【技術實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術屬于生物，具體涉及用于降解1,2-二氯丙烷的復合菌劑及其制備方法與應用。
技術介紹
0、技術背景
1、1,2-二氯丙烷是氯代烷烴的一種，被廣泛用作有機溶劑、金屬脫脂劑和化工中間體。由于1,2-二氯丙烷的廣泛、大量使用，使其成為了環(huán)境中常見的有機污染物之一，因其密度較大、低吸附性和難以生物降解，是一種典型的地下水中重質非水液相型持久性有機污染物，會進入地下水中在垂直和水平方向上進行遷移，并容易形成廣泛的地下水污染羽流。1,2-二氯丙烷具有致畸、致癌、致突變等高毒性作用，它已被美國環(huán)境保護局指定為風險評估的高度優(yōu)先化學物質。當被人體接觸后，其主要作用于人體的中樞神經(jīng)和呼吸系統(tǒng)，反復接觸對心臟、肝臟、腎臟均會造成不同程度的危害，直接暴露于高濃度下時可能導致死亡。因此，對地下水中1,2-二氯丙烷的防控和治理具有重要的科學和社會意義，急需開展相關的研究工作。
2、物理修復技術、化學修復技術和生物修復技術是氯代烴污染地下水最常用的修復技術，其中生物修復技術因具有綠色、經(jīng)濟、無二次污染等優(yōu)勢，被視為1,2-二氯丙烷污染地下水治理的理想手段。在厭氧和有氧條件下均可以觀察到1,2-二氯丙烷的生物降解，但在自然環(huán)境中的微生物降解卻極為緩慢，并且主要是共代謝引起的降解。目前僅有幾株厭氧降解菌株可以將1,2-二氯丙烷完全脫氯為丙烯，還未有1,2-二氯丙烷好氧降解菌株被報道。因此，從地下水中分離純化1,2-二氯丙烷高效降解菌株至關重要。
3、然而，單個降解菌株的生物修復在實際應用中往往效果不佳。實際上，自然界
技術實現(xiàn)思路
1、本專利技術所要解決的主要問題是如何高效生物降解1,2-二氯丙烷。
2、為了解決上述問題，本專利技術提供了一種復合菌劑。
3、本專利技術提供的復合菌劑，其活性成分由蠟樣芽孢桿菌（ bacillus?cereus）dbc-6和紅球菌（ rhodococcussp.）dt-18組成；所述蠟樣芽孢桿菌（ bacillus?cereus）dbc-6在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏編號為cgmcc?no.?30356；所述紅球菌（ rhodococcussp.）dt-18在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏編號為cgmcc?no.?30417。
4、上述復合菌劑中，所述蠟樣芽孢桿菌（ bacillus?cereus）dbc-6和紅球菌（ rhodococcussp.）dt-18的活菌數(shù)之比為1:1。
5、上述菌劑的活性成分可為上述蠟樣芽孢桿菌或/和紅球菌，和/或上述蠟樣芽孢桿菌或/和紅球菌的代謝物，上述菌劑的活性成分還可含有其他生物成分或非生物成分。
6、上述菌劑中，除所述活性成分外，還含有載體。所述載體可為生物領域常用的且在生物學上是惰性的載體。所述載體可為固體載體或液體載體；所述固體載體可為礦物材料、植物材料或高分子化合物；所述礦物材料可為粘土、滑石、高嶺土、蒙脫石、白碳、沸石、硅石和硅藻土中的至少一種；所述植物材料可為玉米粉、豆粉和淀粉中的至少一種；所述高分子化合物可為聚乙烯醇和/或聚二醇；所述液體載體可為有機溶劑、植物油、礦物油或水；所述有機溶劑可為癸烷和/或十二烷。
7、根據(jù)需要，所述菌劑中還可添加表面活性劑（如鼠李糖脂生物表面活性劑、槐糖脂生物表面活性劑、如吐溫20、吐溫80等）、粘合劑、穩(wěn)定劑（如抗氧化劑）、ph調節(jié)劑等。
8、上述菌劑可為多種劑型，如液劑、乳劑、懸浮劑、粉劑、顆粒劑、可濕性粉劑或水分散粒劑。
9、上述復合菌劑為具有如下1）-4）任一所述用途的菌劑：
10、1）降解1,2-二氯丙烷；
11、2）制備降解1,2-二氯丙烷的產品；
12、3）修復1,2-二氯丙烷污染地下水；
13、4）制備修復1,2-二氯丙烷污染地下水的產品。
14、本專利技術還提供了上述復合菌劑下述任一種中的應用：
15、1）降解1,2-二氯丙烷；
16、2）制備降解1,2-二氯丙烷產品；
17、3）修復1,2-二氯丙烷污染地下水；
18、4）制備修復1,2-二氯丙烷污染地下水的產品。
19、本專利技術還提供了上述復合菌劑的制備方法，包括：將前文所述蠟樣芽孢桿菌（ bacillus?cereus）dbc-6或其發(fā)酵產物與所述紅球菌（ rhodococcussp.）dt-18或其發(fā)酵產物混合，得到所述復合菌劑。
20、本專利技術中，所述復合菌劑的細胞密度可為108-109cfu/ml。
21、所述發(fā)酵采用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基，每升發(fā)酵培養(yǎng)基含3.0g牛肉膏、10.0g蛋白胨、5.0?g?nacl，ph為7.4-7.6。
