【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及微生物制劑，尤其涉及一種草酸青霉菌在降解異丙甲草胺和促進(jìn)土壤解磷中的應(yīng)用及含有該草酸青霉的制劑。
技術(shù)介紹
1、異丙甲草胺是一種用途廣泛且持久性強(qiáng)的氯乙酰胺類除草劑，常用于防治玉米、棉花、馬鈴薯和大豆等作物上的一年生禾本科雜草和闊葉雜草。異丙甲草胺作為常用除草劑，其在土壤中持久性要強(qiáng)于莠去津和乙草胺等氯乙酰胺類其他除草劑品種。由于其水溶性相對較高，因此易淋溶到地下水中及徑流到地表水。同時，異丙甲草胺也是一種可能的人類致癌物，被美國環(huán)保局確定為c類致癌物。因此其引起的的環(huán)境問題和人類健康問題日益嚴(yán)重，亟待解決。
2、研究發(fā)現(xiàn)異丙甲草胺等一些除草劑主要通過功能微生物進(jìn)行降解，功能微生物通過將除草劑等農(nóng)藥作為碳源或者與其他營養(yǎng)物質(zhì)通過共代謝的方式進(jìn)行降解，從而加快除草劑在土壤中的消減。因此，開發(fā)微生物菌劑降解技術(shù)成為異丙甲草胺污染土壤修復(fù)的重要技術(shù)保障。
3、但當(dāng)前農(nóng)田土壤減污培肥微生物技術(shù)的開發(fā)還處于初級階段，大量菌株功能單一，并不適用于農(nóng)田實(shí)際環(huán)境的需要，微生物需要配伍強(qiáng)化后投施來提升系統(tǒng)穩(wěn)定性同時豐富實(shí)際需要互補(bǔ)的菌種功能。然而當(dāng)前菌群構(gòu)建往往僅為少數(shù)細(xì)菌根據(jù)相應(yīng)功能的堆砌，在實(shí)際環(huán)境中穩(wěn)定性差，功能發(fā)揮受限，這也是當(dāng)前限制微生物調(diào)控技術(shù)大面積推廣應(yīng)用的主要技術(shù)瓶頸之一。
4、依據(jù)現(xiàn)階段研究發(fā)現(xiàn)，功能真菌可以與細(xì)菌構(gòu)建復(fù)合菌群協(xié)同發(fā)揮其功能，結(jié)合實(shí)驗(yàn)室研究發(fā)現(xiàn)草酸青霉菌對異丙甲草胺有較好降解作用，同時其可用于植物病害防治，已知的防病機(jī)制有分泌酶解類物質(zhì)、誘導(dǎo)抗性等，并具有溶磷、降
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本專利技術(shù)的目的在于提供一種草酸青霉菌在降解異丙甲草胺和促進(jìn)土壤解磷中的應(yīng)用及含有該草酸青霉的制劑，為解決農(nóng)田中異丙甲草胺殘留量較高等問題，本專利技術(shù)的在于給出一種微生物菌劑，用于降解農(nóng)田土壤中異丙甲草胺，該微生物菌劑有較好的降解異丙甲草胺的能力，并給出該微生物菌劑的制備方法和應(yīng)用技術(shù)。
2、為了實(shí)現(xiàn)上述專利技術(shù)目的，本專利技術(shù)提供以下技術(shù)方案：
3、本專利技術(shù)提供了一種草酸青霉菌在降解異丙甲草胺和/或促進(jìn)土壤解磷中的應(yīng)用，所述草酸青霉菌的保藏名稱為草酸青霉菌met-f-1，拉丁文名為penicillium?oxalicum，保藏地點(diǎn)為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏日期為2018年5月24日，保藏編號為cgmcc?no.15861。
4、作為優(yōu)選，所述草酸青霉菌的dna基因序列如seq?id?no.1所示。
5、本專利技術(shù)還提供了草酸青霉菌met-f-1在制備降解異丙甲草胺和/或促進(jìn)土壤解磷的制劑中的應(yīng)用。
6、本專利技術(shù)還提供了一種制備降解異丙甲草胺和/或促進(jìn)土壤解磷的制劑的制備方法，包括如下步驟：
7、(1)將草酸青霉菌met-f-1接種到培養(yǎng)基中，培養(yǎng)后得到綠色的草酸青霉菌met-f-1的菌絲；
8、(2)將草酸青霉菌met-f-1的菌絲轉(zhuǎn)接到水中，得到草酸青霉菌met-f-1孢子懸液；
9、(3)將草酸青霉菌met-f-1菌液和麥麩混合，培養(yǎng)后得到所述制劑。
10、作為優(yōu)選，步驟(1)中所述培養(yǎng)基以水為溶劑，含有如下濃度的原料：馬鈴薯浸粉4～8g/l、瓊脂15～25g/l、葡萄糖15～25g/l；所述培養(yǎng)基的ph值為5.4～5.8，所述培養(yǎng)基使用前115～121℃高壓滅菌15～25min。
11、作為優(yōu)選，步驟(1)中所述草酸青霉菌met-f-1培養(yǎng)時間為66～78h，所述培養(yǎng)的溫度為28～32℃。
12、作為優(yōu)選，步驟(2)中所述草酸青霉菌met-f-1孢子懸液的濃度為1×105cfu/g～1×107cfu/g。
13、作為優(yōu)選，步驟(3)中所述麥麩中草酸青霉菌met-f-1孢子懸液的接種量為麥麩質(zhì)量的10～20％。
14、作為優(yōu)選，步驟(3)中所述制劑中草酸青霉菌met-f-1的有效活菌數(shù)為1.5×108cfu/g～3.5×108cfu/g。
15、本專利技術(shù)還提供了所述制備方法制備得到的降解異丙甲草胺和/或促進(jìn)土壤解磷的制劑。
16、本專利技術(shù)提供了一種草酸青霉菌在降解異丙甲草胺和促進(jìn)土壤解磷中的應(yīng)用及含有該草酸青霉的制劑，所述草酸青霉菌的保藏名稱為草酸青霉菌met-f-1，拉丁文名為penicillium?oxalicum，保藏地點(diǎn)為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏日期為2018年5月24日，保藏編號為cgmcc?no.15861。
