【技術實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術具體涉及一種e3泛素連接酶trim7及其在代謝相關脂肪性肝病上的應用。
技術介紹
1、代謝相關脂肪性肝病(metabolic?dysfunction-associated?steatotic?liverdisease,masld)，曾用名非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic?fattyliverdisease,nafld)，是一類與超重、肥胖、胰島素抵抗(ir)和代謝功能障礙等密切相關的復雜慢性肝病，已成為影響兒童和成人肝病的最常見病因。
2、masld是一組高度異質(zhì)性的臨床病理肝病，涵蓋單純性脂肪肝(nafl)、代謝功能障礙相關脂肪性肝炎(mash)、肝硬化、肝癌等一系列疾病譜。通常情況下，nafl被認為是一種良性可逆的、非進展性的肝病，而mash作為masld的一種極端進展形式，可導致進行性肝纖維化、肝硬化甚至肝細胞癌和肝相關性死亡的發(fā)生。除了肝臟相關的并發(fā)癥之外，masld還會伴發(fā)心腦血管疾病、2型糖尿病、慢性腎病、腫瘤等一系列肝外疾病，危害巨大。據(jù)統(tǒng)計，masld影響著全球多達1/3的成年人口，在超重和肥胖人群中患病率更是高達50.7％；隨著居民膳食結(jié)構(gòu)和生活方式的改變，我國超重和肥胖人口比例快速增長，這將嚴重威脅著國人的健康并給社會帶來巨大的臨床、經(jīng)濟負擔。盡管對masld有了廣泛研究，但由于其發(fā)病的復雜性使得對masld的發(fā)病機制尚未完全闡明，迄今為止仍未有批準用于治療masld的臨床藥物。因此，面臨著全球范圍內(nèi)masld激增的巨大挑戰(zhàn)，深入揭示masld發(fā)生發(fā)展的分子機制、尋找潛在的藥
3、研究表明，蛋白翻譯后修飾通過調(diào)控蛋白分子的穩(wěn)定性、酶活性、蛋白募集等作用廣泛參與代謝系統(tǒng)的調(diào)控；然而，蛋白翻譯后修飾的異常與代謝性疾病之間也存在密切關系。泛素化修飾作為最常見的一種蛋白翻譯后修飾，受到e3泛素連接酶、去泛素化酶的協(xié)同作用精確調(diào)節(jié)動態(tài)可逆的泛素化過程，從而維持機體穩(wěn)態(tài)。因此，深入探究肝臟內(nèi)關鍵的泛素化調(diào)控蛋白(e3泛素連接酶和去泛素化酶)及其作用機制，將有助于建立能夠阻止或逆轉(zhuǎn)masld進展的治療新靶點。
4、trim7是最近幾年被鑒定出的trim家族新成員，目前有關其功能作用的文獻研究主要集中在抗病毒、抗細菌先天免疫反應方向。盡管在肝癌中有相關研究，但trim7表達呈現(xiàn)出差異性變化，提示肝癌發(fā)生的異質(zhì)性以及trim7的復雜調(diào)控作用。然而，關于trim7分子在masld中的表達情況、生物學效應和分子機制，目前尚無研究報道。
5、dusp10又稱為mkp5，是一個在細胞質(zhì)和細胞核均有分布且選擇作用于sapk/jnk和p38mapk的雙特異性磷酸酶dusp家族成員，由n端的cdc25樣非催化結(jié)構(gòu)域和c端磷酸化催化結(jié)構(gòu)域組成，其既可以介導絲氨酸/蘇氨酸殘基去磷酸化又可使酪氨酸殘基去磷酸化。研究表明，dusp10在肝臟、肌肉等胰島素應答組織中大量表達，并在代謝、炎癥以及免疫穩(wěn)態(tài)等生命活動過程中發(fā)揮重要作用。深入探究trim7調(diào)控dusp10的具體分子機制，為masld臨床治療提供新的策略和潛在靶點。
技術實現(xiàn)思路
1、針對現(xiàn)有技術的不足，本專利技術的目的在于提供一種e3泛素連接酶trim7及其在代謝相關脂肪性肝病上的應用。本專利技術在前期進行了基于表型的高通量篩選分析及鑒定，發(fā)現(xiàn)e3泛素連接酶trim7是調(diào)控masld的發(fā)生發(fā)展的關鍵分子，闡明了trim7依賴其e3泛素連接酶活性調(diào)控dusp10蛋白穩(wěn)定性介導masld的發(fā)生發(fā)展。深入探究trim7調(diào)控dusp10的具體分子機制，檢測了trim7在動物、細胞、臨床masld樣本中的表達，并利用肝細胞特異性基因敲除、過表達技術進一步探究trim7在兩種不同的masld動物模型中的功能作用，從而進一步明確trim7通過dusp10促進masld發(fā)生發(fā)展，為masld臨床治療提供新的策略和潛在靶點。
2、為解決現(xiàn)有技術問題，本專利技術采取的技術方案為：
3、一種代謝相關脂肪性肝病的生物標記物，其特征在于，所述標記物為trim7，其序列如seq?id?no.1所示。
4、seq?id?no.1：
