【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及醫學免疫學中熒光免疫層析，尤其是涉及一種胎盤生長因子可溶性fms樣酪氨酸激酶檢測試劑盒。
技術介紹
1、胎盤生長因子(plgf)的分泌異常可能跟異位妊娠，先兆流產，先兆子癇、胎兒生長受限以及妊娠相關并發癥相關。檢測孕婦血液胎盤生長因子水平在臨床上可以對孕婦子癇前期進行預測、鑒別和治療監測。可溶性fms樣酪氨酸激酶1(soluble?fms?like?tyrosinekinasel,sflt-1)是一種具有酪氨酸激酶活性的糖蛋白，
2、在子宮胎盤缺血缺氧的情況下，其表面會釋放過量的抗血管生成因子sflt-1進入母體血液循環，引發血管收縮和血管內皮損傷。因此，plgf/sflt-1聯合檢測在子癇前期短期預測方面的臨床價值已獲得日益廣泛的認可。目前市場上的試劑盒大多是以單獨的plgf試劑盒。同時對plgf/sflt-1聯合檢測的產品市場存在很大的空白。利用兩者聯合檢測比采用單獨檢測plgf更有意義。目前檢索到cn118209720a(專利技術實審)，采用將量子點標記抗體凍干成粉末狀態以便長期保存，凍干需要經過預凍-冷凍-真空干燥等步驟，過程比較繁瑣且耗能較大，檢測時吸取100ul樣本加入凍干標記物中混合5min，混均后吸取80ul混合物加入加樣孔中進行檢測，10min后分析儀判讀出結果。而本專利技術中采用直接將量子點標記的抗體噴涂于結合墊上再經過簡單的干燥工藝即可，測試時直接取75ul樣本加入加樣孔進行測試，12min后分析儀判讀出結果，相對簡單，樣本用量少，測試快。
技術實現思路
1、針對上述問題，本專利技術的目的在于提供一種胎盤生長因子可溶性fms樣酪氨酸激酶檢測試劑盒。本專利技術將量子點熒光微球標記的plgf和sflt-1抗體絡合物直接噴涂在結合墊上，并將相應的另一種抗體plgf和sflt-1分別劃在nc膜上。采用直接加樣的方式對plgf/sflt-1進行同時測定。本專利技術可以很好為plgf/sflt-1相關產品的開發提供技術參考，以解決上述
技術介紹
中提出的問題。
2、為實現上述目的，本專利技術提供如下技術方案：一種胎盤生長因子可溶性fms樣酪氨酸激酶檢測試劑盒，包括樣本墊、吸收墊、結合墊以及nc膜；
3、所述nc膜上分布有質控線、測試線一與測試線二。
4、優選地，所述測試線一為胎盤生長因子，所述測試線二為可溶性fms樣酪氨酸激酶。
5、一種胎盤生長因子可溶性fms樣酪氨酸激酶檢測試劑盒的使用方法，包括如下步驟：
6、將量子點熒光微球標記的plgf、sflt-1和質控抗體用絡合物稀釋液配置成一定濃度的混合液，噴涂于結合墊上，絡合物稀釋液里含有磷酸鹽、牛血清白蛋白和防腐劑成分。
7、在測試時直接將75ul的樣本加到反應板條的加樣孔中，12min后即可測試出plgf/sflt-1結果值。
8、測試反應原理是樣本加入到加樣孔后，通過樣本墊加樣端由毛細作用力向左擴散流入到結合墊后，將結合墊上噴涂的量子點熒光微球標記的plgf、sflt-1抗體絡合物在硝化纖維基質的測試帶上擴散，形成plgf、sflt-1復合物，并被測試帶上的另一個plgf、sflt-1抗體所捕獲，形成抗體-抗原-抗體夾心復合物。
9、當血液中的plgf、sflt-1抗原越多，測試帶上的抗體夾心復合物積聚的也多；
10、熒光信號的強度反映了被捕獲的plgf和sflt-1抗原數量，經過配套的免疫熒光分析儀的判讀，能夠檢測出血液樣本中plgf和sflt-1抗原的濃度，并根據兩者之間值得到plgf/sflt-1比值。
