【技術實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術屬于微生物代謝，尤其涉及一種黑曲霉菌及其制備1β-methoxyl-4-epigardendiol方法與應用。
技術介紹
1、黑曲霉(aspergillus?niger)屬于散囊菌目發(fā)菌科曲霉屬的一種真菌，可生長在土壤、糧食、藥材、蟲體、枯枝落葉、動物糞便、獼猴桃汁、霉腐物及各種材料的基物上。黑曲霉的菌絲、孢子經常呈現(xiàn)各種顏色。黑曲霉能夠發(fā)酵生產檸檬酸及其他用于食品工業(yè)的有機酸，故有很重要的經濟意義。食品工業(yè)上用作發(fā)酵菌種，如用于食醋生產制曲、麩曲法白酒生產制曲、檸檬酸發(fā)酵等，主要是利用此黑曲霉分泌產生淀粉酶、糖化酶、檸檬酸、葡萄糖酸、五倍子酸等的功能；在生物肥料工業(yè)上，黑曲霉具有裂解大分子有機物和難溶無機物，便于作物吸收利用，改善土壤結構，增強土壤肥力，提高作物產量的效果。當前研究表明黑曲霉發(fā)酵能夠轉化青蒿素、百里醌、姜黃黃根醇等物質，通過轉化能夠獲得一些活性更好的物質。
2、京尼平苷是一種環(huán)烯醚萜類特殊單萜的糖苷化合物，是從茜草科植物梔子的干燥成熟果實中的主要活性成分。京尼平苷具有抗癌、抗炎等藥理作用，但是京尼平苷經過機體腸道代謝生成京尼平，進一步轉化為京尼平二醛，京尼平二醛與肝臟蛋白的共價結合誘發(fā)肝毒性。
3、1β-methoxyl-4-epigardendiol是一種非糖苷類環(huán)烯醚萜，全名(1r,4r,4as,7as)-4,7-dihydroxymethyl-1-methoxyl-1,4,4a,7a-tetrahydrocyclopenta-6-ene[e]pyran-3-one)。發(fā)現(xiàn)
4、目前，該物質主要來源是從植物中分離得到，未有微生物轉化來源的報道，更沒有利用微生物從京尼平苷生物轉化為1β-methoxyl-4-epigardendiol的報道。
技術實現(xiàn)思路
1、鑒于此，本專利技術的目的在于提供一種黑曲霉菌及其制備1β-methoxyl-4-epigardendiol方法與應用，該黑曲霉菌通過轉化京尼平苷能夠高效地制備得到1β-methoxyl-4-epigardendiol。
2、為了實現(xiàn)上述專利技術目的，本專利技術提供了以下技術方案：
3、本專利技術提供了一種黑曲霉菌，所述的黑曲霉菌命名為黑曲霉dqwm-g11，保藏編號為cctcc?no：m?20232244。
4、本專利技術還提供了一種上述黑曲霉菌在制備1β-methoxyl-4-epigardendiol的應用。
5、優(yōu)選的，所述1β-methoxyl-4-epigardendiol的結構式為：
6、本專利技術還提供了一種1β-methoxyl-4-epigardendiol的制備方法，包括如下步驟：
7、將上述的黑曲霉菌與京尼平苷混合，發(fā)酵培養(yǎng)，制備得到含有1β-methoxyl-4-epigardendiol的發(fā)酵產物。
8、優(yōu)選的，所述發(fā)酵溫度為25～30℃，所述發(fā)酵的時間為4～8d。
9、本專利技術還提供了一種1β-methoxyl-4-epigardendiol的純化方法，包括以下步驟：
10、將上述的發(fā)酵產物與乙酸乙酯混合，進行超聲萃取，得到萃取物；
11、將所述萃取物用硅膠柱層析分離，洗脫，收集洗脫液，將含有1β-methoxyl-4-epigardendiol的洗脫液合并，干燥，得到純化后的1β-methoxyl-4-epigardendiol。
12、優(yōu)選的，所述發(fā)酵產物與乙酸乙酯的體積比為1:1。
13、優(yōu)選的，所述超聲的溫度為35～45℃，所述超聲的功率為200～250w，所述超聲的功率為35～45khz；所述萃取的次數(shù)為2～4次，每次萃取的時間為25～35min。
14、優(yōu)選的，所述洗脫的方式為依次用第一洗脫液、第二洗脫液洗脫、第三洗脫液和第四洗脫液進行洗脫；所述第一洗脫液為體積比為3:1的石油醚：乙酸乙酯混合液，所述第一洗脫液的用量為150～250ml；所述第二洗脫液為體積比2:1的石油醚：乙酸乙酯混合液，所述第二洗脫液的用量為150～250ml；所述第三洗脫液為體積比1:1的石油醚：乙酸乙酯混合液，所述第三洗脫液的用量為150～250ml；所述第四洗脫液為體積比1:2的石油醚：乙酸乙酯混合液，所述第四洗脫液的用量為150～250ml。