5、maavgprtgpgtgaealalaaelqgeatcsiclelfrepvsvecghsfcracigrcwerpgagsvgaatrappfplpcpqcreparpsqlrpnrqlaavatllrrfslpaaapgehgsqaaaaraaaarcgqhgepfklycqddgraicvvcdrarehrehavlpldeavqeakellesrlrvlkkeledcevfrstekkeskellkqmaaeqekvgaefqalraflveqegrllgrleelsrevaqkqnenlaqlgveitqlsklssqiqetaqkpdldflqefkstlsrcsnvpgpkpttvssemknkvwnvslktfvlkgmlkkfkedlrgelekeekveltldpdtanprlilsldlkgvrlgeraqdlpnhpcrfdtntrvlascgfssgrhhwevevgskdgwafgvaresvrrkgltpftpeegvwalqlnggqywavtspersplscghlsrvrvaldlevgavsfyavedmrhlytfrvnfqervfplfsvcstgtylriwp
6、檢測上述的生物標記物trim7表達水平的試劑在制備診斷代謝相關脂肪性肝病試劑盒上的應用。
7、一種試劑盒，含有檢測上述生物標記物trim7表達水平的反應試劑。
8、上述試劑盒在制備診斷代謝相關脂肪性肝病產(chǎn)品上的應用。
9、上述的生物標記物trim7在篩選、制備預防或治療代謝相關脂肪性肝病治療藥物上的應用。
10、一種藥物組合物，含有調(diào)控上述的生物標記物trim7表達的抑制劑。
11、作為改進的是，還包括其他藥類以及藥學上可接受的載體和/或輔料。
12、有益效果：
13、本專利技術基于表型的高通量篩選分析，通過構(gòu)建了飲食因素和遺傳因素誘導的兩種masld小鼠模型，利用轉(zhuǎn)錄組學測序(rna-seq)并結(jié)合生物信息學方法分析兩種小鼠模型肝臟組織中均有顯著性表達差異的候選基因，發(fā)現(xiàn)共有14個泛素化調(diào)控蛋白；進一步提高設置基因表達差異的閾值(log2[fold?change]≥1.5或fold?change≥2.83)，進一步確認只有e3泛素連接酶trim7基因在兩種masld小鼠模型肝臟中的表達上調(diào)倍數(shù)均大于2.83倍。從動物、細胞、臨床樣本三個水平明確trim7表達與masld發(fā)生發(fā)展的相關性，確認trim7在masld肝組織或肝細胞中的表達水平較正常組明顯升高。
14、本專利技術以肝細胞特異性trim7敲除小鼠(trim7-hko)及其同窩對照小鼠(flox/flox)為實驗對象，通過高脂飲食(hfd)或高脂高糖高膽固醇飲食(hffc)誘導兩種不同本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術保護點】
1.一種代謝相關脂肪性肝病的生物標記物，其特征在于，所述標記物為TRIM7，其序列如SEQID?NO.1所示。
2.檢測權(quán)利要求1所述的生物標記物TRIM7表達水平的試劑在制備診斷代謝相關脂肪性肝病試劑盒上的應用。
3.一種試劑盒，其特征在于，含有檢測權(quán)利要求1所述的標記物TRIM7表達水平的反應試劑。
4.權(quán)利要求3所述的試劑盒在制備診斷代謝相關脂肪性肝病產(chǎn)品上的應用。
5.基于權(quán)利要求1所述的生物標記物TRIM7在篩選、制備預防或治療代謝相關脂肪性肝病治療藥物上的應用。
6.一種藥物組合物，其特征在于，含有調(diào)控權(quán)利要求1所述的生物標記物TRIM7表達的抑制劑。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的藥物組合物，其特征在于，還包括其他藥類以及藥學上可接受的載體和/或輔料。
【技術特征摘要】
1.一種代謝相關脂肪性肝病的生物標記物，其特征在于，所述標記物為trim7，其序列如seqid?no.1所示。
2.檢測權(quán)利要求1所述的生物標記物trim7表達水平的試劑在制備診斷代謝相關脂肪性肝病試劑盒上的應用。
3.一種試劑盒，其特征在于，含有檢測權(quán)利要求1所述的標記物trim7表達水平的反應試劑。
4.權(quán)利要求3所述的試劑盒在...
【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：閆鳳娟，丁涵，張寧，黃美欣，嚴雨潔，
申請(專利權(quán))人：江蘇師范大學，
類型：發(fā)明
國別省市：
還沒有人留言評論。發(fā)表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。