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【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)屬于pcr,具體涉及一種試劑盒及其在檢測病原體中的應(yīng)用及產(chǎn)品。
技術(shù)介紹
1、快速、便捷地同時(shí)檢測多種病原體是遺傳和醫(yī)藥領(lǐng)域的普遍追求?,F(xiàn)有的檢測方法對(duì)復(fù)雜、精密設(shè)備依賴度較高,應(yīng)用場景受限。另外,在同時(shí)檢測多種病原體,尤其是同時(shí)檢測多種遺傳關(guān)系較近的病原體時(shí),檢測準(zhǔn)確度往往很低,且檢測靈敏度不高。
2、因此,如果能提供一種產(chǎn)品,可以同時(shí)檢測多種病原體,且能夠在野外、人員流動(dòng)密集場所、普通百姓家中等就完成檢測,將具有重要的現(xiàn)實(shí)意義和推廣價(jià)值。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本專利技術(shù)的目的是提供一種試劑盒及其在檢測病原體中的應(yīng)用及產(chǎn)品。
2、為實(shí)現(xiàn)上述專利技術(shù)目的,本專利技術(shù)所采用的技術(shù)方案是:
3、一種試劑盒,所述試劑盒包括中層結(jié)構(gòu)和下層結(jié)構(gòu);所述中層結(jié)構(gòu)包括中間板,所述中間板一端設(shè)置加樣反應(yīng)倉,所述加樣反應(yīng)倉用于放置與待測樣品反應(yīng)的試劑;所述加樣反應(yīng)倉一側(cè)設(shè)置缺口,所述缺口通過樣品通道與試劑條連通;所述試劑條上設(shè)置可檢測待測樣品的檢測線和質(zhì)控線;所述下層結(jié)構(gòu)可為加樣反應(yīng)倉中進(jìn)行的反應(yīng)提供所需溫度。
4、優(yōu)選的,所述下層結(jié)構(gòu)包括加熱片,所述加熱片與電源電性連接。
5、優(yōu)選的,所述試劑盒包括上層結(jié)構(gòu),上層結(jié)構(gòu)包括上蓋,所述上蓋上設(shè)置加樣口;所述加樣反應(yīng)倉與上層結(jié)構(gòu)中的加樣口對(duì)應(yīng)且連通。
6、優(yōu)選的,所述樣品通道朝向所述試劑條傾斜設(shè)置。
7、引物組,所述引物組包括檢測a型流感病毒的引物b3、f3、bip
8、相應(yīng)的,所述引物組在檢測流感病毒中的應(yīng)用。
9、優(yōu)選的,所述引物組檢測流感病毒時(shí),擴(kuò)增用的lamp溶液組分包括:dna聚合酶、逆轉(zhuǎn)錄酶、rnase抑制劑、緩沖液和所述引物組的混合物。
10、優(yōu)選的,所述lamp為凍干球,凍干球中包括凍干保護(hù)劑,凍干保護(hù)劑組分包括牛血清白蛋白、海藻糖、peg20000中的任意一種或幾種的組合。
11、優(yōu)選的,所述凍干保護(hù)劑組分包括蛋白穩(wěn)定劑。
12、優(yōu)選的,所述蛋白穩(wěn)定劑為sco1、sco2中的任意一種或兩者組合。
13、相應(yīng)的,包含所述引物組的試劑條、試劑盒或檢測試紙。
14、優(yōu)選的,所述試劑盒包括中層結(jié)構(gòu)和下層結(jié)構(gòu);所述中層結(jié)構(gòu)包括中間板,所述中間板一端設(shè)置加樣反應(yīng)倉,所述加樣反應(yīng)倉用于放置與待測樣品反應(yīng)的試劑;所述加樣反應(yīng)倉一側(cè)設(shè)置缺口,所述缺口通過樣品通道與試劑條連通;所述試劑條上設(shè)置可檢測待測樣品的檢測線和質(zhì)控線;所述下層結(jié)構(gòu)可為加樣反應(yīng)倉中進(jìn)行的反應(yīng)提供所需溫度。
15、優(yōu)選的,所述下層結(jié)構(gòu)包括加熱片,所述加熱片與電源電性連接。
16、優(yōu)選的,所述試劑盒包括上層結(jié)構(gòu),上層結(jié)構(gòu)包括上蓋,所述上蓋上設(shè)置加樣口;所述加樣反應(yīng)倉與上層結(jié)構(gòu)中的加樣口對(duì)應(yīng)且連通。
17、本專利技術(shù)具有以下有益效果:
