【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及生物防治，尤其涉及一種銅綠假單胞菌·棘孢木霉復(fù)合微生物菌劑及其制備方法和應(yīng)用。
技術(shù)介紹
1、辣椒是溫室大棚和露地主栽蔬菜作物之一。然而，隨著辣椒種植面積的增長(zhǎng)和種植年限的延長(zhǎng)，加上蔬菜種植種類相對(duì)單一、氣候條件變化、化肥農(nóng)藥過(guò)量使用、連作等不利因素影響，導(dǎo)致辣椒疫病等土傳病害和土壤連作障礙加重，已成為嚴(yán)重影響辣椒產(chǎn)量和品質(zhì)的主要病害之一。辣椒疫病的致病菌是辣椒疫霉菌(phytophthoracapsici)，其寄主廣泛，能夠侵染辣椒、番茄、黃瓜等多種作物，可以在土壤中長(zhǎng)期存活，且病原菌積累到一定量后，可導(dǎo)致絕收，造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。
2、不僅是辣椒作物，當(dāng)前，生產(chǎn)上對(duì)于辣椒疫病等土傳病害防治仍主要依賴于化學(xué)防治，而化學(xué)殺菌劑的長(zhǎng)期大量使用引起了土壤水體污染加重、農(nóng)產(chǎn)品殘留超標(biāo)、病害抗藥性增強(qiáng)等諸多問(wèn)題，導(dǎo)致土壤質(zhì)量和瓜菜品質(zhì)下降、經(jīng)濟(jì)效益降低，對(duì)土壤微生態(tài)環(huán)境影響較大，嚴(yán)重影響了瓜菜產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)健康發(fā)展。尤其在當(dāng)前農(nóng)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展的時(shí)代背景下，瓜菜產(chǎn)業(yè)的高質(zhì)量和綠色發(fā)展更為重要。因此，微生物農(nóng)藥以其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)已成為辣椒疫病等瓜菜土傳病害防治的主要內(nèi)容。與目前使用化學(xué)農(nóng)藥防治相比，由于生防菌來(lái)自于土壤或植株體，具有高效、低毒、不污染環(huán)境和不易產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點(diǎn)，具有廣闊的應(yīng)用前景。
3、假單胞菌在自然界分布廣泛，種類繁多，廣泛分布于植物體及土壤中，是植物根際土壤周圍起生物防治功能的主要細(xì)菌類群。目前，世界各地對(duì)假單胞菌的應(yīng)用研究有了大量的報(bào)道，涉及領(lǐng)域包括用于農(nóng)業(yè)生物防治、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)、環(huán)境保護(hù)
4、木霉屬(trichoderma?sp.)真菌在世界范圍內(nèi)分布廣泛，其既是土壤微生物的重要群落之一，也是一種植物內(nèi)生真菌，從土壤、植物根際、莖部、葉片、種子及球莖表面、枯枝落葉腐木等植物殘?bào)w以及其它真菌的子實(shí)體上等均可分離到。現(xiàn)有研究資料表明，木霉菌在農(nóng)業(yè)、工業(yè)、環(huán)境保護(hù)等方面有著廣泛的應(yīng)用價(jià)值，其在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域的應(yīng)用表現(xiàn)尤為突出，現(xiàn)已有多種木霉菌生防菌劑、生物菌肥、誘抗劑、種子包衣劑等產(chǎn)品獲得登記和商業(yè)化生產(chǎn)并在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中發(fā)揮了重要作用。其中主要以哈茨木霉(trichoderma?harzianum)居多，其次為綠色木霉(trichoderma?viride)。