【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】
本公開涉及對色譜介質進行消毒和/或再生色譜介質的方法。
技術介紹
1、蛋白質的純化(來自天然來源，例如來自血漿的白蛋白和通過重組技術產生的所述白蛋白)是蛋白質的制備中的重要步驟，特別是在蛋白質用于治療用途的情況下。在此類制備過程中，通常會涉及若干個純化步驟，以確保蛋白質具有合適的質量(例如純度和穩定性)。
2、基于色譜的純化方法被廣泛用于蛋白質的純化。現有的基于色譜的純化蛋白質方法包含親和色譜(例如蛋白a色譜)、陰離子交換色譜、疏水性相互作用色譜和陽離子交換色譜。在蛋白質的商業規模純化中使用的現有方法的一個障礙是，由于需要大量的色譜介質，成本很高。為了解決這個問題，色譜介質通常被重復使用。在使用循環之間，處理色譜介質以去除任何非特異性結合的蛋白質(所述蛋白質可能會降低介質純化所關注的蛋白質(即介質被再生)和對介質進行消毒的能力)以防止未來批次的所關注的蛋白質的污染(即介質被消毒)。然而，用于再生色譜介質和/或對色譜介質進行消毒的苛刻的方法可能會縮短樹脂的壽命。若干種基于蛋白質的色譜樹脂對苛刻的消毒條件敏感。例如，除了較新的耐腐蝕性配體外，蛋白a配體對腐蝕性清潔條件(如高氫氧化鈉(naoh)濃度)敏感，隨著時間的推移，這會破壞配體并降低其重復使用的能力。因此，本領域需要用于再生色譜介質和/或對色譜介質進行消毒的方法，所述方法維持介質在多個循環的純化中純化所關注的蛋白質的能力。
技術實現思路
1、在本專利技術之前的工作中，本專利技術人試圖鑒定一種用于對被用于純化蛋白質(例如
2、本專利技術人的發現提供了一種對色譜介質進行消毒的方法，所述方法包括使所述介質與堿性洗滌劑接觸。在一個實例中，所述堿性洗滌劑包括堿性鹽、一種或多種表面活性劑和/或螯合劑。在一個實例中，所述堿性洗滌劑包括堿性鹽、一種或多種表面活性劑和任選地螯合劑。在一個實例中，所述堿性洗滌劑包括堿性鹽和一種或多種表面活性劑。在一個實例中，所述堿性洗滌劑包括堿性鹽、一種或多種表面活性劑和螯合劑。
3、在一個實例中，所述堿性洗滌劑混合在溶液內。在一個實例中，所述溶液包括0.01％至10％。例如，所述溶液包括0.1％至10％堿性洗滌劑。在一個實例中，所述溶液包括0.01％至5％堿性洗滌劑。在一個實例中，所述溶液包括0.05％至5％堿性洗滌劑。在一個實例中，所述溶液包括0.01％至5％堿性洗滌劑。例如，所述溶液包括0.01％至2.5％堿性洗滌劑。在另一個實例中，所述溶液包括0.01％至0.1％堿性洗滌劑。例如，所述溶液包括約0.02％堿性洗滌劑。在一個實例中，所述溶液包括約0.02％至0.1％堿性洗滌劑。在另外的實例中，所述溶液包括0.05％至0.15％堿性洗滌劑。在一個實例中，所述溶液包括0.5％至2.5％堿性洗滌劑。在一個實例中，所述溶液包括1％至2.5％堿性洗滌劑。例如，所述溶液包括2％堿性洗滌劑。
4、在一個實例中，所述堿性洗滌劑是cip-100。例如，所述溶液包括0.1％至10％cip-100。在一個實例中，所述溶液包括0.1％至5％?cip-100。在一個實例中，所述溶液包括0.5％至5％?cip-100。在一個實例中，所述溶液包括1％至5％?cip-100。例如，所述溶液包括0.01％至2.5％?cip-100。在另一個實例中，所述溶液包括1％至2.5％?cip-100。例如，所述溶液包括約2％?cip-100。在另外的實例中，所述溶液包括1.5％至2.5％cip-100。在一個實例中，所述溶液包括0.5％至2.5％?cip-100。
5、在一個實例中，所述堿性鹽選自由以下組成的組：氫氧化鉀、氫氧化鈉、碳酸鈉、乙酸鈉、硫化鈉和碳酸氫鈉。例如，所述堿性鹽是氫氧化鉀或氫氧化鈉。在一個實例中，所述堿性鹽是氫氧化鉀。在另一個實例中，所述堿性鹽是氫氧化鈉。
6、在一個實例中，所述堿性洗滌劑包括10mm至150mm的堿性鹽。例如，所述堿性洗滌劑包括20mm至150mm的堿性鹽。在另一個實例中，所述堿性洗滌劑包括30mm至140mm的堿性鹽。在另外的實例中，所述堿性洗滌劑包括40mm至130mm的堿性鹽。例如，所述堿性洗滌劑包括50mm至120mm的堿性鹽。在一個實例中，所述堿性洗滌劑包括50mm至100mm的堿性鹽。在另一個實例中，所述堿性洗滌劑包括60mm至90mm的堿性鹽。在另外的實例中，所述堿性洗滌劑包括60mm至80mm的堿性鹽。例如，所述堿性洗滌劑包括70mm至80mm的堿性鹽。在一個實例中，所述堿性洗滌劑包括約75mm堿性鹽。
7、在一個實例中，所述堿性洗滌劑包括10mm、或15mm、或20mm、或25mm、或30mm、或35mm、或40mm、或45mm、或50mm、或55mm、或60mm、或65mm、或70mm、或75mm、或80mm、或85mm、或90mm、95mm、或100mm、或105mm、或110mm、或115mm、或120mm、或125mm、或130mm、或135mm、或140mm、或145mm、或150mm的堿性鹽。
