【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及一種鮮鐵皮石斛精制多糖的制備方法和應用，屬于中藥制藥領域。
技術介紹
1、肝臟和胃作為酒精代謝的主要部位，往往會受到刺激而損傷，引發諸多病癥。酒精性肝病(alcoholicliver?disease，ald)是最常見的慢性肝病，在中國已成為繼病毒感染之后的第二大肝損傷原因。由于ald病理機制復雜，目前尚無有效的臨床治療手段和藥物。鐵皮石斛在我國已經有兩千多年的藥用歷史。藥典記載其具有益胃生津、滋陰清熱、抗疲勞等功效。現代研究證明多糖是鐵皮石斛的主要有效成分，水溶性多糖高達22.7％，具有治療胃腸道炎癥、改善肝功能、降血糖、抗氧化等多種藥理活性。2023年鐵皮石斛也被正式列入藥食同源名單，安全性得到普遍認可。可見鐵皮石斛及其多糖類成分在養胃護肝解酒保健品和藥品的開發上具有廣泛的前景。
2、鮮藥是指采收的新鮮動物、植物中藥原料，不經過加工、炮制等處理，直接應用于治療。鮮藥的活性成分沒有變化與損失，保留了藥物原有的天然藥物的特性，療效更佳，在臨床上的應用歷史悠久。收錄于2020版《中華人民共和國藥典》的鮮藥有7種，分別為地黃、石斛、生姜、蘆根、益母草、魚腥草和牡荊葉。文獻《鮮、干鐵皮石斛多糖成分及抗氧化活性的差異研究》報道，鮮石斛多糖體內外抗氧化活性均強于干石斛多糖。
3、鐵皮石斛多糖的提取方法主要有熱水提取法、酶解提取法、超聲波輔助提取法、微波輔助提取法、超高壓提取法等。例如:專利申請號為“201510747301.5”的中國專利“一種鐵皮石斛多糖的提取方法”以及專利申請號為“201510362
4、所以，目前無論是對于鮮鐵皮石斛多糖的制備方法還是對鮮石斛多糖在生物體中活性功能都有待進一步深入研究。
技術實現思路
1、本專利技術所要解決的第一個技術問題是提供一種鮮鐵皮石斛精制多糖。
2、本專利技術所要解決的第二個技術問題是提供一種鮮鐵皮石斛精制多糖的快速制備方法。
3、本專利技術所要解決的第三個技術問題是提供一種具有保肝、解酒功效的鮮鐵皮石斛精制多糖。
4、本專利技術所要解決的第四個技術問題是提供所述的含鮮鐵皮石斛多糖復方在制備具有解酒護肝養胃藥物中的應用。
5、本專利技術所要解決的第五個技術問題是提供所述的含鮮鐵皮石斛多糖復方在制備具有增強肝功能免疫力的保健食品中的應用。
6、為解決上述技術問題，本專利技術采用以下技術方案：
7、第一方面，本專利技術提供了一種鮮鐵皮石斛精制多糖，該精制多糖是一種含有o-乙酰基結構的葡甘露聚糖，其主鏈主要由→4)-β-d-glcp-(1→、→4)-β-d-manp-(1→和→4)-2-o-acetyl-β-d-manp-(1→這三種糖苷鍵連接而成，其重復連接單元為：
8、
9、，其中manp為甘露糖,glcp為葡萄糖。
10、所述的鮮鐵皮石斛精制多糖，該多糖重均分子量為2.32×105da，糖含量為90.78％，糖醛酸含量為0.22％，蛋白質含量為0.09％，甘露糖和葡萄糖的占比達到99.61％，甘露糖與葡萄糖之比為2.65。
11、第二方面，本專利技術提供了一種鮮鐵皮石斛精制多糖的制備方法，所述制備方法按照如下步驟進行：
12、(1)取鮮鐵皮石斛適量，加30倍量的純水，榨汁，取濾液；
13、(2)將濾液在60℃～70℃溫度下減壓濃縮成濃縮液，以80％的乙醇濃度對其進行沉淀，靜置過夜，離心后得到沉淀。對沉淀進行純水溶解離心，接著再次醇沉，重復2次。將多糖沉淀進行冷凍干燥，得鮮鐵皮石斛粗多糖；
14、(3)將鮮鐵皮石斛粗多糖，加入適量的純水，使其充分溶解，配制成濃度約為5mg/ml的多糖溶液，然后加入多糖溶液體積三分之一的sevag試劑(v氯仿:v正丁醇＝4:1)，混合后持續攪拌混合30分鐘。靜置片刻，離心去除沉淀。重復攪拌、離心的操作，直至攪拌后無明顯沉淀，得粗多糖脫蛋白樣品；
15、(4)將脫蛋白處理后的多糖樣品溶解于適量的純水中，充分攪拌以確保完全溶解。然后緩慢加入無水乙醇，同時逐漸加快攪拌速度，使溶液中的乙醇濃度達到40％。通過離心分離出沉淀物，得到40％乙醇沉淀的多糖(dop40)；依次向上清液中繼續添加無水乙醇至60％、80％的乙醇濃度，離心得到60％乙醇沉淀的多糖(dop60)和80％乙醇沉淀的多糖(dop80)。分別將其冷凍干燥，得到不同醇沉組分多糖；