相對(duì)于土壤木霉菌，內(nèi)生木霉菌的研究起步較晚，相關(guān)的報(bào)道較少，但由于內(nèi)生木霉菌可與寄主植物共生，在抗病、抗逆性、穩(wěn)定性等方面優(yōu)勢(shì)明顯，其自身的抗病、抗逆性較強(qiáng)等許多優(yōu)勢(shì)，目前越來(lái)越得到研究者的重視，開發(fā)和應(yīng)用潛力巨大。有關(guān)棘孢木霉單一菌株或與不同芽孢桿菌復(fù)配成菌劑的應(yīng)用相對(duì)較多，但棘孢木霉與假單胞菌復(fù)配的菌劑及其應(yīng)用很少(例如專利號(hào)為cn201210365179的專利)，更缺少在防治辣椒疫病應(yīng)用的復(fù)合微生物菌劑。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、解決的技術(shù)問(wèn)題：針對(duì)現(xiàn)有的單一生防菌劑對(duì)辣椒疫病等防效較低、穩(wěn)定性較差等缺點(diǎn)，本專利技術(shù)提供一種銅綠假單胞菌·棘孢木霉復(fù)合微生物菌劑及其制備方法和應(yīng)用，該復(fù)合微生物菌劑能夠有效解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的辣椒疫病等土傳病害和連作障礙問(wèn)題，且對(duì)辣椒等瓜菜植株促生長(zhǎng)作用明顯。
2、技術(shù)方案：一種棘孢木霉·銅綠假單胞菌復(fù)合微生物菌劑，以質(zhì)量份計(jì)含有以下成分：
3、銅綠假單胞菌固體發(fā)酵物：31～42.5份，
4、棘孢木霉固體發(fā)酵物：31～42.5份，
5、助劑：13～30份，
6、增效劑：2～8份；
7、所述復(fù)合微生物菌劑中有效孢子數(shù)＞1010cfu/g；所述銅綠假單胞菌于2022年09月13日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(cgmcc)，保藏編號(hào)為cgmccno.25697；所述棘孢木霉于2023年08月09日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(cgmcc)，保藏編號(hào)為cgmcc?no.40752。
8、上述所述的助劑為白炭黑、麥麩中的一種或兩種。
9、上述所述的增效劑為殼寡糖、生化黃腐酸中的一種或兩種。
10、上述所述的一種銅綠假單胞菌·棘孢木霉復(fù)合微生物菌劑，以質(zhì)量份計(jì)含有以下成分：銅綠假單胞菌固體發(fā)酵物：31～42.5份，棘孢木霉固體發(fā)酵物：31～42.5份，白炭黑：3～10份，麥麩：10～20份，殼寡糖：1～3份，生化黃腐酸：1～5份。
11、上述所述的一種銅綠假單胞菌·棘孢木霉復(fù)合微生物菌劑，以質(zhì)量份計(jì)含有以下成分：銅綠假單胞菌固體發(fā)酵物：36.5份，棘孢木霉固體發(fā)酵物：36.5份，白炭黑：8份，麥麩：12份，殼寡糖：3份，生化黃腐酸：4份。
12、上述所述的一種銅綠假單胞菌·棘孢木霉復(fù)合微生物菌劑的制備方法，該方法的步驟如下：
13、步驟一、銅綠假單胞菌固體發(fā)酵物和棘孢木霉固體發(fā)酵物的制備：
14、1)將深層保存于-80℃的銅綠假單胞菌和棘孢木霉的菌株取出，分別制備得到銅綠假單胞菌種子發(fā)酵液和棘孢木霉種子發(fā)酵液，
15、2)將麥麩、玉米芯粉、玉米秸稈粉、水以重量比為15:9:6:70混合后，加入磷酸二氫鉀，在121℃條件下滅菌40min，得到固體發(fā)酵培養(yǎng)基，其中磷酸二氫鉀的重量為麥麩、玉米芯粉、玉米秸稈粉、水總重量的1％，
16、3)將銅綠假單胞菌種子發(fā)酵液與固體發(fā)酵培養(yǎng)基以重量比為1:7.5混合，攪拌均勻后用滅菌紙覆蓋，置于溫度為32℃、相對(duì)濕度為85％以上的人工氣候箱內(nèi)培養(yǎng)3d，期間攪拌1～2次，發(fā)酵完畢后將其晾干或在32℃以下干燥，即得銅綠假單胞菌固體發(fā)酵物，置于陰涼處保存?zhèn)溆茫?/p>
17、4)將棘孢木霉種子發(fā)酵液與固體發(fā)酵培養(yǎng)基以重量比為1:7.5混合，攪拌均勻后用滅菌紙覆蓋，置于溫度為28℃、相對(duì)濕度為85％以上的人工氣候箱內(nèi)培養(yǎng)5d，期間攪拌1～2次，發(fā)酵完畢后將其晾干或在32℃以下干燥，即得棘孢木霉固體發(fā)酵物，置于陰涼處保存?zhèn)溆茫?/p>