18、本專利技術(shù)提供了一組可針對(duì)性同時(shí)檢測兩種乃至多種流感病毒的引物組,檢測靈敏度和準(zhǔn)確度高。本專利技術(shù)還基于該引物組提供了一種聯(lián)檢試劑盒和檢測方法,同時(shí)結(jié)合了等溫?cái)U(kuò)增和可視化試劑條技術(shù),能夠在試劑盒中進(jìn)行擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物可通過膠體金層析試劑條進(jìn)行顯色反應(yīng),從而便捷、快速實(shí)現(xiàn)特定病原體的定性檢測。
19、本專利技術(shù)提供的試劑盒適用于各種需特定反應(yīng)溫度范圍的檢測樣本,例如利用本試劑盒進(jìn)行待檢測樣本中病毒的lamp檢測。在一些實(shí)施例中,本專利技術(shù)中的加樣反應(yīng)倉可用于放置lamp反應(yīng)試劑,并通過加熱片為lamp反應(yīng)提供反應(yīng)溫度完成lamp反應(yīng),并聯(lián)合膠體金層析試劑條進(jìn)行顯色反應(yīng),實(shí)現(xiàn)了在測試樣本時(shí),操作者僅需要將待測樣本滴加到加樣反應(yīng)倉中即可在該試劑盒上完成lamp反應(yīng)和擴(kuò)增產(chǎn)物檢測,操作便捷、快速。所述樣品通道優(yōu)選為傾斜設(shè)置,傾斜設(shè)置一方面可以增大加樣反應(yīng)倉的反應(yīng)體積,為加樣反應(yīng)倉中的待測樣本反應(yīng)提供更充足的空間,另一方面,lamp反應(yīng)結(jié)束后,再加入層析緩沖液混合,當(dāng)總?cè)芤撼^加樣反應(yīng)倉最小容納體積后,反應(yīng)液即可通過樣品通道流向試劑條,便于反應(yīng)后的樣品更好、更充分地流向試劑條。
本文檔來自技高網(wǎng)...【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.一種試劑盒,其特征在于:所述試劑盒包括中層結(jié)構(gòu)和下層結(jié)構(gòu);所述中層結(jié)構(gòu)包括中間板(30),所述中間板(30)一端設(shè)置加樣反應(yīng)倉(31),所述加樣反應(yīng)倉(31)用于放置與待測樣品反應(yīng)的試劑;所述加樣反應(yīng)倉(31)一側(cè)設(shè)置缺口,所述缺口通過樣品通道(32)與試劑條(33)連通;所述試劑條(33)上設(shè)置可檢測待測樣品的檢測線和質(zhì)控線;所述下層結(jié)構(gòu)可為加樣反應(yīng)倉(31)中進(jìn)行的反應(yīng)提供所需溫度。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述試劑盒,其特征在于:所述下層結(jié)構(gòu)包括加熱片(41),所述加熱片(41)與電源電性連接。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述試劑盒,其特征在于:所述試劑盒包括上層結(jié)構(gòu),上層結(jié)構(gòu)包括上蓋(20),所述上蓋(20)上設(shè)置加樣口(21);所述加樣反應(yīng)倉(31)與上層結(jié)構(gòu)中的加樣口(21)對(duì)應(yīng)且連通。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述試劑盒,其特征在于:所述樣品通道(32)朝向所述試劑條(33)傾斜設(shè)置。
5.引物組,其特征在于:所述引物組包括檢測A型流感病毒的引物B3、F3、BIP、FIP、LB、LF,序列分別如SEQ?ID?NO:1~6所示;所述引物
6.權(quán)利要求5所述引物組在檢測流感病毒中的應(yīng)用。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述應(yīng)用,其特征在于:所述引物組檢測流感病毒時(shí),擴(kuò)增用的LAMP溶液組分包括:DNA聚合酶、逆轉(zhuǎn)錄酶、RNase抑制劑、緩沖液和所述引物組的混合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述應(yīng)用,其特征在于:所述LAMP為凍干球,凍干球中包括凍干保護(hù)劑,凍干保護(hù)劑組分包括牛血清白蛋白、海藻糖、PEG20000中的任意一種或幾種的組合。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述應(yīng)用,其特征在于:所述凍干保護(hù)劑組分包括蛋白穩(wěn)定劑。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述應(yīng)用,其特征在于:所述蛋白穩(wěn)定劑為SCO1、SCO2中的任意一種或兩者組合。
