本技術(shù)屬于外泌體提取技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種PRP衍生的外泌體提取裝置。本技術(shù)，包括底板，所述底板上側(cè)的側(cè)壁固定連接有提取操作臺，所述底板的左側(cè)放置有超速離心機(jī)，所述提取操作臺包括固定連接于底板上側(cè)的豎板，所述豎板的豎直側(cè)壁固定連接有試管架，所述試管架上均勻開設(shè)有多個放置孔，所述放置孔內(nèi)設(shè)置有多個試管，所述豎板的豎直側(cè)壁固定連接有承托板，所述承托板位于試管架的下方，所述底板上放置有污垢收集桶，所述豎板的豎直側(cè)壁固定連接有均勻混合機(jī)構(gòu)。本技術(shù)提取裝置能夠?qū)旌弦哼M(jìn)行均勻穩(wěn)定的混合，能夠避免提取液混合時脫手，從而能夠提高PRP衍生的外泌體的提取安全性和效果。
【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本技術(shù)屬于外泌體提取，涉及一種prp衍生的外泌體提取裝置。
技術(shù)介紹
1、腱骨結(jié)合部損傷及愈合問題在膝關(guān)節(jié)交叉韌帶、肩關(guān)節(jié)肩袖以及跟腱止點等重要位置尤顯突出。為了增強(qiáng)腱骨愈合的速度和成功率，近年來富血小板血漿(prp)已經(jīng)在運(yùn)動醫(yī)學(xué)得到廣泛應(yīng)用。prp是一種血液衍生物，可提供超生理劑量的細(xì)胞因子和生長因子，包括轉(zhuǎn)化生長因子-β、表皮生長因子、血管內(nèi)皮生長因子、胰島素樣生長因子和成纖維細(xì)胞生長因子(fgf)，用于促進(jìn)骨愈合、肌腱修復(fù)、清除壞死組織、減輕炎癥反應(yīng)和術(shù)后疼痛、加速關(guān)節(jié)軟骨修復(fù)及再生等。除了生長因子，prp還可產(chǎn)生多種不同的細(xì)胞外囊泡，包括外泌體，具有多種重要生物學(xué)功能，能夠轉(zhuǎn)運(yùn)血小板的主要生長因子。有研究者發(fā)現(xiàn)prp-exo可以促進(jìn)大鼠模型中肌腱損傷的恢復(fù)，顯著增加肌腱標(biāo)志基因的表達(dá)。此外，研究指出prp-exo可能是prp治療關(guān)節(jié)炎的主要機(jī)制，因為prp-exo可在oa軟骨細(xì)胞中誘導(dǎo)軟骨基因的表達(dá)，同時，prp-exo可以相應(yīng)地抑制促炎因子的釋放。
2、在prp-exo研究的過程中需要對prp衍生的外泌體進(jìn)行提取操作，由于在外泌體提取的過程中需要使用exoeasy?maxi試劑盒進(jìn)行提取操作，提取的過程中需要對多種試劑和混合物進(jìn)行混合搖勻，現(xiàn)有的提取裝置采用操作人員手持晃動翻轉(zhuǎn)顛倒的方式進(jìn)行搖勻，這種操作方式的安全性較低，容易導(dǎo)致試管從手中脫落，且搖勻的效果較差。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本技術(shù)的目的是針對上述問題，提供一種prp衍生的外泌體提取裝置。
>2、為達(dá)到上述目的，本技術(shù)采用了下列技術(shù)方案：3、一種prp衍生的外泌體提取裝置，包括底板，所述底板上側(cè)的側(cè)壁固定連接有提取操作臺，所述底板的左側(cè)放置有超速離心機(jī)，所述提取操作臺包括固定連接于底板上側(cè)的豎板，所述豎板的豎直側(cè)壁固定連接有試管架，所述試管架上均勻開設(shè)有多個放置孔，所述放置孔內(nèi)設(shè)置有多個試管，所述豎板的豎直側(cè)壁固定連接有承托板，所述承托板位于試管架的下方，所述底板上放置有污垢收集桶，所述豎板的豎直側(cè)壁固定連接有均勻混合機(jī)構(gòu)。
4、在上述的一種prp衍生的外泌體提取裝置中，所述均勻混合機(jī)構(gòu)包括轉(zhuǎn)動連接于豎板上的轉(zhuǎn)軸，所述轉(zhuǎn)軸外固定套設(shè)有安裝板，所述安裝板上固定連接有固定夾板，所述安裝板外活動套設(shè)有滑動塊，所述滑動塊上固定連接有移動夾板，所述安裝板的上側(cè)固定連接有固定板，所述固定板與移動夾板之間固定連接有彈簧，所述固定夾板與移動夾板相對的一側(cè)均開設(shè)有限位槽。
5、在上述的一種prp衍生的外泌體提取裝置中，所述污垢收集桶包括桶體，所述桶體的上端螺紋連接有桶蓋，所述桶蓋上開設(shè)有集污孔，且集污孔內(nèi)轉(zhuǎn)動安裝有密封蓋。
6、在上述的一種prp衍生的外泌體提取裝置中，所述安裝板靠近豎板的一側(cè)固定連接有第一磁石，所述豎板的豎直側(cè)壁固定連接有第二磁石，所述第一磁石與第二磁石相接觸的一側(cè)極性相反。
7、在上述的一種prp衍生的外泌體提取裝置中，所述底板上側(cè)的側(cè)壁對稱固定連接有兩個防護(hù)板，兩個所述防護(hù)板的具體材質(zhì)為透明玻璃。