18、步驟二、復(fù)合微生物菌劑的制備：
19、將銅綠假單胞菌固體發(fā)酵物和棘孢木霉固體發(fā)酵物混合，再與白炭黑、麥麩、殼寡糖、生化黃腐酸進(jìn)行干混，其中麥麩預(yù)先用超細(xì)破碎機(jī)粉碎以及過(guò)100目篩，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝蟮玫焦腆w粉狀物，本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.一種棘孢木霉?銅綠假單胞菌復(fù)合微生物菌劑，其特征在于以質(zhì)量份計(jì)含有以下成分：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種銅綠假單胞菌?棘孢木霉復(fù)合微生物菌劑，其特征在于：所述助劑為白炭黑、麥麩中的一種或兩種。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種銅綠假單胞菌?棘孢木霉復(fù)合微生物菌劑，其特征在于：所述增效劑為殼寡糖、生化黃腐酸中的一種或兩種。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種銅綠假單胞菌?棘孢木霉復(fù)合微生物菌劑，其特征在于以質(zhì)量份計(jì)含有以下成分：銅綠假單胞菌固體發(fā)酵物：31～42.5份，棘孢木霉固體發(fā)酵物：31～42.5份，白炭黑：3～10份，麥麩：10～20份，殼寡糖：1～3份，生化黃腐酸：1～5份。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種銅綠假單胞菌?棘孢木霉復(fù)合微生物菌劑，其特征在于以質(zhì)量份計(jì)含有以下成分：銅綠假單胞菌固體發(fā)酵物：36.5份，棘孢木霉固體發(fā)酵物：36.5份，白炭黑：8份，麥麩：12份，殼寡糖：3份，生化黃腐酸：4份。
6.如權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的一種銅綠假單胞菌?棘孢木霉復(fù)合微生物菌劑的制備方法，其特征在于該方法的步驟如下：p>
7.如權(quán)利要求1所述的一種銅綠假單胞菌?棘孢木霉復(fù)合微生物菌劑在防治辣椒疫病、西瓜枯萎病中的應(yīng)用。
...【技術(shù)特征摘要】
1.一種棘孢木霉?銅綠假單胞菌復(fù)合微生物菌劑，其特征在于以質(zhì)量份計(jì)含有以下成分：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種銅綠假單胞菌?棘孢木霉復(fù)合微生物菌劑，其特征在于：所述助劑為白炭黑、麥麩中的一種或兩種。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種銅綠假單胞菌?棘孢木霉復(fù)合微生物菌劑，其特征在于：所述增效劑為殼寡糖、生化黃腐酸中的一種或兩種。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種銅綠假單胞菌?棘孢木霉復(fù)合微生物菌劑，其特征在于以質(zhì)量份計(jì)含有以下成分：銅綠假單胞菌固體發(fā)酵物：31～42.5份，棘孢木霉固體發(fā)酵物：31～42.5份，白炭黑：3...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：康萍芝，趙沛，劉曉麗，馬建華，王喜剛，張治科，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：寧夏農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所寧夏植物病蟲害防治重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：
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