【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于微生物，涉及一種產生果膠酶的菌株及在漢麻脫膠中的應用。
技術介紹
1、漢麻是漢麻科漢麻屬的一年生草本植物，是最早應用于紡織業的植物之一。我國的漢麻種植歷史悠久，產量居世界第一。漢麻纖維是從漢麻桿上分離得到的韌皮組織，通常也稱為原麻。漢麻纖維的化學組分主要包括纖維素和膠質兩大類，后者則主要由果膠、水溶物、半纖維素和木質素等非纖維素成分構成。膠質會影響漢麻纖維的可紡性，因此原麻需要經過脫膠處理才能作為紡織原料使用。
2、目前工業上常用的脫膠方法包括物理脫膠、化學脫膠和生物脫膠。物理脫膠是使用碾壓、超聲波及氣爆等方法進行處理，但該法脫膠不徹底，且能耗一般較高；化學脫膠是通過堿處理或氧化處理的方法進行脫膠，其脫膠效果好、工藝較為成熟，但仍存在著能耗高、污染大等問題；生物脫膠是利用微生物或酶的作用特異性地分解原麻中的膠質、保留纖維素成分的方法，該方法工藝簡單、能耗較低、綠色環保。然而，目前能用于漢麻脫膠的菌株種類少，酶活及酶產量低，這些因素限制了生物脫膠技術的推廣應用。
3、常用于漢麻脫膠的微生物包括真菌和細菌兩大類。與細菌相比，真菌在漢麻脫膠中具有明顯的優勢：一是真菌的酶產量大、酶活性高；二是真菌對于木質素等抗降解成分具有較強的分解能力，而細菌一般不能降解木質素；三是真菌噴施后更容易在漢麻表面定植，并產生孢子擴散，能長時間地發揮脫膠作用。因此整體而言，真菌的脫膠能力更強、效果更好。然而，真菌在應用上也有一些障礙：一方面，真菌的酶系更加豐富，它在分解膠質時往往同時產生纖維素酶，這會導致漢麻纖維水解、損
技術實現思路
1、針對現有技術的不足之處，提供一種產生果膠酶的菌株及在漢麻脫膠中的應用，其只產生果膠酶，不產生纖維素酶，將菌株發酵液噴灑至漢麻桿可使菌株在漢麻表皮定植生長即可提升漢麻的脫膠效果；其有效提高漢麻雨露脫膠效果，加快雨露脫膠速度，提高漢麻麻皮與麻桿的分離效果，促進漢麻纖維產業的高質量發展。
2、所述產生果膠酶的菌株的分類明命名為沃特曼籃狀菌talaromyces?wortmannii，保藏單位為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，菌株保藏名稱為：hm01，保藏編號為：cgmcc?no、41378，保藏日期為：2024年06月20日。
3、一種產生果膠酶的菌株的應用，利用沃特曼籃狀菌talaromyces?wortmanniihm01對漢麻脫果膠。
4、進一步，利用沃特曼籃狀菌talaromyces?wortmannii?hm01發酵生產的果膠酶對漢麻脫果膠。
5、進一步，沃特曼籃狀菌talaromyces?wortmannii?hm01生產的果膠酶的過程如下：
6、a1、將菌種talaromyces?wortmannii?hm01接種于種子液培養基后置于搖床中，搖床恒溫28℃、轉速180rpm培養48h后獲得種子液；
7、a2、將種子液按0.5％(v/v)的比例轉接到發酵培養基中后放入搖床，搖床恒溫28℃轉速180rpm培養96h獲得酶活發酵液；
8、a3、將酶活發酵液在相對離心力為13000g的條件下離心5min，收集上清液，測定上清液中的果膠酶活性達到324u/ml。
9、進一步，所述種子液培養基成分為：果膠10g/l，(nh4)2so4?1.5g/l，k2hpo4?1.0g/l，kcl0.5g/l，mgso4?0.5g/l，feso4?0.1g/l。
10、進一步，所述發酵培養基成分為：陳皮粉10g/l，(nh4)2so4?1.5g/l，k2hpo4?1.0g/l，kcl0.5g/l，mgso4?0.5g/l，feso4?0.1g/l。
11、進一步，用于果膠酶生產的沃特曼籃狀菌talaromyces?wortmannii?hm01的篩選過程如下：
12、b1、沃特曼籃狀菌的富集培養：選取表面具有霉點、霉斑的漢麻桿，將其表皮揭下后剪成約5mm的小段置于無菌生理鹽水中充分震蕩，隨后將其梯度稀釋涂布于馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基pda，于28℃培養3天后從pda中挑取形態學上符合真菌特征的菌株進行初篩。
13、b2、初篩：將初篩得到的菌株進行菌種純化，將菌種點種于固體纖維素培養基的中央，于28℃培養5天后向固體纖維素培養基表面滴加剛果紅溶液進行染色，選擇不能在纖維素培養基生長或不具有明顯透明圈的菌株進行復篩；
14、b3、復篩：將初篩所得菌株點種于固體果膠培養基的中央，于28℃培養5天后向固體果膠培養基表面滴加碘液進行染色，測定和計算其透明圈直徑與菌落直徑的比值，選取比值最大的一株菌即為篩選后的菌種。
15、一種利用果膠酶在漢麻脫膠中的應用，將菌種talaromyces?wortmannii?hm01接種于種子液培養基中，搖床轉速180rpm、溫度28℃培養48h，接著將所得種子液按0.5％(v/v)的比例轉接到pda培養基中，搖床轉速180rpm、溫度28℃培養96h獲得脫膠發酵液；將脫膠發酵液噴灑在漢麻桿上，脫膠發酵液在漢麻桿表皮引起明顯的菌株定植現象，并提升脫膠的效果。
16、進一步，利用脫膠發酵液處理漢麻桿具體步驟如下：
17、c1、微生物定植分析：將漢麻桿截成20cm的長度平鋪在容器內；將脫膠發酵液裝入噴壺內，以0.1ml發酵液/g漢麻的比例噴灑至漢麻桿表面；隨后將漢麻桿于室溫環境靜置3天，觀察漢麻表面微生物定植情況；