15、優(yōu)選的，所述干燥為蒸發(fā)干燥。
16、相對于現(xiàn)有技術，本專利技術具有如下有益效果：
17、本專利技術提供了一種黑曲霉菌及其制備1β-methoxyl-4-epigardendiol方法與應用，本專利技術首次采用黑曲霉菌通過發(fā)酵轉化京尼平苷制備1β-methoxyl-4-epigardendiol，制備得到的1β-methoxyl-4-epigardendio產量高。該制備方法設備要求低、操作簡單、綠色無污染、條件溫和、易于產業(yè)化。本專利技術還進一步利用萃取和硅膠柱層析的方法純化1β-methoxyl-4-epigardendio，制備得到的1β-methoxyl-4-epigardendiol純度高，高達90％以上。
18、生物保藏信息
19、本專利技術所述黑曲霉dqwm-g11保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，分類命名為aspergillus?niger?dqwm-g11，保藏編號為cctcc?no：m?20232244，保藏日期為2023年11月15日；保藏地址：中國.武漢.武漢大學。
本文檔來自技高網...【技術保護點】
1.一種黑曲霉菌，其特征在于，所述的黑曲霉菌命名為黑曲霉DQWM-G11，保藏編號為CCTCC?NO：M?20232244。
2.根據權利要求1所述黑曲霉菌在制備1β-methoxyl-4-epigardendiol的應用。
3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述1β-methoxyl-4-epigardendiol的結構式為：
4.一種1β-methoxyl-4-epigardendiol的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述發(fā)酵溫度為25～30℃，所述發(fā)酵的時間為4～8d。
6.一種1β-methoxyl-4-epigardendiol的純化方法，其特征在于，包括以下步驟：
7.根據權利要求6所述的純化方法，其特征在于，所述發(fā)酵產物與乙酸乙酯的體積比為1:1。
8.根據權利要求6所述的純化方法，其特征在于，所述超聲的溫度為35～45℃，所述超聲的功率為200～250w，所述超聲的功率為35～45KHz；所述萃取的次數(shù)為2～4次，每次萃
9.根據權利要求6所述的純化方法，其特征在于，所述洗脫的方式為依次用第一洗脫液、第二洗脫液洗脫、第三洗脫液和第四洗脫液進行洗脫；所述第一洗脫液為體積比為3:1的石油醚：乙酸乙酯混合液，所述第一洗脫液的用量為150～250mL；所述第二洗脫液為體積比2:1的石油醚：乙酸乙酯混合液，所述第二洗脫液的用量為150～250mL；所述第三洗脫液為體積比1:1的石油醚：乙酸乙酯混合液，所述第三洗脫液的用量為150～250mL；所述第四洗脫液為體積比1:2的石油醚：乙酸乙酯混合液，所述第四洗脫液的用量為150～250mL。
10.根據權利要求6所述的純化方法，其特征在于，所述干燥為蒸發(fā)干燥。
...【技術特征摘要】
1.一種黑曲霉菌，其特征在于，所述的黑曲霉菌命名為黑曲霉dqwm-g11，保藏編號為cctcc?no：m?20232244。
2.根據權利要求1所述黑曲霉菌在制備1β-methoxyl-4-epigardendiol的應用。
3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述1β-methoxyl-4-epigardendiol的結構式為：
4.一種1β-methoxyl-4-epigardendiol的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于，所述發(fā)酵溫度為25～30℃，所述發(fā)酵的時間為4～8d。
6.一種1β-methoxyl-4-epigardendiol的純化方法，其特征在于，包括以下步驟：
7.根據權利要求6所述的純化方法，其特征在于，所述發(fā)酵產物與乙酸乙酯的體積比為1:1。
【專利技術屬性】
技術研發(fā)人員：董建偉，鄧亮，李雪嬌，徐曉鑫，
申請(專利權)人：曲靖師范學院，
類型：發(fā)明
國別省市：
還沒有人留言評論。發(fā)表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。