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    轉錄因子DcERF020在調控鐵皮石斛多糖生物合成中的應用制造技術

    技術編號:43347162 閱讀:23 留言:0更新日期:2024-11-15 20:45
    本發明專利技術公開了轉錄因子DcERF020在調控鐵皮石斛多糖生物合成中的應用,DcERF020基因轉入鐵皮石斛葉片中能夠顯著提高其多糖含量。本發明專利技術通過實時熒光定量PCR、酵母單雜技術、染色質免疫共沉淀等一系列實驗分析發現,DcERF020能夠調控多糖生物合成基因DcXG9/DcUDPD/DcUDPE的轉錄。本發明專利技術挖掘了DcERF020的功能,對采用基因工程技術提高鐵皮石斛多糖含量提供了重要的理論依據,具有廣闊的應用前景。

    【技術實現步驟摘要】

    本專利技術屬于植物分子生物學及基因工程領域,具體涉及轉錄因子dcerf020在調控鐵皮石斛多糖生物合成中的應用。


    技術介紹

    1、鐵皮石斛(dendrobiμm?officinale?kimura?et?migo)是蘭科石斛屬多年附生的草本植物,是我國特有珍稀瀕危藥用植物,有著“中華九大仙草”之首的美譽。其富含多糖、生物堿、黃酮、多酚、菲類及聯芐類等多種活性成分,具有滋陰清熱、益胃生津傳統中醫藥功效以及抗疲勞、降血糖、降血脂、抗腫瘤等現代藥理學活性。多糖是其主要的活性成分,其含量的高低是評價鐵皮石斛品質的重要指標之一。由于濫采濫挖,再加上在自然環境下生長速度緩慢,種子萌發率低,鐵皮石斛的野生資源已瀕臨枯竭。人工栽培是解決其野生資源短缺問題的有效途徑。但人工種植的鐵皮石斛多糖含量較低,嚴重制約了其在降血糖、抗腫瘤等方面的應用。通過分子手段揭示鐵皮石斛多糖合成的轉錄調控機制,利用基因工程手段提高鐵皮石斛多糖含量可有效突破瓶頸。

    2、轉錄因子作為植物轉錄調控中重要的調節因子,它們可以同時激活或者抑制多個下游基因的表達,從而調控植物的生長發育以及逆境脅迫的耐受性。erf轉錄因子家族是植物中最大的轉錄因子家族之一,該家族的每個成員都包含一個典型的ap2結構域。第一個ap2/erf轉錄因子基因于1994年在模式植物擬南芥中被分離出來,且被證實參與了花發育過程的調控。研究發現,ap2/erf轉錄因子可通過響應乙烯、細胞分裂素和生長素的調節從而直接或間接參與種子發育過程、花和果實等器官的形態建成;除了初生代謝,ap2/erf轉錄因子還在植物次生代謝尤其是在調控藥用植物主要活性成分(如青蒿素、紫杉醇和木質素等)合成方面效果顯著;一些ap2/erf轉錄因子也被報道在植物應對高鹽、干旱、缺氧、低溫等非生物脅迫方面具有重要功能。

    3、目前,對鐵皮石斛中多糖合成相關的ap2/erf轉錄因子的研究還處于起步階段,關于其對多糖合成途徑中關鍵基因的調控作用還不明確。為得到高產多糖的鐵皮石斛,深入研究調控鐵皮石斛多糖合成的轉錄因子及其作用的分子機制顯得尤其重要。


    技術實現思路

    1、本專利技術的目的是提供轉錄因子dcerf020在調控鐵皮石斛多糖生物合成中的應用。

    2、進一步地,所述轉錄因子dcerf020激活多糖生物合成途徑關鍵酶基因促進鐵皮石斛多糖含量的積累。

    3、進一步地,所述轉錄因子dcerf020通過激活dcxg9/dcudpd/dcudpe基因啟動子的表達促進鐵皮石斛多糖的生物合成。

    4、進一步地,所述轉錄因子dcerf020結合多糖生物合成酶基因dcxg9/dcudpd/dcudpe上的t2、p1、b2位點。

    5、有益效果:

    6、本專利技術發現了一種參與鐵皮石斛多糖生物合成調控的ap2/erf轉錄因子dcerf020,通過實時熒光定量pcr、酵母單雜技術和染色質免疫共沉淀實驗,證明dcerf020能夠結合到dcxg9/dcudpd/dcudpe基因的啟動子區域,激活dcxg9/dcudpd/dcudpe基因啟動子的表達,增強dcxg9/dcudpd/dcudpe基因啟動子活性,促進多糖的生物合成,在調控鐵皮石斛多糖合成中起關鍵作用。

    7、本專利技術為提高鐵皮石斛多糖產量提供新思路和依據。

    本文檔來自技高網...

    【技術保護點】

    1.轉錄因子DcERF020在調控鐵皮石斛多糖生物合成中的應用。

    2.根據權利要求1所述的應用,其特征在于,所述轉錄因子DcERF020激活多糖生物合成途徑關鍵酶基因促進鐵皮石斛多糖含量的積累。

    3.根據權利要求2所述的應用,其特征在于,所述轉錄因子DcERF020通過激活DcXG9/DcUDPD/DcUDPE基因啟動子的表達促進鐵皮石斛多糖的生物合成。

    4.根據權利要求3所述的應用,其特征在于,所述轉錄因子DcERF020結合多糖生物合成酶基因DcXG9/DcUDPD/DcUDPE上的T2、P1、B2位點。

    【技術特征摘要】

    1.轉錄因子dcerf020在調控鐵皮石斛多糖生物合成中的應用。

    2.根據權利要求1所述的應用,其特征在于,所述轉錄因子dcerf020激活多糖生物合成途徑關鍵酶基因促進鐵皮石斛多糖含量的積累。

    3.根據權利要求2所述的應用,其特征在于,所述轉錄因子d...

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:李露丹孟維瑩蔣繼宏曹小迎蔡詩瑜薛麗娜
    申請(專利權)人:江蘇師范大學
    類型:發明
    國別省市:

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