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鋰、氫氧化銨或這些中的兩種或更多種的組合。
30.根據(jù)權(quán)利要求27所述的方法，其中所述堿是tea。
31.根據(jù)權(quán)利要求28所述的方法，其中所述堿是tea。
32.根據(jù)權(quán)利要求29所述的方法，其中所述堿是tea。
33.根據(jù)權(quán)利要求30所述的方法，其中所述tea以0.5m至5m的濃度存在。
34.根據(jù)權(quán)利要求31所述的方法，其中所述tea以0.5m至5m的濃度存在。
35.根據(jù)權(quán)利要求32所述的方法，其中所述tea以0.5m至5m的濃度存在。
36.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述發(fā)熒光的標(biāo)記o-聚糖的化合物以0.05m至5m的濃度存在。
37.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中將所述糖綴合物在所述水溶液中在0℃-100℃的溫度下孵育約10分鐘與23小時(shí)之間的時(shí)間。
38.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述選定的目的糖綴合物以4μg與1000μg之間的量存在于所述溶液中。
39.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述選定的目的糖綴合物以20μg與800μg之間的量存在于所述溶液中。
40.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述選定的目的糖綴合物是糖蛋白或糖肽。
41.根據(jù)權(quán)利要求40所述的方法，其中所述選定的糖蛋白或糖肽是糖蛋白。
42.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述水溶液不含有肼。
43.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述孵育時(shí)間是10至約30分鐘。
44.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中孵育所述水溶液的所述溫度是70℃-90℃。
45.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中孵育所述水溶液的所述溫度是80℃±5℃。
46.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，其中所述容器是多孔板。
47.根據(jù)權(quán)利要求46所述的方法，其中所述多孔板是96孔板。
48.根據(jù)權(quán)利要求14所述的方法，所述方法進(jìn)一步包括分析所述釋放的、標(biāo)記的o-聚糖。
49.根據(jù)權(quán)利要求48所述的方法，其中所述分析包括通過液相色譜法分離所述釋放的、標(biāo)記的o-聚糖。
50.根據(jù)權(quán)利要求48所述的方法，進(jìn)一步其中所述分析包括通過熒光分析所述釋放的、標(biāo)記的、分離的o-聚糖。
51.根據(jù)權(quán)利要求48所述的方法，進(jìn)一步其中所述分析包括通過質(zhì)譜法分析所述釋放的、標(biāo)記的、分離的o-聚糖。
52.根據(jù)權(quán)利要求48所述的方法，其中所述分析包括通過液相色譜法分離所述釋放的、標(biāo)記的o-聚糖并且通過熒光、紫外光、質(zhì)譜法或這些中的兩種或更多種的組合分析所述釋放的、標(biāo)記的和分離的o-聚糖。
53.一種組合物，所述組合物包含目的糖綴合物和包含以下的溶液：
54.根據(jù)權(quán)利要求53所述的組合物，其中所述發(fā)熒光的標(biāo)記o-聚糖的化合物具有以下結(jié)構(gòu)：
55.根據(jù)權(quán)利要求54所述的...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：A·加勒莫，LC·胡，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：安捷倫科技有限公司，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：
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