11、所述免疫熒光分析儀的判讀系統包括：
12、光源系統、樣品處理系統、光學檢測系統、信號處理和放大系統、數據分析系統、反饋控制系統。
13、所述光源系統包括激光/led光源選擇：選擇波長與熒光染料的激發波長相匹配的光源，并且光源的功率應足夠高以確保激發的熒光信號強度；光源調節：通過反饋控制系統，實時調節光源的強度和穩定性，保證在不同樣品和染料濃度下獲得最優的激發效果；
14、所述樣品處理系統包括：高效抗體標記：采用高親和力的量子點熒光微球標記抗體，確保目標抗原的有效識別和標記，減少非特異性結合帶來的背景信號自動化處理：使用自動化樣品處理設備，實現樣品的精準制備、染色和洗脫，降低人工操作誤差，提高檢測的一致性；
15、所述光學檢測系統包括高靈敏度探測器：選用高量子效率的探測器，以捕捉弱熒光信號；優化光路設計：通過優化濾光片組和透鏡組的設計，最大限度地減少光損失和噪聲干擾，確保熒光信號的高效傳輸；多通道檢測：實現多通道檢測，能夠同時采集多種熒光信號，提高檢測通量和效率。
16、所述信號處理和放大系統包括：
17、信號放大：使用高增益的放大電路對探測器采集的信號進行放大，同時通過濾波技術抑制背景噪聲，確保信號的清晰度；
18、數字信號處理：通過dsp(數字信號處理)技術，對放大的信號進行實時處理，提取有用的熒光信息，并去除噪聲和干擾；
19、設信號放大后的強度為s，原始信號為s0，噪聲為n，放大系數為g，則有：
20、s＝g·s0
21、信噪比snr為：
22、
23、通過調整g和n，優化信噪比。
24、優選地，所述數據分析系統包括：圖像處理：應用先進的圖像處理算法，采用卷積神經網絡，對熒光圖像進行背景校正、邊緣檢測、信號分離處理，提升信號的分辨率和定量精度；基于卷積神經網絡模型進行圖像處理，設輸入圖像為x，輸出判讀結果為y，模型權重為w，則有：
25、y＝f(x,w)
26、其中f為卷積操作和激活函數的組合；
27、自動判讀：建立基于機器學習的自動判讀系統，能夠根據熒光信號強度和分布模式，自動判斷檢測結果，并輸出分析報告,設光源強度為i0，熒光強度為if，則有：
28、if＝k·i0·ò·c
29、其中k為常數，ò為熒光染料的激發效率，c為樣品中熒光分子的濃度；
30、動態調整：根據實時檢測的數據，自動調整光源強度、探測器靈敏度等參數，確保在不同樣品條件下都能獲得最佳檢測效果；
31、所述提高靈敏度的優化步驟具體包括：
32、增強熒光信號：信號增強策略：采用信號增強策略，使用金屬增強熒光或多層膜結構，以增強熒光分子的發射強度；
33、長波長熒光染料：選擇長波長的熒光染料以減少背景熒光的干擾，提升檢測信噪比；
34、抑制背景信號：優化抗體設計：通過設計抗體的高選擇性結合位點，減少非特異性結合產生的背景信號；
35、滌步驟優化：優化洗滌步驟，確保未結合的熒光標記抗體被充分洗除，降低背景噪聲；
36、動態調整與反饋控制：實時參數調整：利用反饋控制系統，根據檢測過程中熒光信號的強度，實時調整光源、探測器、以及樣品處理條件，實現自適應優化，確保本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種胎盤生長因子可溶性fms樣酪氨酸激酶檢測試劑盒，其特征在于：包括樣本墊(1)、吸收墊(2)、結合墊(3)以及NC膜(4)；
2.根據權利要求1所述的一種胎盤生長因子可溶性fms樣酪氨酸激酶檢測試劑盒，其特征在于：所述測試線一(6)為胎盤生長因子，所述測試線二(7)為可溶性fms樣酪氨酸激酶。
3.一種基于權利要求1-2所述的一種胎盤生長因子可溶性fms樣酪氨酸激酶檢測試劑盒的使用方法，其特征在于：包括如下步驟：
