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    臍血單個核細胞的超低溫保存方法及凍存液套裝技術

    技術編號:43219103 閱讀:24 留言:0更新日期:2024-11-05 17:11
    一種臍血單個核細胞的超低溫保存方法,包括如下步驟:將CBMC細胞放入A液中孵育,進行預處理,其中所述A液含有緩沖液以及有效量的Apronal和Citropten;將經過A液預處理的CBMC細胞放入B液中重懸,進行超低溫保存,其中所述B液含有低溫保護劑和有效量的Elafibranor。一種臍血單個核細胞的凍存液套裝,包括:A液,含有緩沖液以及有效量的Apronal和Citropten;B液,含有低溫保護劑和有效量的Elafibranor。本發明專利技術提供了一種通過助休眠保護作用預處理及改良凍存液抗氧化維穩態來實現CBMC細胞超低溫保存的保存方法以及凍存液套裝。使用本發明專利技術的本凍存液套裝進行CBMC細胞凍存,可顯著提高復蘇后的CBMC細胞活力。

    【技術實現步驟摘要】

    本專利技術涉及生物醫藥技術,特別是涉及一種臍血單個核細胞的超低溫保存方法及凍存液套裝


    技術介紹

    1、臨床試驗表明,細胞療法是安全有效的,支持細胞在許多治療環境中使用。而超低溫保存及復蘇使用是開發和制備細胞治療方法的一個關鍵過程,為了開發細胞產品,細胞凍存復蘇過程須進行優化。超低溫保存會顯著降低復蘇后臍血單個核細胞的活力,并且對臍血單個核細胞(cord?blood?mononuclear?cell,cbmc)功能的影響未知。

    2、細胞的凍存復蘇過程會導致細胞損傷,導致細胞活力和功能下降。cbmc細胞具有作為異體細胞前體細胞有著治療應用的巨大潛力,因而超低溫保存過程對復蘇制備方案至關重要。

    3、目前細胞療法的臨床試驗血樣來源主要分為新鮮采集樣本和凍存復蘇樣本,目前市面上凍存液的超低溫保存對復蘇后細胞的活性活率有顯著影響,大多數凍存的細胞在復蘇后4小時內發生大面積凋亡,到復蘇后24小時,只有約一半的超低溫保存的細胞存活到24小時。

    4、需要說明的是,在上述
    技術介紹
    部分公開的信息僅用于對本申請的背景的理解,因此可以包括不構成對本領域普通技術人員已知的現有技術的信息。


    技術實現思路

    1、本專利技術的主要目的在于克服上述
    技術介紹
    的缺陷,提供一種臍血單個核細胞的超低溫保存方法及凍存液套裝,提高cbmc細胞凍存復蘇后的活力。

    2、為實現上述目的,本專利技術采用以下技術方案:

    3、一種臍血單個核細胞的超低溫保存方法,包括如下步驟:

    4、將cbmc細胞放入a液中孵育,進行預處理,其中所述a液含有緩沖液以及有效量的apronal和citropten;

    5、將經過a液預處理的cbmc細胞放入b液中重懸,進行超低溫保存,其中所述b液含有低溫保護劑和有效量的elafibranor。

    6、進一步地,所述a液含有1mm?apronal和5mm?citropten,ph值調整至7.2-7.5。

    7、進一步地,所述a液的ph值調整至7.4。

    8、進一步地,所述b液含有質量百分比濃度2.5%-7.5%的elafibranor。

    9、進一步地,所述b液含有質量百分比濃度5%的elafibranor,所述低溫保護劑為me2so。

    10、一種臍血單個核細胞的凍存液套裝,包括:

    11、a液,含有緩沖液以及有效量的apronal和citropten;

    12、b液,含有低溫保護劑和有效量的elafibranor。

    13、進一步地,所述a液含有1mm?apronal和5mm?citropten,ph值調整至7.2-7.5。

    14、進一步地,所述a液的ph值調整至7.4。

    15、進一步地,所述b液含有質量百分比濃度2.5%-7.5%的elafibranor。

    16、進一步地,所述b液含有質量百分比濃度5%的elafibranor,所述低溫保護劑為me2so。

    17、本專利技術具有如下有益效果:

    18、本專利技術提供了一種通過助休眠保護作用預處理及改良凍存液抗氧化維穩態來實現cbmc細胞超低溫保存的保存方法以及凍存液套裝。使用本專利技術的本凍存液套裝進行cbmc細胞凍存,cbmc細胞復蘇后可顯著提高復蘇細胞的活力。

    19、本專利技術實施例中的其他有益效果將在下文中進一步述及。

    本文檔來自技高網
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    【技術保護點】

    1.一種臍血單個核細胞的超低溫保存方法,其特征在于,包括如下步驟:

    2.根據權利要求1所述的臍血單個核細胞的超低溫保存方法,其特征在于,所述A液含有1mM?Apronal和5mM?Citropten,pH值調整至7.2-7.5。

    3.根據權利要求2所述的臍血單個核細胞的超低溫保存方法,其特征在于,所述A液的pH值調整至7.4。

    4.根據權利要求1至3任一項所述的臍血單個核細胞的超低溫保存方法,其特征在于,所述B液含有質量百分比濃度2.5%-7.5%的Elafibranor。

    5.根據權利要求4所述的臍血單個核細胞的超低溫保存方法,其特征在于,所述B液含有質量百分比濃度5%的Elafibranor,所述低溫保護劑為Me2SO。

    6.一種臍血單個核細胞的凍存液套裝,其特征在于,包括:

    7.根據權利要求6所述的臍血單個核細胞的凍存液套裝,其特征在于,所述A液含有1mMApronal和5mM?Citropten,pH值調整至7.2-7.5。

    8.根據權利要求7所述的臍血單個核細胞的凍存液套裝,其特征在于,所述A液的pH值調整至7.4。

    9.根據權利要求6至8任一項所述的臍血單個核細胞的凍存液套裝,其特征在于,所述B液含有質量百分比濃度2.5%-7.5%的Elafibranor。

    10.根據權利要求9所述的臍血單個核細胞的凍存液套裝,其特征在于,所述B液含有質量百分比濃度5%的Elafibranor,所述低溫保護劑為Me2SO。

    ...

    【技術特征摘要】

    1.一種臍血單個核細胞的超低溫保存方法,其特征在于,包括如下步驟:

    2.根據權利要求1所述的臍血單個核細胞的超低溫保存方法,其特征在于,所述a液含有1mm?apronal和5mm?citropten,ph值調整至7.2-7.5。

    3.根據權利要求2所述的臍血單個核細胞的超低溫保存方法,其特征在于,所述a液的ph值調整至7.4。

    4.根據權利要求1至3任一項所述的臍血單個核細胞的超低溫保存方法,其特征在于,所述b液含有質量百分比濃度2.5%-7.5%的elafibranor。

    5.根據權利要求4所述的臍血單個核細胞的超低溫保存方法,其特征在于,所述b液含有質量百分比濃度5%的elafibranor,所述低溫保護劑為me2...

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:劉佳
    申請(專利權)人:深圳市中佳生物醫療科技有限公司
    類型:發明
    國別省市:

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