【技術實現步驟摘要】
本申請涉及微生物應用，具體涉及一種抗氧化劑提高裂壺藻epa產量的生產方法及其應用。
技術介紹
1、二十二碳五烯酸(epa)是一種重要的ω-3長鏈多不飽和脂肪酸，epa具有抗凝血、降血脂、預防心血管疾病和動脈粥樣硬化的功能，此外epa具有明顯的抗脂質氧化的作用,可以減輕過氧脂質對細胞的損傷。epa在人體內轉化時間長、產量低，因此需要通過日常膳食或特定的膳食補充劑補充。目前，人們對健康的重視程度日益升高，而epa因其重要的生理功能在食品、醫藥和飼料喂養等各個領域具有十分廣闊的應用前景。目前市售epa補充劑的原料來源主要是魚油，但魚油生產提取復雜、價格昂貴、帶有不舒服的魚腥味以及生產過程污染較大，因此開發一種提取簡單、綠色的epa原料來源十分重要。微生物生產epa近年來成為了研究熱點，微生物來源的epa具有生產安全，不受季節限定等優點，被認為是未來最有潛力的epa生產來源。
2、裂壺藻(schizochytrium?limacinum)又稱裂殖壺菌，是一類高產dha的海洋微藻類，同時也能生產epa和n-3dpa等多不飽和脂肪酸，但野生型菌株epa和n-3dpa的產量低、無法滿足產業化生產所需。因此，如何提高菌株的epa產量使其能產業化是相關研究人員和公司所關注的重點。許多研究表明,細胞內ros是含油微生物脂質積累的信號，裂壺藻的fas代謝途徑需要消耗氧氣進行,盡管大部分氧氣消耗用于菌體生長及油脂積累,但是因氧氣而產生的活性氧(ros)損傷不可避免。過量的ros會造成蛋白質、脂質及其他生長代謝物損傷,甚至影響菌體的生長周期。
3、抗氧化劑是一種可以清除自由基，緩解過量的自由基對細胞損害的一種物質，此外一些水溶性抗氧化劑作為外源添加劑可能會參與裂壺藻的代謝過程。目前通過外源添加抗氧化劑調節裂壺藻epa產量尚未見報道。
技術實現思路
1、針對現有技術中存在的不足之處，本申請提供一種抗氧化劑提高裂壺藻epa產量的生產方法及其應用，以解決epa補充劑主要是魚油提取造成的魚油資源不豐富，價格昂貴、魚腥味大、產業化困難的缺陷，本申請提供的方法能夠有效的提高裂壺藻epa發酵產量，具有提取簡單、生產安全，不受季節限定的優勢，是一種綠色的epa原料來源。
2、為實現以上目的，本申請提供的技術方案如下：
3、本申請一方面提供了一種提高裂壺藻epa產量的生產方法，其特征在于，在裂壺藻的發酵培養基中或發酵培養過程中添加抗氧化劑。
4、在一些實施例中，所述抗氧化劑為水溶性抗氧化劑，選自以下中的至少一種：兒茶素、表沒食子兒茶素沒食子酸酯、表沒食子兒茶素、兒茶素沒食子酸酯、沒食子酸丙酯、d-異抗壞血酸鈉、抗壞血酸、植酸、阿魏酸。
5、在一些實施例中，所述抗氧化劑為水溶性抗氧化劑，選自以下中的至少兩種：兒茶素、表沒食子兒茶素沒食子酸酯、表沒食子兒茶素、兒茶素沒食子酸酯、沒食子酸丙酯、d-異抗壞血酸鈉、抗壞血酸、植酸、阿魏酸。
6、在一些實施例中，所述抗氧化劑的濃度：0<所述抗氧化劑的濃度≤1g/l。
7、在一些實施例中，表沒食子兒茶素沒食子酸酯0.15～0.3g/l。
8、在一些實施例中，沒食子酸丙酯0.01～0.1g/l。
9、在一些實施例中，阿魏酸0.06～0.4g/l。
10、在一些實施例中，所述提高裂壺藻epa產量的生產方法，包括如下步驟：
11、步驟s1：將裂壺藻活化后，轉接于種子培養基以獲得一級種子；
12、步驟s2：將步驟s1中獲得的一級種子轉接于含抗氧化劑的發酵培養基中進行發酵培養獲得油脂。
13、在一些實施例中，所述提高裂壺藻epa產量的生產方法，包括如下步驟：
14、步驟s1：將裂壺藻活化后，轉接于種子培養基以獲得一級種子；
15、步驟s2：將步驟s1中獲得的一級種子轉接于發酵培養基中培養48h-96h后加入抗氧化劑繼續進行發酵培養獲得油脂。
16、在一些實施例中，本專利技術所述的接種或轉種等的接種量為常規接種了。具體例如可以是3-10％。
17、在一些實施例中，所述提高裂壺藻epa產量的生產方法，包括如下步驟：
18、步驟s1：將裂壺藻接種于種子培養基中進行活化后將其轉接于種子培養基以獲得一級種子；
19、步驟s2：將步驟s1中獲得的一級種子轉接于含抗氧化劑的發酵培養基中進行發酵培養獲得油脂或將步驟s1中獲得的一級種子轉接于發酵培養基中培養48h-96h后加入抗氧化劑繼續進行發酵培養獲得油脂。
20、在一些實施例中，所述發酵條件包括：發酵溫度25-28℃，轉速180-220rpm，發酵ph在5.5-6.0。
