System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和長度必須引用該字符串內的位置。 參數名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 无码 免费 国产在线观看91 ,亚洲av永久中文无码精品,亚洲大尺度无码无码专区 
  • 

  • 
<ul id="o6k0g"></ul>
    <ul id="o6k0g"></ul>
    

    

    
    
      
    
          
          
    
            
    
                
    
                    
    
                        
    
                            
    一種間充質干細胞擴增抑制細胞老化的培養(yǎng)基及方法技術
    
                            
    技術編號：43632799 閱讀：20 留言：0更新日期：2024-12-11 15:14
    
                        
    
                        
    
                            
                            本發(fā)明專利技術屬于干細胞技術領域，具體涉及一種間充質干細胞擴增抑制細胞老化的培養(yǎng)基及方法，該培養(yǎng)基包括cAMP通路激活劑和雙特異性絡氨酸磷酸化調節(jié)激酶抑制劑。本發(fā)明專利技術提出了使用cAMP通路激活劑和雙特異性絡氨酸磷酸化調節(jié)激酶抑制劑I?NDY促進間充質干細胞體外擴增和抑制細胞老化的方法，MSC采用本發(fā)明專利技術的培養(yǎng)基進行近15代培養(yǎng)后，表面標記蛋白、三向分化功能正常，且與常規(guī)培養(yǎng)基培養(yǎng)的P10代MSC細胞相比，細胞增殖速度、細胞老化等指標上具有明顯改善。
    
                            
                            
    


    
                            

                            
    【技術實現步驟摘要】
    
                                
    本專利技術涉及一種間充質干細胞擴增抑制細胞老化的培養(yǎng)基及方法，屬于干細胞。

    技術介紹
    1、間充質干細胞(msc)在細胞和組織修復治療中發(fā)揮著多重作用，以及具有良好的可獲取性和通用性，被認為是臨床細胞治療的重要藥物。然而，在成年個體的多種組織中，msc的存在數量相對較少，限制了其在臨床治療中的直接應用。為了獲得足夠的細胞量以滿足臨床給藥的需求，必須對成體組織來源的msc進行體外擴增，這一過程往往需要長時間的傳代。
    2、傳統(tǒng)的msc擴增方法主要采用的是平面二維體系擴增法，這種方法存在一些局限性，長期在二維平面體系中傳代的細胞，可能會出現功能下降、老化和增殖速度減緩等問題，特別是細胞老化現象，會顯著影響細胞治療的最終效果。為了確保療效，通常推薦使用體外擴增4代至6代的人類及動物成體組織msc。因此，如何克服在二維平面培養(yǎng)體系中msc易老化的問題，以及如何提升這些細胞在長期傳代過程中的擴增能力，成為了干細胞治療領域亟需解決的一個技術問題。這一技術問題是否得到解決直接關系到細胞的藥效和產量，對于提高臨床治療的成功率具有重大的影響。
    3、為了解決上述技術問題，本領域技術人員正在探索多種新的方法和技術。三維培養(yǎng)體系可以為細胞提供更加接近生理狀態(tài)的環(huán)境，有助于維持細胞的多向分化潛能和延長細胞的生命周期。此外，自動化和計算機控制的生物反應器技術可以提供更加精確和可控的培養(yǎng)條件，優(yōu)化細胞的擴增效率；基因改造技術的應用，如crispr-cas9基因敲除技術、病毒超表達系統(tǒng)等，也為改善msc的特性和功能提供了新的可能性。
    4、然而，3d培養(yǎng)、自動化控制及基因改造等方法存在高成本、不易規(guī)模化等缺點，如果能在二維平面擴增體系中改善msc的老化、增殖能力，達到降低成本、易于進行規(guī)模化的效果，將有助于解決msc細胞產業(yè)化面臨的問題。