11.包含或利用權(quán)利要求5所述引物組的試劑條、試劑組合物、試劑盒或檢測試紙。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述試劑盒,其特征在于:所述試劑盒包括中層結(jié)構(gòu)和下層結(jié)構(gòu);所述中層結(jié)構(gòu)包括中間板(30),所述中間板(30)一端設(shè)置加樣反應(yīng)倉(31),所述加樣反應(yīng)倉(31)用于放置與待測樣品反應(yīng)的試劑;所述加樣反應(yīng)倉(31)一側(cè)設(shè)置缺口,所述缺口通過樣品通道(32)與試劑條(33)連通;所述試劑條(33)上設(shè)置可檢測待測樣品的檢測線和質(zhì)控線;所述下層結(jié)構(gòu)可為加樣反應(yīng)倉(31)中進(jìn)行的反應(yīng)提供所需溫度。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述試劑盒,其特征在于:所述下層結(jié)構(gòu)包括加熱片(41),所述加熱片(41)與電源電性連接。
14.根據(jù)權(quán)利要求12所述試劑盒,其特征在于:所述試劑盒包括上層結(jié)構(gòu),上層結(jié)構(gòu)包括上蓋(20),所述上蓋(20)上設(shè)置加樣口(21);所述加樣反應(yīng)倉(31)與上層結(jié)構(gòu)中的加樣口(21)對(duì)應(yīng)且連通。
15.根據(jù)權(quán)利要求12所述試劑盒,其特征在于:所述樣品通道(32)朝向所述試劑條(33)傾斜設(shè)置。
...【技術(shù)特征摘要】
1.一種試劑盒,其特征在于:所述試劑盒包括中層結(jié)構(gòu)和下層結(jié)構(gòu);所述中層結(jié)構(gòu)包括中間板(30),所述中間板(30)一端設(shè)置加樣反應(yīng)倉(31),所述加樣反應(yīng)倉(31)用于放置與待測樣品反應(yīng)的試劑;所述加樣反應(yīng)倉(31)一側(cè)設(shè)置缺口,所述缺口通過樣品通道(32)與試劑條(33)連通;所述試劑條(33)上設(shè)置可檢測待測樣品的檢測線和質(zhì)控線;所述下層結(jié)構(gòu)可為加樣反應(yīng)倉(31)中進(jìn)行的反應(yīng)提供所需溫度。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述試劑盒,其特征在于:所述下層結(jié)構(gòu)包括加熱片(41),所述加熱片(41)與電源電性連接。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述試劑盒,其特征在于:所述試劑盒包括上層結(jié)構(gòu),上層結(jié)構(gòu)包括上蓋(20),所述上蓋(20)上設(shè)置加樣口(21);所述加樣反應(yīng)倉(31)與上層結(jié)構(gòu)中的加樣口(21)對(duì)應(yīng)且連通。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述試劑盒,其特征在于:所述樣品通道(32)朝向所述試劑條(33)傾斜設(shè)置。
5.引物組,其特征在于:所述引物組包括檢測a型流感病毒的引物b3、f3、bip、fip、lb、lf,序列分別如seq?id?no:1~6所示;所述引物組包括檢測b型流感病毒的引物b3、f3、bip、fip、lb、lf,序列分別如seq?id?no:7~12所示。
6.權(quán)利要求5所述引物組在檢測流感病毒中的應(yīng)用。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述應(yīng)用,其特征在于:所述引物組檢測流感病毒時(shí),擴(kuò)增用的lamp溶液組分包括:dna聚合酶、逆轉(zhuǎn)錄酶、rnase抑制劑、緩沖液和所述引物組的混合物。...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員:馬亞飛,孫曉亮,
申請(qǐng)(專利權(quán))人:翌圣生物科技上海股份有限公司,
類型:發(fā)明
國別省市:
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