17、本專利技術(shù)發(fā)現(xiàn)，真菌與細(xì)菌的相互作用在新污染物的共代謝生物轉(zhuǎn)化中發(fā)揮了重要作用，本專利技術(shù)的草酸青霉菌met-f-1不僅在極端環(huán)境條件下存活能力強(qiáng)，而且其菌和分泌物可作為土著降解功能細(xì)菌運(yùn)移載體及輔助碳源(如圖1所示)。真菌和細(xì)菌經(jīng)常共生在同一微區(qū)域進(jìn)行營養(yǎng)循環(huán)和其他生物地理化學(xué)過程，如有機(jī)污染物的生物轉(zhuǎn)化。絲狀真菌由于具有空間填充的菌絲結(jié)構(gòu)而高度適應(yīng)異質(zhì)環(huán)境，有能力將它們菌絲體內(nèi)的營養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)到寡營養(yǎng)區(qū)為功能細(xì)菌提供營養(yǎng)而達(dá)到污染物降解的目的。
18、本專利技術(shù)的草酸青霉菌met-f-1增加菌群對農(nóng)藥、抗生素和激素等新污染物的降解效率，還可通過靜電、黏附和纏結(jié)機(jī)制改善土壤水文特性和土壤團(tuán)聚性，同時也能夠分泌草酸等有機(jī)酸，降低土壤ph，達(dá)到解磷效果，從而促進(jìn)作物生長。結(jié)合其特性，利用該真菌去進(jìn)行met污染土壤修復(fù)具有很強(qiáng)可行性，根據(jù)實(shí)驗(yàn)室對不同負(fù)載材料研究發(fā)現(xiàn)，以麥麩作為負(fù)載草酸青霉菌的有效活菌數(shù)最多(如表1所示)，因此后續(xù)研究選擇麥麩負(fù)載功能菌。此項(xiàng)功能真菌復(fù)合細(xì)菌的修復(fù)技術(shù)將呈現(xiàn)出新質(zhì)生產(chǎn)力的重要作用，為農(nóng)田土壤去污增效提供強(qiáng)有力的技術(shù)保障。
19、保藏說明
20、草酸青霉菌，保藏名稱為草酸青霉菌met-f-1，拉丁文名為penicilliumoxalicum，保藏地點(diǎn)為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏日期為2018年5月24日，保藏地址為北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，保藏編號為cgmcc?no.15861。
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1.一種草酸青霉菌在降解異丙甲草胺和/或促進(jìn)土壤解磷中的應(yīng)用，其特征在于，所述草酸青霉菌的保藏名稱為草酸青霉菌MET-F-1，拉丁文名為Penicillium?oxalicum，保藏地點(diǎn)為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏日期為2018年5月24日，保藏編號為CGMCCNo.15861。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述草酸青霉菌的DNA基因序列如SEQ?IDNO.1所示。
3.草酸青霉菌MET-F-1在制備降解異丙甲草胺和/或促進(jìn)土壤解磷的制劑中的應(yīng)用。
4.一種制備降解異丙甲草胺和/或促進(jìn)土壤解磷的制劑的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，步驟(1)中所述培養(yǎng)基以水為溶劑，含有如下濃度的原料：馬鈴薯浸粉4～8g/L、瓊脂15～25g/L、葡萄糖15～25g/L；所述培養(yǎng)基的pH值為5.4～5.8，所述培養(yǎng)基使用前115～121℃高壓滅菌15～25min。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，步驟(1)中所述草酸青霉菌MET-F-1的培養(yǎng)時間
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，步驟(2)中所述草酸青霉菌MET-F-1孢子懸液的濃度為1×105CFU/g～1×107CFU/g。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，步驟(3)中所述麥麩中草酸青霉菌MET-F-1孢子懸液的接種量為麥麩質(zhì)量的10～20％。
9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，步驟(3)中所述制劑中草酸青霉菌MET-F-1的有效活菌數(shù)為1.5×108CFU/g～3.5×108CFU/g。
10.權(quán)利要求4～9所述制備方法制備得到的降解異丙甲草胺和/或促進(jìn)土壤解磷的制劑。
...【技術(shù)特征摘要】
1.一種草酸青霉菌在降解異丙甲草胺和/或促進(jìn)土壤解磷中的應(yīng)用，其特征在于，所述草酸青霉菌的保藏名稱為草酸青霉菌met-f-1，拉丁文名為penicillium?oxalicum，保藏地點(diǎn)為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏日期為2018年5月24日，保藏編號為cgmccno.15861。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述草酸青霉菌的dna基因序列如seq?idno.1所示。
3.草酸青霉菌met-f-1在制備降解異丙甲草胺和/或促進(jìn)土壤解磷的制劑中的應(yīng)用。
4.一種制備降解異丙甲草胺和/或促進(jìn)土壤解磷的制劑的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，步驟(1)中所述培養(yǎng)基以水為溶劑，含有如下濃度的原料：馬鈴薯浸粉4～8g/l、瓊脂15～25g/l、葡萄糖15～25g/l；所述培養(yǎng)...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：孫揚(yáng)，陳鵬濤，李曉晶，趙麗霞，王世通，葉會科，白默涵，楊丹，
申請(專利權(quán))人：農(nóng)業(yè)農(nóng)村部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測所，
類型：發(fā)明
國別省市：
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