21、在一些實施例中，步驟s1和步驟s2中所述種子培養基或發酵培養基包括：葡萄糖45-55g/l，無水硫酸鈉10-20g/l，氯化鉀0.2-0.8g/l，無水硫酸鎂3.5-4.7g/l，硫酸鉀0.5-0.8g/l，磷酸二氫鉀0.5-1.5g/l，硫酸銨0.5-1.5g/l，無水氯化鈣0.1-0.3g/l。
22、優選的，在一些實施例中，步驟s1和步驟s2中所述種子培養基或發酵培養基包括：葡萄糖50g/l，無水硫酸鈉15g/l，氯化鉀0.5g/l，無水硫酸鎂4.1g/l，硫酸鉀0.65g/l，磷酸二氫鉀1g/l，硫酸銨1g/l，無水氯化鈣0.17g/l。
23、在一些實施例中，所述抗氧化劑的dpph自由基清除率在80-95％之間。
24、優選的，在一些實施例中，所述抗氧化劑的dpph自由基清除率在80-90％之間。
25、更優選的，在一些實施例中，所述抗氧化劑的dpph自由基清除率在90-95％之間。
26、本申請另一方面提供一種抗氧化劑在提高裂壺藻epa產量中的應用。
27、在提高裂壺藻epa產量中的應用主要是指在提高裂壺藻epa產量的裂壺藻發酵中添加。
28、本申請的有益效果是：與現有技術相比，本申請提供的一種抗氧化劑提高裂壺藻epa產量的方法，具有如下優勢：通過添加外源添加劑抗氧化劑清除自由基，緩解過量的自由基對細胞損害，參與裂壺藻的代謝過程，提高裂壺藻epa產量，相比于傳統魚油提取方法，具有提取簡單、生產安全，不受季節限定的優勢，是一種綠色的epa原料來源。
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1.一種提高裂壺藻EPA產量的生產方法，其特征在于，在裂壺藻的發酵培養基中或發酵培養過程中添加抗氧化劑。
2.根據權利要求1中所述的生產方法，其特征在于，所述抗氧化劑為水溶性抗氧化劑，選自以下中的至少一種或至少兩種：兒茶素、表沒食子兒茶素沒食子酸酯、表沒食子兒茶素、兒茶素沒食子酸酯、沒食子酸丙酯、D-異抗壞血酸鈉、抗壞血酸、植酸、阿魏酸；其中，0<所述抗氧化劑的濃度≤1g/L。
3.根據權利要求1或2所述的提高裂壺藻EPA產量的生產方法，其特征在于，包括如下步驟：
4.權利要求3中所述的生產方法，其特征在于，步驟S1和步驟S2中所述種子培養基或發酵培養基包括：葡萄糖45-55g/L，無水硫酸鈉10-20g/L，氯化鉀0.2-0.8g/L，無水硫酸鎂3.5-4.7g/L，硫酸鉀0.5-0.8g/L，磷酸二氫鉀0.5-1.5g/L，硫酸銨0.5-1.5g/L，無水氯化鈣0.1-0.3g/L。
5.權利要求3中所述的生產方法，其特征在于，步驟S1和步驟S2中所述種子培養基或發酵培養基包括：葡萄糖50g/L，無水硫酸鈉15g/L，氯化
6.根據權利要求1中所述的生產方法，其特征在于，所述抗氧化劑的DPPH自由基清除率在80-95％之間。
7.根據權利要求6中所述的生產方法，其特征在于，所述抗氧化劑的DPPH自由基清除率在90-95％之間。
8.根據權利要求1中所述的生產方法，其特征在于，所述發酵條件包括：發酵溫度25-28℃，轉速180-220rpm，發酵pH在5.5-6.0。
9.一種抗氧化劑在提高裂壺藻EPA產量中的應用。
...【技術特征摘要】
1.一種提高裂壺藻epa產量的生產方法，其特征在于，在裂壺藻的發酵培養基中或發酵培養過程中添加抗氧化劑。
2.根據權利要求1中所述的生產方法，其特征在于，所述抗氧化劑為水溶性抗氧化劑，選自以下中的至少一種或至少兩種：兒茶素、表沒食子兒茶素沒食子酸酯、表沒食子兒茶素、兒茶素沒食子酸酯、沒食子酸丙酯、d-異抗壞血酸鈉、抗壞血酸、植酸、阿魏酸；其中，0<所述抗氧化劑的濃度≤1g/l。
3.根據權利要求1或2所述的提高裂壺藻epa產量的生產方法，其特征在于，包括如下步驟：
4.權利要求3中所述的生產方法，其特征在于，步驟s1和步驟s2中所述種子培養基或發酵培養基包括：葡萄糖45-55g/l，無水硫酸鈉10-20g/l，氯化鉀0.2-0.8g/l，無水硫酸鎂3.5-4.7g/l，硫酸鉀0.5-0.8g/l，磷酸二氫鉀0.5-1.5g/l，硫酸...
【專利技術屬性】
技術研發人員：陳禮毅，鐘惠昌，陳水榮，陳镕，趙小龍，
申請(專利權)人：廈門匯盛生物有限公司，
類型：發明
國別省市：
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