18、c2、脫膠效果測定：將脫膠發酵液在13000g、4℃的條件下離心5min，取上清液；將漢麻表皮用清水清洗晾干，隨后按1:1(w/v)的比例將表皮浸于發酵上清液中，于搖床28℃、100rpm的條件下孵育5h即可實現脫膠處理。
19、進一步，將孵育后的漢麻表皮用清水清洗晾干，稱量處理前后漢麻表皮的干重從而計算出脫膠率，脫膠率＝[(處理前干重-處理后干重)/處理前干重]×100％。
20、有益效果：a、本專利技術所用的菌株talaromyces?wortmannii?hm01生長速度快，發酵周期短，在以陳皮粉為碳源的發酵培養基中果膠酶活性高，能作為生產果膠酶的菌株資源；b、本專利技術所用的菌株talaromyces?wortmannii?hm01在pda培養基中能產生高活性的果膠酶，但幾乎不產生纖維素酶，可有效避免粗發酵液噴施至漢麻桿后對漢麻纖維造成損害；c、本專利技術所用的菌株talaromyces?wortmannii?hm01在pda培養基中不形成菌絲球，可不進行額外處理直接裝載于噴壺、農機、無人機等設備進行噴灑，不會堵塞管路、噴口；d、本專利技術所用的菌株talaromyces?wortmannii?h本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種產生果膠酶的菌株，其特征在于：所述產生果膠酶的菌株的分類明命名為沃特曼籃狀菌Talaromyces?wortmannii，保藏單位為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，菌株保藏名稱為：HM01，保藏編號為：CGMCC?No、41378，保藏日期為：2024年06月20日。
2.一種權利要求1所述產生果膠酶的菌株的應用，利用沃特曼籃狀菌Talaromyceswortmannii?HM01對漢麻脫果膠。
3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，沃特曼籃狀菌Talaromyces?wortmanniiHM01發酵生產的果膠酶對漢麻脫果膠。
4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，沃特曼籃狀菌Talaromyces?wortmanniiHM01生產果膠酶的過程如下：
5.據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述種子液培養基成分為：果膠10g/L，(NH4)2SO41.5g/L，K2HPO4?1.0g/L，KCl?0.5g/L，MgSO4?0.5g/L，FeS
6.據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述發酵培養基成分為：陳皮粉10g/L，(NH4)2SO41.5g/L，K2HPO4?1.0g/L，KCl?0.5g/L，MgSO4?0.5g/L，FeSO4?0.1g/L。
7.據權利要求4所述的應用，其特征在于，用于果膠酶生產的沃特曼籃狀菌Talaromyces?wortmannii?HM01的篩選過程如下
8.一種利用權利要求4所述果膠酶在漢麻脫膠中的應用，其特征在于，將菌種Talaromyces?wortmannii?HM01接種于種子液培養基中，搖床轉速180rpm、溫度28℃培養48h，接著將所得種子液按0.5％(v/v)的比例轉接到PDA培養基中，搖床轉速180rpm、溫度28℃培養96h獲得脫膠發酵液；將脫膠發酵液噴灑在漢麻桿上，脫膠發酵液在漢麻桿表皮引起明顯的菌株定植現象，并提升脫膠的效果。
9.據權利要求8所述的應用，其特征在于，利用脫膠發酵液處理漢麻桿具體步驟如下：
10.據權利要求9所述的應用，其特征在于，將孵育后的漢麻表皮用清水清洗晾干，稱量處理前后漢麻表皮的干重從而計算出脫膠率，脫膠率＝[(處理前干重-處理后干重)/處理前干重]×100％。
...【技術特征摘要】
1.一種產生果膠酶的菌株，其特征在于：所述產生果膠酶的菌株的分類明命名為沃特曼籃狀菌talaromyces?wortmannii，保藏單位為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，菌株保藏名稱為：hm01，保藏編號為：cgmcc?no、41378，保藏日期為：2024年06月20日。
2.一種權利要求1所述產生果膠酶的菌株的應用，利用沃特曼籃狀菌talaromyceswortmannii?hm01對漢麻脫果膠。
3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，沃特曼籃狀菌talaromyces?wortmanniihm01發酵生產的果膠酶對漢麻脫果膠。
4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，沃特曼籃狀菌talaromyces?wortmanniihm01生產果膠酶的過程如下：
5.據權利要求4所述的應用，其特征在于，所述種子液培養基成分為：果膠10g/l，(nh4)2so41.5g/l，k2hpo4?1.0g/l，kcl?0.5g/l，mgso4?0.5g/l，feso4?0.1g/l。
6.據權利要求4所述的...
【專利技術屬性】
技術研發人員：劉偉杰，劉佳文，董振，張瑩，劉聰，孫地，朱靜榕，
申請(專利權)人：江蘇師范大學，
類型：發明
國別省市：
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