8、在上述的一種prp衍生的外泌體提取裝置中，所述承托板上側(cè)的側(cè)壁均勻開設(shè)有多個與放置孔相對應(yīng)的放置槽，多個所述放置槽的槽底均固定連接有緩沖墊片。
9、在上述的一種prp衍生的外泌體提取裝置中，所述固定夾板上固定連接有操作握柄，所述操作握柄外固定套設(shè)有防滑套，所述防滑套的具體材質(zhì)為橡膠。
10、在上述的一種prp衍生的外泌體提取裝置中，所述安裝板的豎直側(cè)壁固定連接有防護(hù)墊片，所述防護(hù)墊片的材質(zhì)海綿。
11、在上述的一種prp衍生的外泌體提取裝置中，所述超速離心機(jī)的底部固定連接有底座，所述底座的材質(zhì)為絕緣塑料。
12、在上述的一種prp衍生的外泌體提取裝置中，所述限位槽內(nèi)固定連接有保護(hù)墊片。
13、與現(xiàn)有的技術(shù)相比，本技術(shù)的優(yōu)點在于：
14、本技術(shù)通過設(shè)置的底板、超速離心機(jī)、豎板、試管架、放置孔、試管、承托板、污垢收集桶和均勻混合機(jī)構(gòu)，提取時，將prp放置在試管中然后放置在超速離心機(jī)中在4℃下以3000g離心15分鐘，從而能夠去除prp中額外的細(xì)胞碎片和細(xì)胞碎片，將離心后澄清的上清液小心地轉(zhuǎn)移到新的試管中，不要干擾顆粒，沿離心試管的外側(cè)或底部形成涂片，然后將1體積的緩沖液xbp添加到1體積的prp中，將試管夾持在均勻混合機(jī)構(gòu)上，操作均勻混合機(jī)構(gòu)對試管進(jìn)行輕輕顛倒五次以使混合物升溫至室溫，設(shè)置的均勻混合機(jī)構(gòu)能夠?qū)υ嚬苓M(jìn)行穩(wěn)定的夾持，且轉(zhuǎn)動的過程中也十分穩(wěn)定不會脫落，且受不穩(wěn)定外界因素的影響較小，從而能夠?qū)悠烦浞志鶆蚧旌希旌现罂偣搏@得了16ml的prp/xbp混合物，將其添加到exoeasy試劑盒中的離心柱中并以500g離心1分鐘，離心完成后取出并丟棄流出液后，將色譜柱放回同一試管中，重復(fù)上述步驟，直到提取液的總體積不超過8ml，然后將提取液以5000g離心1分鐘以去除膜上殘留的液體，然后向提取液中加入10ml緩沖液xwp，并以5000g的速度將體積離心5分鐘以去除殘留的緩沖液，然后將離心柱中的混合液轉(zhuǎn)移到新的試管中，接下來，將400μl?buffer?xe添加到膜中并孵育1分鐘，然后500g離心收集洗脫液5分鐘，再次加入exoeasy離心柱膜，孵育1分鐘，最后，在5000g離心5分鐘后收集洗脫液，洗脫液通過exoeasy?maxi?kit用于分離外泌體，所有步驟均在4℃下進(jìn)行，最終得到的外泌體小心地重新懸浮在無菌pbs中并儲存在-80℃以供后續(xù)實驗，完成對外泌體的穩(wěn)定提取，相較于現(xiàn)有的提取裝置，本技術(shù)的提取裝置能夠?qū)旌弦哼M(jìn)行均勻穩(wěn)定的混合，能夠避免提取液混合時脫手，從而能夠提高prp衍生的外泌體的提取安全性和效果。
15、本技術(shù)的其它優(yōu)點、目標(biāo)和特征將部分通過下面的說明體現(xiàn)，部分還將通過對本技術(shù)的研究和實踐而為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所理解。
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【技術(shù)保護(hù)點】
1.一種PRP衍生的外泌體提取裝置，包括底板(1)，其特征在于，所述底板(1)上側(cè)的側(cè)壁固定連接有提取操作臺，所述底板(1)的左側(cè)放置有超速離心機(jī)(2)，所述提取操作臺包括固定連接于底板(1)上側(cè)的豎板(3)，所述豎板(3)的豎直側(cè)壁固定連接有試管架(4)，所述試管架(4)上均勻開設(shè)有多個放置孔(5)，所述放置孔(5)內(nèi)設(shè)置有多個試管(6)，所述豎板(3)的豎直側(cè)壁固定連接有承托板(7)，所述承托板(7)位于試管架(4)的下方，所述底板(1)上放置有污垢收集桶(8)，所述豎板(3)的豎直側(cè)壁固定連接有均勻混合機(jī)構(gòu)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種PRP衍生的外泌體提取裝置，其特征在于，所述均勻混合機(jī)構(gòu)包括轉(zhuǎn)動連接于豎板(3)上的轉(zhuǎn)軸(9)，所述轉(zhuǎn)軸(9)外固定套設(shè)有安裝板(10)，所述安裝板(10)上固定連接有固定夾板(11)，所述安裝板(10)外活動套設(shè)有滑動塊(12)，所述滑動塊(12)上固定連接有移動夾板(13)，所述安裝板(10)的上側(cè)固定連接有固定板(14)，所述固定板(14)與移動夾板(13)之間固定連接有彈簧(15)，所述固定夾板(11)與移動夾板(13)相對的一側(cè)均開設(shè)有限位槽(16)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種PRP衍生的外泌體提取裝置，其特征在于，所述污垢收集桶(8)包括桶體(17)，所述桶體(17)的上端螺紋連接有桶蓋(18)，所述桶蓋(18)上開設(shè)有集污孔，且集污孔內(nèi)轉(zhuǎn)動安裝有密封蓋(19)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種PRP衍生的外泌體提取裝置，其特征在于，所述安裝板(10)靠近豎板(3)的一側(cè)固定連接有第一磁石(20)，所述豎板(3)的豎直側(cè)壁固定連接有第二磁石(21)，所述第一磁石(20)與第二磁石(21)相接觸的一側(cè)極性相反。