    技術實現思路
    1、本專利技術針對現有技術的上述技術問題，提供一種間充質干細胞擴增抑制細胞老化的培養(yǎng)基及方法。
    2、本專利技術解決上述技術問題的技術方案如下：
    3、本專利技術的目的之一在于提供一種間充質干細胞擴增抑制細胞老化的培養(yǎng)基，包括camp(環(huán)磷腺苷)通路激活劑和雙特異性絡氨酸磷酸化調節(jié)激酶抑制劑。
    4、在上述技術方案的基礎上，本專利技術還可以做出如下的改進：
    5、進一步，所述camp通路激活劑為毛喉素(forskolin)。
    6、進一步，所述雙特異性絡氨酸磷酸化調節(jié)激酶抑制劑為indy，其中，indy即1-(3-乙基-5-羥基-1,3-苯并噻唑-2-亞甲基)丙酮，cas號為1169755-45-6。
    7、進一步，所述間充質干細胞擴增抑制細胞老化的培養(yǎng)基包括細胞基礎培養(yǎng)基、體積分數為10％的胎牛血清、10μm毛喉素、20μm?indy。
    8、進一步，所述細胞基礎培養(yǎng)基為dmem低糖培養(yǎng)基。
    9、進一步，該間充質干細胞擴增抑制細胞老化的培養(yǎng)基的配置過程包括以下步驟：
    10、(1)準備細胞基礎培養(yǎng)基、胎牛血清、10mm濃度的毛喉素、20mm濃度的indy以及酸堿度調節(jié)劑；
    11、(2)按照各組分的組成和配比，將胎牛血清、毛喉素、indy加入所述細胞基礎培養(yǎng)基中，混合均勻；
    12、(3)調節(jié)酸堿度：檢測步驟(2)得到的初品培養(yǎng)基的ph值，調整ph值至7.0-7.5，過濾，即得到所述間充質干細胞擴增抑制細胞老化的培養(yǎng)基，進行室溫復溫后，可用于msc培養(yǎng)。
    13、進一步，所述酸堿度調節(jié)劑為naoh溶液和nahco3溶液，其中，naoh溶液濃度為1mol/l，nahco3溶液質量體積分數為1％。
    14、進一步，步驟(1)中，
    15、毛喉素的配置包括：毛喉素加入二甲基亞砜中溶解完全得到10mm濃度的毛喉素；
    16、indy的配置包括：indy加入至二甲基亞砜中溶解完全得到20mm濃度的indy。
    17、本專利技術的目的之二在于提供一種間充質干細胞擴增抑制細胞老化的方法，采用上述間充質干細胞擴增抑制細胞老化的培養(yǎng)基，培養(yǎng)方式選擇二維平面培養(yǎng)。
    18、進一步，上述方法具體包括以下步驟：
    19、(1)間充質干細胞進行復蘇后，或者傳代消化后，離心去除殘留凍存液收集單細胞，用所述間充質干細胞擴增抑制細胞老化的培養(yǎng)基重懸后，以2.0x106細胞/平方厘米的密度在二維平面培養(yǎng)器具中接種，在細胞培養(yǎng)箱中以37℃、5％co2條件靜置培養(yǎng)；
    20、(2)培養(yǎng)4-5天后進行傳代：每天進行換液，并觀察細胞形態(tài)及匯合度，至80％以上匯合度后，使用胰酶或者accutase進行細胞消化，使用含有胎牛血清的培養(yǎng)基進行終止消化后，離心計數，繼續(xù)重復(1)中接種方法，進行二維平面靜置培養(yǎng)；
    21、(3)后續(xù)傳代：參考(2)中操作進行培養(yǎng)，每4-5天傳一代，使用胰酶或者accutase將培養(yǎng)的細胞消化為單細胞，同上操作進行傳代培養(yǎng)。
    22、進一步，所述二維平面培養(yǎng)器具為培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿或者培養(yǎng)孔板。
    23、本專利技術的有益效果在于：本專利技術提出了使用camp通路激活劑毛喉素(forskolin)和雙特異性絡氨酸磷酸化調節(jié)激酶(dyrk1蛋白)抑制劑indy促進間充質干細胞體外擴增和延緩細胞老化的方法，msc采用本專利技術的培養(yǎng)基進行近15代培養(yǎng)后，表面標記蛋白、三向分化功能仍然維持正常，同時與常規(guī)培養(yǎng)基培養(yǎng)的p10代msc相比，其在增殖速度、細胞老化等指標上具有明顯改善。
    本文檔來自技高網    ...
                            
    
                            