22、本專利技術中，所述1,2-二氯丙烷的含量為20-100?mg/l。
23、本專利技術還提供了蠟樣芽孢桿菌，所述蠟樣芽孢桿菌為蠟樣芽孢桿菌（ bacillus? cereus）dbc-6，在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏編號為cgmccno.?30356。
24、本專利技術還提供了紅球菌，所述紅球菌為所述紅球菌（ rhodococcussp.）dt-18，在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏編號為cgmcc?no.?30417。
25、本專利技術還提供了降解樣品中1,2-二氯丙烷的方法，包括在含有1,2-二氯丙烷的所述樣品中添加前文所述蠟樣芽孢桿菌、紅球菌或二者復配的復合菌劑進行反應，實現(xiàn)1,2-二氯丙烷的降解。
26、本專利技術還提供了修復1,2-二氯丙烷污染的環(huán)境的方法，包括：向所述1,2-二氯丙烷污染的環(huán)境中添加前文所述復合菌劑進行反應，實現(xiàn)1,2-二氯丙烷污染地下水的修復。
27、上述方法中，所述反應可25?℃、ph為7.0的條件下進行。
28、上述方法中，所述反應可在缺氧、避光條件下進行。
29、本專利技術的復合菌劑可以分解1,2-二氯丙烷，本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術保護點】
1.復合菌劑，其特征在于，所述復合菌劑的活性成分由蠟樣芽孢桿菌（Bacillus?cereus）DBC-6和紅球菌（Rhodococcus?sp.）DT-18組成；
2.根據(jù)權利要求1所述的復合菌劑，其特征在于：所述復合菌劑中所述蠟樣芽孢桿菌（Bacillus?cereus）DBC-6和紅球菌（Rhodococcus?sp.）DT-18的活菌數(shù)之比為1:1。
3.根據(jù)權利要求1或2所述的復合菌劑，其特征在于：所述復合菌劑為具有如下1）或2）或3）用途的菌劑：
4.權利要求1或2所述復合菌劑的下述任一應用：
5.權利要求1-3任一所述復合菌劑的制備方法，包括：將權利要求1-3任一所述蠟樣芽孢桿菌（Bacillus?cereus）DBC-6或其發(fā)酵產物與所述紅球菌（Rhodococcus?sp.）DT-18或其發(fā)酵產物混合，得到所述復合菌劑。
6.蠟樣芽孢桿菌，其特征在于，所述蠟樣芽孢桿菌為蠟樣芽孢桿菌（Bacillus?cereus）DBC-6，在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏編號為CGMCC?No.30
7.紅球菌，其特征在于，所述紅球菌為所述紅球菌（Rhodococcus?sp.）DT-18，在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏編號為CGMCC?No.?30417。
8.降解樣品中1,2-二氯丙烷的方法，包括：在含有1,2-二氯丙烷的所述樣品中添加權利要求1或2中所述復合菌劑進行反應，實現(xiàn)1,2-二氯丙烷的降解。
9.修復1,2-二氯丙烷污染的環(huán)境的方法，包括：向所述1,2-二氯丙烷污染的環(huán)境中添加權利要求1或2中所述復合菌劑進行反應，實現(xiàn)1,2-二氯丙烷污染地下水的修復。
10.根據(jù)權利要求8或9所述的方法，其特征在于：所述反應在缺氧、避光、25?℃下進行。
...【技術特征摘要】
1.復合菌劑，其特征在于，所述復合菌劑的活性成分由蠟樣芽孢桿菌（bacillus?cereus）dbc-6和紅球菌（rhodococcus?sp.）dt-18組成；
2.根據(jù)權利要求1所述的復合菌劑，其特征在于：所述復合菌劑中所述蠟樣芽孢桿菌（bacillus?cereus）dbc-6和紅球菌（rhodococcus?sp.）dt-18的活菌數(shù)之比為1:1。
3.根據(jù)權利要求1或2所述的復合菌劑，其特征在于：所述復合菌劑為具有如下1）或2）或3）用途的菌劑：
4.權利要求1或2所述復合菌劑的下述任一應用：
5.權利要求1-3任一所述復合菌劑的制備方法，包括：將權利要求1-3任一所述蠟樣芽孢桿菌（bacillus?cereus）dbc-6或其發(fā)酵產物與所述紅球菌（rhodococcus?sp.）dt-18或其發(fā)酵產物混合，得到所述復合菌劑。
6.蠟樣...
【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：代小麗，張忠國，單悅，魏燕，
申請(專利權)人：北京市科學技術研究院資源環(huán)境研究所北京市土地修復工程技術研究中心，
類型：發(fā)明
國別省市：
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