4.根據權利要求3所述的一種胎盤生長因子可溶性fms樣酪氨酸激酶檢測試劑盒的使用方法，其特征在于：在測試時直接將75ul的樣本加到反應板條的加樣孔中，12min后即可測試出PlGF/sFlt-1結果值。
5.根據權利要求4所述的一種胎盤生長因子可溶性fms樣酪氨酸激酶檢測試劑盒的使用方法，其特征在于：測試反應原理是樣本加入到加樣孔后，通過樣本墊(1)加樣端由毛細作用力向左擴散流入到結合墊(3)后，將結合墊(3)上噴涂的量子點熒光微球標記的PlGF、sFlt-1抗體絡合物在硝化纖維基質的測試帶上擴散，形成PlGF、sF
6.根據權利要求5所述的一種胎盤生長因子可溶性fms樣酪氨酸激酶檢測試劑盒的使用方法，其特征在于：當血液中的PlGF、sFlt-1抗原越多，測試帶上的抗體夾心復合物積聚的也多；
7.根據權利要求6所述的一種胎盤生長因子可溶性fms樣酪氨酸激酶檢測試劑盒的使用方法，其特征在于：所述免疫熒光分析儀的判讀系統包括：
8.根據權利要求6所述的一種胎盤生長因子可溶性fms樣酪氨酸激酶檢測試劑盒的使用方法，其特征在于：所述光源系統包括激光/LED光源選擇：選擇波長與熒光染料的激發波長相匹配的光源，并且光源的功率應足夠高以確保激發的熒光信號強度；光源調節：通過反饋控制系統，實時調節光源的強度和穩定性，保證在不同樣品和染料濃度下獲得最優的激發效果；
9.根據權利要求6所述的一種胎盤生長因子可溶性fms樣酪氨酸激酶檢測試劑盒的使用方法，其特征在于：所述信號處理和放大系統包括：
10.根據權利要求6所述的一種胎盤生長因子可溶性fms樣酪氨酸激酶檢測試劑盒的使用方法，其特征在于：所述數據分析系統包括：圖像處理：應用先進的圖像處理算法，采用卷積神經網絡，對熒光圖像進行背景校正、邊緣檢測、信號分離處理，提升信號的分辨率和定量精度；基于卷積神經網絡模型進行圖像處理，設輸入圖像為X，輸出判讀結果為Y，模型權重為W，則有：
...【技術特征摘要】
1.一種胎盤生長因子可溶性fms樣酪氨酸激酶檢測試劑盒，其特征在于：包括樣本墊(1)、吸收墊(2)、結合墊(3)以及nc膜(4)；
2.根據權利要求1所述的一種胎盤生長因子可溶性fms樣酪氨酸激酶檢測試劑盒，其特征在于：所述測試線一(6)為胎盤生長因子，所述測試線二(7)為可溶性fms樣酪氨酸激酶。
3.一種基于權利要求1-2所述的一種胎盤生長因子可溶性fms樣酪氨酸激酶檢測試劑盒的使用方法，其特征在于：包括如下步驟：
4.根據權利要求3所述的一種胎盤生長因子可溶性fms樣酪氨酸激酶檢測試劑盒的使用方法，其特征在于：在測試時直接將75ul的樣本加到反應板條的加樣孔中，12min后即可測試出plgf/sflt-1結果值。
5.根據權利要求4所述的一種胎盤生長因子可溶性fms樣酪氨酸激酶檢測試劑盒的使用方法，其特征在于：測試反應原理是樣本加入到加樣孔后，通過樣本墊(1)加樣端由毛細作用力向左擴散流入到結合墊(3)后，將結合墊(3)上噴涂的量子點熒光微球標記的plgf、sflt-1抗體絡合物在硝化纖維基質的測試帶上擴散，形成plgf、sflt-1復合物，并被測試帶上的另一個plgf、sflt-1抗體所捕獲，形成量子點熒光微球標記抗體-抗原-抗體夾心復合物。
6.根據權利要...
【專利技術屬性】
技術研發人員：韓艷華，莊子檳，李登紅，蔡美玲，梁美露，曹淑芬，農麗松，王洪濤，
申請(專利權)人：巴迪泰廣西生物科技有限公司，
類型：發明
國別省市：
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