16、(5)將60％乙醇沉淀的多糖樣品用水溶解，上樣deae-sepharose?fast?flow柱，用超純水洗脫，自動收集器收集，蠕動泵流速為2.5ml/min，每10ml收集一管，苯酚硫酸法測定吸光度，每個梯度洗至無糖被檢出，根據吸收峰合并相同流份，在50℃～60℃溫度下減壓濃縮，冷凍干燥，得鮮鐵皮石斛半精制多糖；
17、(6)將鮮鐵皮石斛半精制多糖用水溶解，上樣sephadex?g-100柱，用超純水洗脫，自動收集器收集，蠕動泵流速為0.2ml/min，2ml收集一管，苯酚硫酸法測定吸光度，每個梯度洗至無糖被檢出，根據吸收峰合并相同流份，在50℃～60℃溫度下減壓濃縮，冷凍干燥，得鮮鐵皮石斛精制多糖dop60-1a。
18、第三方面，本專利技術提供了根據上述制備方法制得的鮮鐵皮石斛精制多糖在制備解酒護肝養胃藥物中的應用。
19、建立乙醇誘導的aml-12細胞損傷模型，以及小鼠急性酒精性肝損傷模型，發現本專利技術鮮鐵皮石斛精制多糖能夠通過抑制炎癥，調節脂質代謝來對小鼠酒精性肝損傷發揮緩解和保護作用；在急性醉酒動物模型中，證實鮮鐵皮石斛精制多糖可使醉酒小鼠的醉酒時間延后，醒酒時間提前，肝adh、aldh活性顯著升高，同時可有效改善胃黏膜損傷狀態，效果與陽性藥相近。
20、本專利技術提供了一種用于防治酒精誘導的急慢性肝損傷的鮮鐵皮石斛多糖復方制劑。
21、第四方面，本專利技術提供所述的含鮮鐵皮石斛多糖復方在制備具有解酒護肝養胃藥物中的應用。
22、第五方面，本專利技術提供所述的含鮮鐵皮石斛多糖復方在制備具有增強肝功能免疫力的保健食品中的應用。
23、上述鮮鐵皮石斛多糖復方制劑制備步驟如下：
24、取上述1～3份鮮鐵皮石斛精制多糖、4～6份葛根提取物、1～3份枳椇子提取物，1～3份番茄籽油混合，加入藥學上可接受的輔料，矯味劑羅漢果甜苷和防腐劑山梨酸鉀，按藥劑學上的常規方法制成口服劑制劑，即得。
25、該中藥制劑劑型為口服制劑，它可以是硬膠囊、軟膠囊、片劑、顆粒劑、散劑、丸劑、袋泡茶、軟糖、口服液、飲料中的任意一種，使用方便。
26、葛根提取物、枳本文檔來自技高網...
【技術保護點】
1.一種鮮鐵皮石斛精制多糖，其特征在于，該精制多糖是一種含有O-乙酰基結構的葡甘露聚糖，其主鏈主要由→4)-2-O-acetyl-β-D-Manp-(1→、→4)-β-D-Manp-(1→和→4)-β-D-Glcp-(1→這三種糖苷鍵連接而成，其重復連接單元為：
2.如權利要求1所述的鮮鐵皮石斛精制多糖，其特征在于，制備方法包括如下步驟：
3.如權利要求1所述的鮮鐵皮石斛精制多糖在制備解酒護肝養胃藥物中的應用。
4.一種用于防治酒精誘導的急慢性肝損傷的鮮鐵皮石斛多糖復方制劑，其特征在于：由下述重量份的成分制備而成：1～3份權利要求1所述的鮮鐵皮石斛精制多糖、4～6份葛根提取物、1～3份枳椇子提取物，1～3份番茄籽油混合。
5.如權利要求4所述的一種用于防治酒精誘導的急慢性肝損傷的鮮鐵皮石斛多糖復方制劑，其特征在于：取各成分混合，加入藥學上可接受的輔料，矯味劑羅漢果甜苷和防腐劑山梨酸鉀，按藥劑學上的常規方法制成口服劑制劑。
6.如權利要求4所述的一種用于防治酒精誘導的急慢性肝損傷的鮮鐵皮石斛多糖復方制劑，其特征在于：葛根提
7.如權利要求6所述的一種用于防治酒精誘導的急慢性肝損傷的鮮鐵皮石斛多糖復方制劑，其特征在于：葛根提取物中葛根素含量占比不低于10％，枳椇子提取物中枳椇子黃酮含量不低于為2％。
...【技術特征摘要】
1.一種鮮鐵皮石斛精制多糖，其特征在于，該精制多糖是一種含有o-乙酰基結構的葡甘露聚糖，其主鏈主要由→4)-2-o-acetyl-β-d-manp-(1→、→4)-β-d-manp-(1→和→4)-β-d-glcp-(1→這三種糖苷鍵連接而成，其重復連接單元為：
2.如權利要求1所述的鮮鐵皮石斛精制多糖，其特征在于，制備方法包括如下步驟：
3.如權利要求1所述的鮮鐵皮石斛精制多糖在制備解酒護肝養胃藥物中的應用。
4.一種用于防治酒精誘導的急慢性肝損傷的鮮鐵皮石斛多糖復方制劑，其特征在于：由下述重量份的成分制備而成：1～3份權利要求1所述的鮮鐵皮石斛精制多糖、4～6份葛根提取物、1～3份枳椇子提取物，1～3份番茄籽油混合。
5.如權利要求4所述的一種用于防治酒精誘導的急慢性...
【專利技術屬性】
技術研發人員：胡楊，劉群，程建明，魏孟光，趙勉，邱雨軒，葉德寶，劉子涵，袁源，潘安，蔡云，
申請(專利權)人：南京中醫藥大學，
類型：發明
國別省市：
還沒有人留言評論。發表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。