8、在一個實例中，所述堿性鹽是氫氧化鉀或氫氧化鈉，其中所述堿性鹽的濃度20mm至150mm。例如，所述堿性鹽是氫氧化鉀或氫氧化鈉，其中所述堿性鹽的濃度50mm至100mm。在一個實例中，所述堿性鹽是氫氧化鉀或氫氧化鈉，其中所述堿性鹽的濃度60mm至80mm。例如，所述堿性鹽是氫氧化鉀或氫氧化鈉，其中所述堿性鹽的濃度為約75mm。
9、在一個實例中，所述堿性鹽是濃度20mm至150mm的氫氧化鉀。例如，所述堿性鹽是濃度50mm至100mm的氫氧化鉀。在一個實例中，所述堿性鹽是濃度60mm至80mm的氫氧化鉀。例如，所述堿性鹽是本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種對色譜介質進行消毒的方法，所述方法包括使所述介質與堿性洗滌劑接觸。
2.根據權利要求1所述的方法，其中所述堿性洗滌劑包括堿性鹽、一種或多種表面活性劑和任選地螯合劑。
3.根據權利要求2所述的方法，其中所述堿性鹽選自由以下組成的組：氫氧化鉀、氫氧化鈉、碳酸鈉、乙酸鈉、硫化鈉和碳酸氫鈉，例如，所述堿性鹽是氫氧化鉀或氫氧化鈉。
4.根據權利要求2或3所述的方法，其中所述一種或多種表面活性劑選自由以下組成的組：胺乙氧基化物、兩性甲酸酯、三乙醇胺、辛基-β-D吡喃葡萄糖苷(OGP)、聚山梨醇酯、泊洛沙姆(Poloxamer)、月桂基二甲基-胺(LDAO)、肉豆蔻基二甲胺-N-氧化物(TDAO)、膽酸鈉、癸基-β-D-吡喃葡萄糖苷和十二烷基麥芽糖苷。
5.根據權利要求2至4中任一項所述的方法，其中所述螯合劑是乙二胺四乙酸(EDTA)、乙二醇-雙(β-氨基乙基醚)-N,N,N',N'-四乙酸(EGTA)、乙二胺-N,N'-二琥珀酸(EDDS)、亞氨基二琥珀酸(IDS)、甲基甘氨酸二乙酸(MGDA)、三亞乙基四胺(Trien)、亞氨基二乙酸
6.根據權利要求1至5中任一項所述的方法，其中所述堿性洗滌劑包括0.01％至10％(w/v)的一種或多種表面活性劑。
7.根據權利要求1至6中任一項所述的方法，其中所述堿性洗滌劑包括0.01％至1％(w/v)的一種或多種表面活性劑。
8.根據權利要求1至7中任一項所述的方法，其中所述堿性洗滌劑包括10mM至150mM的堿性鹽。
9.根據權利要求1至8中任一項所述的方法，其中所述堿性洗滌劑包括50mM至100mM的堿性鹽。
10.根據權利要求2至9中任一項所述的方法，其中所述堿性鹽的濃度為75mM。
11.根據權利要求1至10中任一項所述的方法，其中所述堿性洗滌劑包括TDAO和選自氫氧化鈉和氫氧化鉀的堿性鹽。
12.根據權利要求11所述的方法，其中所述堿性洗滌劑包括10mM至150mM的氫氧化鉀或氫氧化鈉以及0.01％至0.1％(w/v)的TDAO。
13.根據權利要求12所述的方法，其中所述堿性洗滌劑包括75mM的氫氧化鉀或氫氧化鈉以及0.02％(w/v)的TDAO。
14.根據權利要求1至13中任一項所述的方法，其中所述方法包括使所述介質與所述堿性洗滌劑接觸60分鐘。
15.根據權利要求1至14中任一項所述的方法，其另外地包括再生所述色譜介質，例如，在對所述色譜介質進行消毒之前再生所述色譜介質。
16.根據權利要求15所述的方法，其包括通過使所述介質與包括以下的溶液接觸來再生所述色譜介質：乙二醇、氯化鈉、氫氧化鈉或氫氧化鈉和乙醇的組合。
17.根據權利要求1至16中任一項所述的方法，其中所述色譜介質是離子交換介質、親和介質、疏水性相互作用色譜介質、尺寸排阻柱或混合模式色譜介質。
18.根據權利要求17所述的方法，其中所述介質是親和色譜介質。
19.根據權利要求18所述的方法，其中所述親和色譜介質與抗體的Fc區結合，例如，所述親和色譜介質包括蛋白A或其抗體結合片段、蛋白G或其抗體結合片段或能夠與人IgG的CH1或CH3結構域特異性結合的配體，例如，能夠與人IgG的CH3結構域特異性結合的所述配體包括駱駝科源性單結構域[VHH]抗體片段。
20.根據權利要求1至19中任一項所述的方法，其中所述色譜介質包括選自由以下組成的組的基質：聚(苯乙烯-二乙烯基苯)、交聯聚(苯乙烯-二乙烯基苯)、二氧化硅、瓊脂糖、交聯瓊脂糖、可控孔度玻璃、聚甲基丙烯酸酯和纖維素，例如，所述色譜介質包括交聯聚(苯乙烯-二乙烯基苯)，例如，所述色譜介質包括能夠與人IgG的CH3結構域特異性結合的VHH抗體片段，所述人IgG與交聯聚(苯乙烯-二乙烯基苯)基質綴合。
21.根據權利要求1至20中任一項所述的方法，其包括使包括能夠與人IgG的CH3結構域特異性結合的VHH抗體片段的色譜介質與堿性洗滌劑接觸，所述人Ig...
