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    延緩牡丹花衰老的PsILR基因、載體、重組菌及應用制造技術

    技術編號:43544277 閱讀:17 留言:0更新日期:2024-12-03 12:24
    本發明專利技術涉及基因領域,具體涉及延緩牡丹花衰老的PsILR基因、載體、重組菌及應用。為了解決延緩花瓣衰老和延長開花期的技術問題,本發明專利技術提供了一種延緩牡丹花衰老和延長牡丹花花期的PsILR基因,其核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所示。本發明專利技術驗證了在牡丹花瓣圓片中過表達PsILR延緩了花瓣衰老,而VIGS沉默后花瓣衰老加快,且過氧化氫和超氧陰離子含量上升,表明PsILR參與牡丹花瓣衰老進程。本發明專利技術還提供了包含所述PsILR基因的載體、重組菌及其應用。

    【技術實現步驟摘要】

    本專利技術涉及基因領域,具體涉及延緩牡丹花衰老的 psilr基因、載體、重組菌及應用。


    技術介紹

    1、牡丹( paeoniasection?moutan?dc.)原產于中國,具有很高的觀賞、藥用和油用價值(wang?et?al.,?2019)。牡丹有兩千多個栽培品種,以其碩大的花朵、多樣的色彩、濃郁的香氣和富貴繁榮的象征而著稱,素有“花中之王”的美譽。牡丹常用在庭院、盆栽以及特色牡丹園中,吸引著世界各地的游客,極具觀賞和經濟價值。然而,牡丹自然花期較短,單花壽命只有3~5天。

    2、然而,牡丹為多年生木本植物,常規雜交育種效率很低;牡丹開花的遺傳基礎和分子調控機制缺乏研究,難以通過育種和栽培技術解決牡丹開花時間短的問題(guo?et?al.,2022;?zhang?et?al.,?2019a)。因此,延緩花瓣衰老和延長開花期已成為突破限制牡丹經濟效益的關鍵;挖掘花瓣衰老相關基因,揭示花瓣衰老的調控機制,對于加快牡丹長花期新品種選育具有重要指導意義,已成為觀賞園藝界的焦點之一。

    3、花瓣衰老過程與游離態iaa的含量息息相關,花瓣衰老通常伴隨著花瓣的萎焉、褪色與脫落(苗美美,2016)。在所有植物激素中,生長素在調控花瓣脫落過程中發揮重要的作用。植物體中生長素的水平升高可以抑制花瓣的脫落,而生長素含量的降低則會促進花瓣的脫落(高嬙等,2018)。

    4、生長素酰胺水解酶基因最早在擬南芥中發現(bartel,?1995),是一種參與植物激素生長素穩態的金屬酶,屬于氨基水解酶超家族,肽酶家族m20,m20d亞家族,在結構上,生長素酰胺水解酶具有兩個垂直的結構域,較大的催化結構域帶有雙核金屬中心,較小的“衛星”結構域通常作為二聚化界面,參與酶活性的穩定和調節。

    5、先前研究表明,擬南芥中atilr1、atiar3及atill2基因通過調控游離態iaa的含量進而參與調節了光照條件下下胚軸的延伸、側根的發生及根毛的延伸,其中atiar3通過水解iaa-ala參與調節擬南芥對干旱脅迫的響應。近年來,生長素對牡丹花瓣脫落發生的調控機理已有一定的研究基礎,但牡丹中有關生長素酰胺水解酶在花瓣衰老中的作用與調控機制仍不清楚。

    6、前期研究中,專利技術人測定了牡丹花瓣衰老過程中的基因表達譜,發現牡丹基因組中的 psilr基因參與了牡丹花瓣衰老進程,在延緩牡丹花衰老、延長花期方面具有應用前景,特提出本專利技術。