    【技術保護點】
    
                                
    1.一種間充質干細胞擴增抑制細胞老化的培養(yǎng)基，其特征在于，包括cAMP通路激活劑和雙特異性絡氨酸磷酸化調節(jié)激酶抑制劑。
    2.根據權利要求1所述的間充質干細胞擴增抑制細胞老化的培養(yǎng)基，其特征在于，所述cAMP通路激活劑為毛喉素。
    3.根據權利要求1所述的間充質干細胞擴增抑制細胞老化的培養(yǎng)基，其特征在于，所述雙特異性絡氨酸磷酸化調節(jié)激酶抑制劑為INDY。
    4.根據權利要求1或2或3所述的間充質干細胞擴增抑制細胞老化的培養(yǎng)基，其特征在于，包括細胞基礎培養(yǎng)基、體積分數為10％的胎牛血清、10μM毛喉素、20μM?INDY。
    5.根據權利要求4所述的間充質干細胞擴增抑制細胞老化的培養(yǎng)基，其特征在于，所述細胞基礎培養(yǎng)基為DMEM低糖培養(yǎng)基。
    6.根據權利要求5所述的間充質干細胞擴增抑制細胞老化的培養(yǎng)基，其特征在于，其配置過程包括以下步驟：
    7.根據權利要求6所述的間充質干細胞擴增抑制細胞老化的培養(yǎng)基，其特征在于，所述酸堿度調節(jié)劑為NaOH溶液和NaHCO3溶液。
    8.根據權利要求6所述的間充質干細胞擴增抑制細胞老化的培養(yǎng)基，其特征在于，步驟(1)中，
    9.一種間充質干細胞擴增抑制細胞老化的方法，其特征在于，采用如權利要求1-8任一項所述的間充質干細胞擴增抑制細胞老化的培養(yǎng)基，選擇二維平面培養(yǎng)的方式。
    10.根據權利要求9所述的間充質干細胞擴增抑制細胞老化的方法，其特征在于，包括以下步驟：
    ...
                            
    
                            
    【技術特征摘要】
    
                                
    1.一種間充質干細胞擴增抑制細胞老化的培養(yǎng)基，其特征在于，包括camp通路激活劑和雙特異性絡氨酸磷酸化調節(jié)激酶抑制劑。
    2.根據權利要求1所述的間充質干細胞擴增抑制細胞老化的培養(yǎng)基，其特征在于，所述camp通路激活劑為毛喉素。
    3.根據權利要求1所述的間充質干細胞擴增抑制細胞老化的培養(yǎng)基，其特征在于，所述雙特異性絡氨酸磷酸化調節(jié)激酶抑制劑為indy。
    4.根據權利要求1或2或3所述的間充質干細胞擴增抑制細胞老化的培養(yǎng)基，其特征在于，包括細胞基礎培養(yǎng)基、體積分數為10％的胎牛血清、10μm毛喉素、20μm?indy。
    5.根據權利要求4所述的間充質干細胞擴增抑制細胞老化的培養(yǎng)基，其特征在于，所述細胞...
                            
    
                            
    【專利技術屬性】
    
                                技術研發(fā)人員：劉靖，宋益哲，
    
        申請(專利權)人：國科明耀山東醫(yī)學科技有限公司，
    
        類型：發(fā)明
    
        國別省市：
    
                            
    
                            
                        
    
                    
    
                    
                    
                     
                
    
                
    
                    
    相關技術
    
                    
    
                        
      
                            

                            
						暫無相關專利
                        
    
                    
    
                
    
                
    
                    
    
                        網友詢問留言
                        已有0條評論
                    
    
                    
    
                        
    
                            
      
                                
    • 
                                
						

      還沒有人留言評論。發(fā)表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。
      


                              
                            
    
                            
    
                                 1 

                            
    
                        
    
                        
                        
    
                            
    
                              
                            
    
                            
                        
    
                    
    
                
    
            
    
              
             
          
    
      
    
    
    

    
    
    




  


主站蜘蛛池模板：
西西大胆无码视频免费|
亚洲AV无码一区二区大桥未久|
亚洲精品无码鲁网中文电影|
中文字幕乱码人妻无码久久
|
亚洲国产精品无码久久九九大片|
亚洲AV无码之国产精品|
国产热の有码热の无码视频|
影音先锋无码a∨男人资源站|
无码国产午夜福利片在线观看|
免费无码专区毛片高潮喷水
|
亚洲大尺度无码专区尤物|
曰产无码久久久久久精品
|
国产精品多人p群无码|
无码视频一区二区三区|
精品成在人线AV无码免费看|
亚洲成AV人片在线播放无码|
日韩AV无码不卡网站|
人妻少妇看A偷人无码精品|
久久久久亚洲AV片无码下载蜜桃|
亚洲日韩精品无码一区二区三区|
亚洲国产精品无码久久九九|
亚洲av无码一区二区三区天堂|
亚洲av专区无码观看精品天堂|
人妻少妇伦在线无码专区视频|
亚洲成AV人在线播放无码|
免费看无码特级毛片|
亚洲无码精品浪潮|
久久精品无码一区二区app|
国产成人无码免费网站|
亚洲Aⅴ无码一区二区二三区软件|
a级毛片无码免费真人|
国产精品无码久久久久久久久久|
久久国产精品成人无码网站|
免费无码AV片在线观看软件|
亚洲av永久中文无码精品|
免费无码AV片在线观看软件|
毛片无码一区二区三区a片视频|
人妻少妇精品无码专区漫画|
毛片无码一区二区三区a片视频|
亚洲heyzo专区无码综合|
无码av无码天堂资源网|