【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】
1.一種對色譜介質進行消毒的方法，所述方法包括使所述介質與堿性洗滌劑接觸。
2.根據權利要求1所述的方法，其中所述堿性洗滌劑包括堿性鹽、一種或多種表面活性劑和任選地螯合劑。
3.根據權利要求2所述的方法，其中所述堿性鹽選自由以下組成的組：氫氧化鉀、氫氧化鈉、碳酸鈉、乙酸鈉、硫化鈉和碳酸氫鈉，例如，所述堿性鹽是氫氧化鉀或氫氧化鈉。
4.根據權利要求2或3所述的方法，其中所述一種或多種表面活性劑選自由以下組成的組：胺乙氧基化物、兩性甲酸酯、三乙醇胺、辛基-β-d吡喃葡萄糖苷(ogp)、聚山梨醇酯、泊洛沙姆(poloxamer)、月桂基二甲基-胺(ldao)、肉豆蔻基二甲胺-n-氧化物(tdao)、膽酸鈉、癸基-β-d-吡喃葡萄糖苷和十二烷基麥芽糖苷。
5.根據權利要求2至4中任一項所述的方法，其中所述螯合劑是乙二胺四乙酸(edta)、乙二醇-雙(β-氨基乙基醚)-n,n,n',n'-四乙酸(egta)、乙二胺-n,n'-二琥珀酸(edds)、亞氨基二琥珀酸(ids)、甲基甘氨酸二乙酸(mgda)、三亞乙基四胺(trien)、亞氨基二乙酸(ida)、次氮基三乙酸(nta)、三聚磷酸酯(tpp)、二亞乙基三胺五乙酸(dtpa)、二乙基二硫代氨基甲酸鈉(ddc)、l-谷氨酸n,n-二乙酸、四鈉鹽(glda)和青霉胺(penicillamine)、葡萄糖酸鈉、檸檬酸三鈉、dmsa、dmps、bapta、ala以及其鹽，例如，所述螯合劑是可生物降解的螯合劑，如選自由以下組成的組的可生物降解的螯合劑：乙二胺-n,n'-二琥珀酸(edds)、亞氨基二琥珀酸(ids)、甲基甘氨酸二乙酸(mgda)、次氮基三乙酸(nta)以及其鹽。
6.根據權利要求1至5中任一項所述的方法，其中所述堿性洗滌劑包括0.01％至10％(w/v)的一種或多種表面活性劑。
7.根據權利要求1至6中任一項所述的方法，其中所述堿性洗滌劑包括0.01％至1％(w/v)的一種或多種表面活性劑。
8.根據權利要求1至7中任一項所述的方法，其中所述堿性洗滌劑包括10mm至150mm的堿性鹽。
9.根據權利要求1至8中任一項所述的方法，其中所述堿性洗滌劑包括50mm至100mm的堿性鹽。
10.根據權利要求2至9中任一項所述的方法，其中所述堿性鹽的濃度為75mm。
11.根據權利要求1至10中任一項所述的方法，其中所述堿性洗滌劑包括tdao和選自氫氧化鈉和氫氧化鉀的堿性鹽。
12.根據權利要求11所述的方法，其中所述堿性洗滌劑包括10mm至150mm的氫氧化鉀或氫氧化鈉以及0.01％至0.1％(w/v)的tdao。
13.根據權利要求12所述的方法，其中所述堿性洗滌劑包括75mm的氫氧化鉀或氫氧化鈉以及0.02％(w/v)的tdao。
14.根據權利要求1至13中任一項所述的方法，其中所述方法包括使所述介質與所述堿性洗滌劑接觸60分鐘。
15.根據...
【專利技術屬性】
技術研發人員：P·多林格，D·斯考特尼卡，R·阿南迪，
申請(專利權)人：瑞士杰特貝林生物制品有限公司，
類型：發明
國別省市：
還沒有人留言評論。發表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。