    技術實現思路

    1、為了解決延緩花瓣衰老和延長開花期的技術問題,本專利技術提供了延緩牡丹花衰老和延長牡丹花花期的 psilr基因,其核苷酸序列如seq?id?no:1所示。

    2、atggagtggcctttctacctctgcatctgtttgttgatgttatcaacgtcttcatgttctggattggatttgagttccctgactcgggagctattggaatcggcgagggagcaacatttttttgattggttaaaaagggttcgaagggatatgcacgagtatccagaacttgcctttgaagagcacaagacgagtcaactcattcggtcggaactcgactcgcttggggtcgaatacgtatggccagttgccaagactgggctggtggcttctattgggtccggaactcagccttggtttgctcttagagcagacatggatgccctccccattcaggaattggtagagtgggagcataagagcagaatcgatggtaaaatgcatgcttgtggccacgatgctcatgtaaccatgcttcttggagcagcgaagctacttcacaacaaacgaaatgaattaaagggcaccgttaagcttgtcttccaacctggagaagaaggtcgtggaggtgcttaccatatgttaaaagagggcgccctcgacaactttcaagccattttcggattgcacgttttgcccgagatgcccactggtaccattggttcaagacctggtccaatgcttgctggtgctggcaggtttatagcaacaattcaaggcagaggtggacacgccgcaagtccccatgtaaatagagatccaatccttgcagcatcctttacaatcgttgcactccaacaaattgtttcgcgagagacagatcctctcgaggccagggtggtcacagtcgggttcatagagggtggtcaagcagtaaatgtaatcccagaaactgtaagatttggaggcactttcaggagcatgactacagaaggtctattctatgttcaacaaaggatcaaagagattgtggagaagcaggcagctgtgcatcggtgtaatgcttcagtcgacttcatggaggagacattaaggccttatccagctacggttaatgatgaaacaatgtacaaacatgggaaaaggattggagaagtattgcttgggaaaccgaatgtgcaacttattccgatgactatgggggcagaggatttcagcttctattcgcagaagctggcagctgctttttttatgattggggcgaagaatgacaccctaaaatcagatatacgggtgcactctccacactttgtaattgatgaagaggttcttgccataggagcagctttgcatgctgcagtggccatatcatacttggatggtcatgttgttgattag(seq?idno:1)

    3、進一步地,所述 psilr基因編碼的psilr蛋白的氨基酸序列如seq?id?no:2所示。

    4、mewpfylcicllmlstsscsgldlssltrellesareqhffdwlkrvrrdmheypelafeehktsqlirseldslgveyvwpvaktglvasigsgtqpwfalradmdalpiqelvewehksridgkmhacghdahvtmllgaakllhnkrnelkgtvklvfqpgeegrggayhmlkegaldnfqaifglhvlpemptgtigsrpgpmlagagrfiatiqgrgghaasphvnrdpilaasftivalqqivsretdplearvvtvgfieggqavnvipetvrfggtfrsmtteglfyvqqrikeivekqaavhrcnasvdfmeetlrpypatvndetmykhgkrigevllgkpnvqlip本文檔來自技高網...

    【技術保護點】

    1.?一種延緩牡丹花衰老和延長牡丹花花期的PsILR基因,其特征在于,所述PsILR基因的核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所示。

    2.?一種延緩牡丹花衰老和延長牡丹花花期的PsILR蛋白,其特征在于,PsILR蛋白的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:2所示。

    3.一種載體,其特征在于,所述載體為質粒載體,包含權利要求1所述的PsILR基因。

    4.?如權利要求3所述的載體,其特征在于,所述載體為pSuper?1300-GFP載體或pBI121載體與PsILR基因重組獲得的質粒。

    5.一種重組菌,其特征在于,所述重組菌包含權利要求3或4所述的載體。

    6.如權利要求5所述的重組菌,其特征在于,所述重組菌為大腸桿菌或農桿菌。

    7.如權利要求6所述的重組菌,其特征在于,所述重組菌為大腸桿菌(E.coli)菌株DH5ɑ、農桿菌菌株GV3101、或農桿菌菌株EHA105。

    8.權利要求1所述的PsILR基因、權利要求2所述的PsILR蛋白、權利要求3或4所述的載體、或權利要求5-7任一項所述的重組菌在延緩牡丹花瓣衰老,和/或延長牡丹花花期的應用。

    9.如權利要求8所述的應用,其特征在于,所述應用包括如下①-③任一方式:

    ...

    【技術特征摘要】

    1.?一種延緩牡丹花衰老和延長牡丹花花期的psilr基因,其特征在于,所述psilr基因的核苷酸序列如seq?id?no:1所示。

    2.?一種延緩牡丹花衰老和延長牡丹花花期的psilr蛋白,其特征在于,psilr蛋白的氨基酸序列如seq?id?no:2所示。

    3.一種載體,其特征在于,所述載體為質粒載體,包含權利要求1所述的psilr基因。

    4.?如權利要求3所述的載體,其特征在于,所述載體為psuper?1300-gfp載體或pbi121載體與psilr基因重組獲得的質粒。

    5.一種重組菌,其特征在于,...

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:劉春英顧佳張靖涵杜雨蓋樹鵬張玉喜袁延超
    申請(專利權)人:青島農業大學
    類型:發明
    國別省市:

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