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種PRP衍生的外泌體提取裝置，其特征在于，所述底板(1)上側(cè)的側(cè)壁對稱固定連接有兩個防護(hù)板(22)，兩個所述防護(hù)板(22)的具體材質(zhì)為透明玻璃。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種PRP衍生的外泌體提取裝置，其特征在于，所述承托板(7)上側(cè)的側(cè)壁均勻開設(shè)有多個與放置孔(5)相對應(yīng)的放置槽(23)，多個所述放置槽(23)的槽底均固定連接有緩沖墊片(24)。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種PRP衍生的外泌體提取裝置，其特征在于，所述固定夾板(11)上固定連接有操作握柄(25)，所述操作握柄(25)外固定套設(shè)有防滑套(26)，所述防滑套(26)的具體材質(zhì)為橡膠。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種PRP衍生的外泌體提取裝置，其特征在于，所述安裝板(10)的豎直側(cè)壁固定連接有防護(hù)墊片(27)，所述防護(hù)墊片(27)的材質(zhì)海綿。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種PRP衍生的外泌體提取裝置，其特征在于，所述超速離心機(jī)(2)的底部固定連接有底座(28)，所述底座(28)的材質(zhì)為絕緣塑料。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的一種PRP衍生的外泌體提取裝置，其特征在于，所述限位槽(16)內(nèi)固定連接有保護(hù)墊片(29)。
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【技術(shù)特征摘要】
1.一種prp衍生的外泌體提取裝置，包括底板(1)，其特征在于，所述底板(1)上側(cè)的側(cè)壁固定連接有提取操作臺，所述底板(1)的左側(cè)放置有超速離心機(jī)(2)，所述提取操作臺包括固定連接于底板(1)上側(cè)的豎板(3)，所述豎板(3)的豎直側(cè)壁固定連接有試管架(4)，所述試管架(4)上均勻開設(shè)有多個放置孔(5)，所述放置孔(5)內(nèi)設(shè)置有多個試管(6)，所述豎板(3)的豎直側(cè)壁固定連接有承托板(7)，所述承托板(7)位于試管架(4)的下方，所述底板(1)上放置有污垢收集桶(8)，所述豎板(3)的豎直側(cè)壁固定連接有均勻混合機(jī)構(gòu)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種prp衍生的外泌體提取裝置，其特征在于，所述均勻混合機(jī)構(gòu)包括轉(zhuǎn)動連接于豎板(3)上的轉(zhuǎn)軸(9)，所述轉(zhuǎn)軸(9)外固定套設(shè)有安裝板(10)，所述安裝板(10)上固定連接有固定夾板(11)，所述安裝板(10)外活動套設(shè)有滑動塊(12)，所述滑動塊(12)上固定連接有移動夾板(13)，所述安裝板(10)的上側(cè)固定連接有固定板(14)，所述固定板(14)與移動夾板(13)之間固定連接有彈簧(15)，所述固定夾板(11)與移動夾板(13)相對的一側(cè)均開設(shè)有限位槽(16)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種prp衍生的外泌體提取裝置，其特征在于，所述污垢收集桶(8)包括桶體(17)，所述桶體(17)的上端螺紋連接有桶蓋(18)，所述桶蓋(18)上開設(shè)有集污孔，且集污孔內(nèi)轉(zhuǎn)動安裝有密封蓋(19)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：劉俊生，韓雷，
申請(專利權(quán))人：杭州市蕭山區(qū)中醫(yī)院，
類型：新型
國別省市：
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